过程
注意事项
操作目的
(1) 滤纸预先干燥处理 使层析液在滤纸上快速扩散
分 离
(2)
滤液细线要直、细、 匀
使分离出的色素带平整不 重叠
色 素
(3)
滤液细线干燥后再 画一两次
使分离出的色素带清晰分明
(4)
滤液细线不触及层 析液
防止色素直接溶解到层析液中
【技巧点拨台】 1.从色素带的宽度可推知色素含量的多少，色素带越宽，色素 含量越多；从色素带的位置可推知色素在层析液中溶解度大小， 色素带扩散得越远，溶解度越大。 2.在滤纸条上，相邻两条色素带间距离最宽的是胡萝卜素和叶 黄素；相邻两条色素带间距离最窄的是叶绿素a和叶绿素b。
将洋葱根尖放入盛有盐 观察根尖分生
酸和酒精混合液的玻璃 组织细胞来自有皿中室温下解离丝分裂
恒温 技术
适用于有酶 参与的生化 反应
一般用水浴或恒温箱
探究温度对酶 活性的影响
方法
同位 素示 踪技 术
适用范围
用于物质代谢 以及其他实验 中以了解物质 来源或去向， 或者区分事情 结果是由于此 还是彼的缘故
处理方法或原理 教材涉及实验
1.实验中几种化学试剂的作用
化学试剂 无水乙醇
层析液 二氧化硅
碳酸钙
作用
_提__取__绿叶中的色素
_分__离__绿叶中的色素 增加杵棒与研钵间的摩擦力，破坏细胞结构， 使_研__磨__充分
防止研磨过程中_色__素__被破坏
2.替代材料 可用其他绿色叶片代替菠菜叶，但不能用大白菜等含叶绿素较 少的材料。 3.替代实验品 (1)提取液：提取液除用无水乙醇外，还可用丙酮代替。 (2)二氧化硅：用纯净的细河沙代替，使研磨更加迅速充分。 (3)碳酸钙：用碳酸钠代替碳酸钙，由于碳酸钙不溶于水，使滤 液有许多泡沫，而碳酸钠易溶于水，使滤液泡沫大大减少。
实验绿叶中色素的提取和分离
提取：绿叶中的色素溶于_有__机__溶__剂__无__水__乙__醇__而不溶于水， 可用_无__水__乙__醇__提取色素。
分离：各种色素在_层__析__液__中溶解度不同，_溶__解__度__高__的__随 _层__析__液__在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各 种色素相互分离。
实验方法：实验材料的常用处理方法和技术(同学们自已阅读) 【理论指导】 熟悉常用的实验材料处理方法和技术，理解每种方法和技术的 适用情况并熟练掌握其操作技能，可以在设计实验时进行迁移 和利用。常用处理方法主要包括以下几个方面：
方法 适用范围
研磨 过滤
适用于从 生物组织 中提取物 质，如酶、 色素等
氧化硅、碳酸钙
二 无水乙醇
一端两个角 用铅笔画线
橙黄色
叶黄素 叶绿素a 叶绿素b
黄绿色
1.为什么要在滤纸条一端剪去两角？ 提示：防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快而形成弧形色素带。 2.试分析分离色素时色素带颜色过浅的原因。 提示：(1)叶片颜色太浅； (2)叶片放置时间太久； (3)研磨不充分； (4)未加CaCO3粉末； (5)加入提取液量太多。
②绿叶放在盛水的烧杯中，煮沸3 min后取出，放入盛乙醇的烧杯 中，隔水加热；③绿叶放在盛乙醇的烧杯中，隔水加热；④绿叶放
【拓展】 在盛水的烧杯中，煮沸10 min； (1)若②③④中都变绿，颜色的深浅一样吗？ 提示：不一样。由于受加热条件的影响，溶解量不等，所以烧 杯中的颜色深浅不同。 (2)在检测绿叶进行光合作用产生淀粉时为什么要将绿叶放在盛 乙醇的烧杯中隔水加热？ 提示：放在乙醇中是为了脱去色素，避免对实验现象的干扰。 因为淀粉的检测是利用淀粉与碘反应呈现蓝色的原理。隔水加 热是为了受热均匀和安全。因为酒精易燃。
适用于溶 液中物质 的分离
处理方法或原理
教材涉及实验
纸层析法是利用物质随 层析液在滤纸上扩散速 度不同的原理，达到将 物质分离的目的。主要 步骤包括制样、制备滤 纸条、画滤液细线和层 析分离
绿叶中色素的 提取和分离
方法
解离 技术
适用范围
用于破坏细 胞壁，分散 植物细胞， 制作临时装 片
处理方法或原理 教材涉及实验
【分析】(1)绿叶中色素的提取——无水乙醇提取法；绿叶中色素的分离——纸 层析法。 (2)色素是有机物，在水中不溶解。绿叶中的色素能溶解在乙醇、丙酮等有机溶 剂中。当绿叶放在盛水的烧杯中，煮沸后，由于细胞膜和叶绿体膜变成了全透 性，叶绿素会扩散进入水中。绿叶放在研钵中研磨时会破坏细胞膜和叶绿体膜， 叶绿体色素溶解在乙醇中。
【典例训练】( 2112四川理综 30 20 分）回答下列I、II小题。 I. （7分）科研人员获得一种叶绿素b完全缺失的水稻突变 体，该突变体对强光照环境的适应能力更强。请回答： （l）提取水稻突变体的光合色素，应在研磨叶片时加
处理方法或原理
研磨时要先将生物材料 切碎，然后加入摩擦剂 (常用二氧化硅)、提取 液及其必要物质，充分 研磨之后，往往要进行 过滤，以除去渣滓，所 用过滤器具则根据需要 或根据试题中提供的器 材加以选用，如可用滤 纸、纱布、脱脂棉、尼 龙布等
教材涉及实验
绿叶中色素的 提取和分离
方法
纸层 析法
适用范围
光合作用光反
应产物——氧
气中氧的来源，
用同位素标记某种 特定元素或化合物
二氧化碳形成 葡萄糖的途径， 确定什么是遗
传物质的噬菌
体侵染细菌的
实验等
【典例分析】某同学在做“绿叶中色素的提取和分离”实验时，在实验报告 中写的原理是：绿叶中色素的提取——纸层析法；叶绿体中色素的分离—— 无水乙醇提取法。该同学在做绿叶中色素的提取时，改用下列处理方法：① 绿叶放在盛有清水的烧杯中静置2 h；②绿叶放在盛水的烧杯中，煮沸3 min 后取出，放入盛乙醇的烧杯中，隔水加热；③绿叶放在盛乙醇的烧杯中，隔 水加热；④绿叶放在盛水的烧杯中，煮沸10 min；⑤绿叶放在研钵中研磨， 然后放在盛乙醇的烧杯中。 请分析该实验的原理是否正确；改变处理方法后哪些溶液会变绿。
3.实验中的注意事项及操作目的归纳
过程
注意事项
(1) 选新鲜绿色的叶片
操作目的
使滤液中色素含量高
(2) 研磨时加无水乙醇
提 取 (3) 色
加少量SiO2和 CaCO3
素 (4) 迅速、充分研磨
(5)
盛放滤液的试管管 口加棉塞
溶解色素
研磨充分和保护色素 防止乙醇挥发，充分溶解
色素
防止乙醇挥发和色素氧化