药物含量测定方法一、巴比妥类药物1、银量法根据巴比妥类药物在适当的碱性溶液中，易与重金属离子反应，并可定量的形成盐的化学性质，可采用银量法进行本类药物及其制剂的含量测定。

在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测供试品完全形成一银盐后，继续用硝酸银滴定液滴定，稍过量的银离子就与巴比妥类药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，以此指定滴定终点。

为了减少误差，曾用丙酮作为介质来克服滴定过程中温度变化的影响和改善终点的观察，结果不能令人满意。

《中国药典》改用甲醇及3%无水碳酸钠溶剂系统，采用银-玻璃电极系统电位法指示终点，使本法获得显著改善。

测定异戊巴比妥的方法：取本品约0.2g，精密称定，加甲醇40ml使溶解，再加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。

每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。

2、酸碱滴定法巴比妥类药物成弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴定。

在水-乙醇混合溶剂中的滴定：由于巴比妥类药物在水中的溶解度较小，生成的弱酸盐易于水解，影响滴定终点的观察，故滴定时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行。

以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝色为终点。

测定方法：取本品约0.5g，精密称定，加乙醇20ml溶解后，加麝香草酚酞指示剂6滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，并将测定结果用空白试验校正，即得。

每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。

本法操作简便，但终点较难判断，采用空白对照可帮助终点的确定。

由于操作过程中易吸收空气中的二氧化碳，而使终点的淡蓝色褪去，采用空白对照亦难以取得满意的结果，因此可采用电位法指示终点。

3、紫外分光光度法巴比妥类药物在酸性介质中几乎不电离，无明显的紫外吸收，但在碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构，因此可采用紫外分光光度法测定其含量。

本法专属性强、灵敏度高，被广泛用于巴比妥类药物及其制剂的测定，以及固体制剂的溶出度和含量均匀度的检查，也常用于体内巴比妥类药物的检测。

直接测定的紫外分光光度法：本法是将供试品溶解后，根据供试品溶液的pH值，选用其相应的λmax 处，直接测定对照品溶液和供试品溶液的吸光度，在计算药物的含量。

测定方法：取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于硫喷妥钠0.25g），置500ml 量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取适量，用0.4%氢氧化钠溶液并定量稀释成每1ml中约含5μg的溶液；另取硫酸苯妥对照品，精密称定，用0.4%氢氧化钠溶液并定量稀释制成每1ml中约含有5μg的溶液。

照分光光度法，在304nm的波长处测定吸光度。

根据每支的平均装量计算。

每1mg硫喷妥相当于1.091mg的C11H17N2NaS。

供试品中硫喷妥钠的量按下式计算：硫喷妥钠（mg）=1.091*Cs*Au/As*D*10-3硫喷妥钠标示量（%）=硫喷妥钠的量（mg）*平均装量/供试品量*100%二、芳酸及其酯类药物以ASA及其制剂为例苯甲酸pKa 4.20 水杨酸pKa 2.98酸性较强羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加；并有氢键，更增加了其极性，因此，可采取直接滴定法（一）酸碱滴定法1、直接滴定法pKa 3~6 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa 6~9 的药物要用非水溶液滴定法乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解枸橼酸HOC COOHCH 2COOHCH 2COOHCitric acid中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差滴定方法：取本品约0.4g ，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）滴定。

每1ml 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。

丙磺舒(Ch.P. BP. JP 等) 苯甲酸(Ch.P 等)均采用本法 2、 水解后剩余滴定法U SP23方法：取本品约1.5g ，精密称定，准确加NaOH 液(0.5mol/L)50.0ml ，水浴上煮沸15min ，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH ，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml 的NaOH 液(0.5ml/L)相当于45.04mg 的C9H9O4OCOCH 3COOHH 2OOHCOONaCH 3COONa2NaOH H 2SO 42SO 4 2H 2O3、 两步滴定法用于Aspirin 片测定，片剂中有稳定剂水解产物 水杨酸SA HAc为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法第一步：NaOH 滴定所有的酸：ASA ，CA ，TA ，SA ，HAc 第二步COONaOCOCH3COONaOH NaAc H 2O2NaOH H 2SO 4 Na 2SO 4 2H 2O（二）双相滴定法Ch.P 2005用于苯甲酸钠的测定苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断。

因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法。

滴定方法：取本品约1.5g ，精密称定，置分液漏斗中，加水25ml 、乙醚50ml 及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L ）滴定，边滴边振摇，至水层显橙红色；分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml 洗涤，洗液并入锥形瓶中，加乙醚20ml ，继续用盐酸滴定液（0.5mol/L ）滴定边滴边振摇，至水层显持续的橙红色。

每1ml 盐酸滴定液（0.5mol/L ）相当于72.06mg 的C 7H 5NaO 2。

（三）柱分配色谱-紫外分光光度法ASA capsule 等制剂除用上述两步滴定法外，最好用色谱法，可以分离酸性杂质和辅料以及稳定剂等，经分离后同时测定ASA 与SA如USP 用柱分配色谱-UV 测定ASA Capsule （四）HPLC阿司匹林测定方法：取装量差异项下内容物，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1g ），置100ml 量瓶酒石酸HO CH COOH CHCOOHHOTrataric acid中，用1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml,置100ml 量瓶中，用1%冰醋酸无水甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl,注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照适量，用1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并定量稀释成每1ml 中约含50μg 的溶液，同法测定。

三、芳香胺类药物 1、亚硝酸钠滴定法 原理：条件：（1）加入适量溴化钾加快反应 （2）加入过量盐酸1:2.5~6（3）室温10℃～ 30℃ （4）滴定管尖端插入液面下滴定 终点指示方法： （1）永停法（2）外指示剂法（碘化钾－淀粉） 2、非水溶液滴定法注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰 盐酸丁卡因－加醋酐以突出终点；例：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：CH 3CH 3NHCOCH 2N(C 2H 5)2·HCl +Hg(Ac)2CH 3CH 3NHCOCH 2N(C 2H 5)2·HAc +HgCl 22CH 3CH 3NHCOCH 2N(C 2H 5)2·HAc +HAc 2N(C 2H 5)2·HClO 4+HClO 43、分光光度法对乙酰氨基酚在257nm 波长处有最大吸收，中国药典2005版采用百分吸收系数（ ）法，测定对乙酰氨基酚的含量。

例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂【含量测定】 取本品约40mg ，精密称定，置250ml 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml 溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml ，至100ml 量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml ，加水至刻度，摇匀，照紫外－可见分光广度法（药典Chp2005版附录ⅣA ），在257nm 的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（ ）为715计算，即得。

4、 比色法芳伯氨基的重氮化－偶合反应生成有色偶氮染料，专属性差盐酸普鲁卡因与1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液反应生成棕红色化合物，适用于盐酸普鲁卡因及其制剂的常规分析 5、快速荧光测定盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反应，生成荧光物，可在λ400nm 、λ485nm 波长处测定荧光强度，较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。

6、高效液相色谱法 ( HPLC )以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸（PABA ），不需分离提取，准确简便。

色谱条件（色谱柱、流动相、检测器）测定方法（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法） 应用示例：对乙酰氨基酚急性中毒的血药浓度测定Ar-NHCOR+H 2O H +△Ar-NH 2+RCOOH Ar-NH 2+NaNO 2+2HCl Ar-N 2+Cl -+NaCl+2H 2O色谱条件：Nova-PackC18柱（4μm, 150mm ×3.9mm ），Nova-PackC18预柱 柱温：25℃，流动相为甲醇－水（50:50）流速：0.8ml/min 二极管阵列检测器，检测波长254nm血浆样品制备：取静脉血3～4ml ，置含肝素抗凝剂的离心管中，离心分离 5min (3000rpm)，上清液为待测血浆。

吸取上述血浆1ml ，加饱和 硫酸锌溶液1ml ，沉淀蛋白后，加入乙醚5ml 涡旋混合1min ，离心 20min(3000rpm)。

精密吸取乙醚液3.0ml 于50 ℃氮气流吹干，冷 至 室温，以蒸馏水500μl 溶解残渣，取10μl 进样。

对照品溶液的制备：配制对乙酰氨基酚甲醇溶液（10mg/ml ），并用甲醇逐 级稀释成浓度为0.01mg/ml ～5mg/ml 的对照品溶液，4 ℃冰箱存放 备用。

四、苯乙胺类药物1、非水溶液滴定法－弱碱性冰醋酸为溶剂、醋酸汞消除氢卤酸的干扰、结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇，也可电位法指示终点）、若碱性较弱则加醋酐使突跃明显。

2、溴量法 基本原理：HOHC OHCH 2NHCH 3+3Br 2HO HC OHCH 2NHCH 3BrBr+3HBr Br 2+2KI 2KBr+I 2I 2+2Na 2SO 32NaI+Na 2S 4O 6测定方法：取本品约0.1g ，精密称定，置碘瓶中，加水20ml 使溶解，精密加溴 滴定液(0.1mol/L)50ml ，再加盐酸5ml,立即密塞，放置15分钟并时时振摇，注意微开瓶 塞，加碘化钾试液10ml ，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至 近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。