破伤风类毒素是用破伤风菌经减毒加工处理后制成的疫苗， 注射到人体后需要经过一定时间后人体才会产生自动
免疫力。因此，如果人体未接种过破伤风类毒素而发生外 伤，或是刚刚注射破伤风类毒素而自身尚产生免疫抗体时 发生外伤，为防止感染破伤风，应首先注射破伤风抗毒素， 以使被动免疫和自动免疫衔接起来，从而达到预防破伤风 的目的。
（4）吸附精致破伤风类毒素的制备:将类毒素吸附 于Al(OH)3以增强类毒素的免疫效果和减轻接种副反 应.
（5）精致类毒素的吸附:在无菌条件下,按7Lf/ml精 致类毒素加入吸附剂中,补加1/100,硫柳汞防腐剂,使 其最终含量为1/10 000.同时补加1/15mol/L,pH6.6磷酸 盐缓冲,使其含量达到1/300mol/L,搅拌均匀后分装.
(2)浓缩和精制 ：一采用超滤浓缩与硫酸铵沉淀相 结合的方法精制破伤风类毒素，即超滤、硫酸铵 沉淀、超滤三步法，可有效地提高破伤风类毒素 的制品质量。
（3）除菌过滤：将精制类毒素稀释、调整到适当 浓度（即含万分之一硫柳汞、0.85%NaCl),用5%NaOH 调pH至6.8~7.2。使用0.22um的微孔虑膜，除菌过滤 分装。
活化菌种
扩陪 33~35℃.
发酵种子
发酵 33~35℃.
发酵液
除菌过滤
滤液
破伤风工艺类毒素制造
造破 工伤 艺风1.
类 毒 素 制
1.菌种传代
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ1. 传代
2. 扩培 2.培养产毒及收获毒素
1. 发酵 2. 除菌过滤
1. 甲醛脱毒
3.脱毒和精制
2. 超滤浓缩 3. 硫酸铵沉淀法、超滤精制
1. 微孔膜除菌过滤
破伤风的治疗
1.单间隔离，加强护理，减少刺激，严防交叉感染。 2.伤口处理，彻底清创，用双氧水或１:１０００的
高锰酸钾液体冲洗，或湿敷伤口，开放伤口，绝 禁缝合。伤口已愈合，一般不需清创。 3.破伤风抗毒血清的应用：Ｔ．Ａ．Ｔ１０-２０万ｕ，
或５万加入５％葡萄糖溶液５００-１０００ｍｌ静滴。以 后每日肌注５０００-１００００单位必要时鞘内注射，人 体破伤风免疫球旦白也可应用，免于皮试。
4.除菌及吸附
2. Al(OH)3吸附
脱毒、浓缩和精制工艺
1.脱毒、浓缩和精制工艺流程
发酵滤液
脱毒
0.36%甲醛，pH 中性，37℃,30d
原制类毒素
超滤浓缩
浓缩液
0.16g/ml 硫酸铵沉淀
滤液
0.10g/ml 硫酸铵
沉淀
用注射用水溶解
过滤
滤液
超滤
去除硫酸铵
滤液
除菌过滤
pH6.8~7.2,0.22um 的微孔滤膜
破伤风类毒素的概念
破伤风类毒素: 是一种用于破伤风 病的自动免疫制剂， 是由产毒力高的破 伤风梭菌培养液经 福尔马林脱毒后精 制或毒素精制后个 脱毒而成的。
破伤风梭菌
破伤风类毒素制造工艺
（1）菌种：国内使用的生产菌种为罗马尼亚L58 株，菌号为64008
（2）发酵工艺流程：
菌种
传代 33~34℃.48h
精制类毒素溶液
Al(OH)3吸附 吸附精制破伤风类毒素 包 装 精制类毒素制剂
发酵工艺要点
1.种子: 应选用产毒效价高，免疫力强的破伤风菌株。
2.产毒培养基：国内多采用以蛋白质水解为基础，再 添加氨基酸及维生素等，在维持一定的产毒水平下， 适当加深水解，同时加入少量的甘油及炭末，以增加 厌氧环境、稳定毒素和吸附培养过程产生的有害物质， 从而提高产毒水平获取高价毒素。
破伤风类毒素培养设备
破伤风类毒素和破伤风抗毒素
破伤风类毒素是用来预防破伤风的一种免疫疫苗。为了防 止破伤风病的发生，医生给病人注射一定量的破伤风类毒 素，从而达到预防破伤风病的目的。
而破伤风抗毒素是用对破伤风病具有免疫力的人或动物血 清经加工精制而成的免疫抗体，注射到人体后，可直接对 破伤风起到抵抗的作用，但这种抗毒素是被动的，而且在 体内只能维持很短时间，因此，最根本的还是应该注射破 伤风类毒素，以使体内产生自动免疫抗体，从而达到长久 的预防皮伤风的目的。
3.培养、产毒和收获毒素：一般采用培养罐深层培养， 培养基中加炭末、甘油等以利破伤风菌生长和产毒， 在培养过程利用平压通气的方法排出破伤风菌生长过 程中产生的H2S和CO2气体。培养温度必须严格控制 在34℃，高于35 ℃或低于32 ℃产毒水平都会大幅度 降低。
1.脱毒、浓缩和精制工艺要点
（1）脱毒：收获的毒素经脱毒后即为类毒素，脱毒 一般用0.3%~0.4%的甲醛溶液。此外pH、温度及脱 毒时间等均影响脱毒效果。现采用加入0.36%的甲 醛、pH中性、37℃脱毒。
破伤风防治原则
破伤风防治原则 由于破伤风痉挛毒素能迅速与神经组织发生不可逆性结合，
故一旦发病治疗困难，所以预防尤为重要。如遇到可疑伤口 应做到清创、扩创，同时使用大剂量青霉素抑制细菌繁殖。 用破伤风抗毒素对患者进行紧急预防，对已发病的人要进行 特异性治疗。
如果人体未接种过破伤风类毒素而发生外伤，或是刚刚注射 破伤风类毒素而自身尚产生免疫抗体时发生外伤，为防止感 染破伤风，应首先注射破伤风抗毒素，以使被动免疫和自动 免疫衔接起来，从而达到预防破伤风的目的。若已经注射过 破伤风类毒素的人类发生外伤后，没有必要再注射破伤风抗 毒素，因为做为类毒素的抗原和抗毒素的抗体同时注射后也 会发生拮抗作用而使相互作用降低，失去免疫效果。
4.控制、解除肌肉强直性收缩：可用冬眠灵或苯巴 比妥 钠，１０％水合氯醛，安定，杜冷丁等。 抽搐严重时可用硫喷妥纳液体静注。
5.预防性气管切开：有呼吸困难时应用，切开后应 加强 护理，及时吸痰。
6.抗生素(头孢唑啉钠)的应用。 7.全身支持疗法
破伤风类毒素的发展历史
1884： Nicolarier通过动物实验发现了破伤风与泥土中的细菌 有关。
1889： Kitasato用减弱的毒素免疫家兔制备出破伤风抗毒素， 证明了给动物注射培养物的滤液而产生破伤风的症状，是 因为有一种毒素的存在
1889： Von behring和Kitasato用抗毒素治疗人的破伤风，证 明对有明显破伤风症状的患者，基本上是无效的
1923： Ramon报告用甲醛和热处理的方法， 制备出了有抗原性的类毒素 1926： Ramon和Zcokker用破伤风类毒素成 功地给人进行了免疫，从而开创了类毒素预防 免疫的新时代。