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Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱
Absorbance
1.0
350
0.8
Cr2O72-
0.6
0.4
0.2
300 350 400
525 545
MnO4-
500
600
-
700
/nm
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（二）结构分析
1、根据化合物的紫外-可见吸收光谱推测化合物所含的官能团
（1）200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2） 270-350 nm有吸收峰 醛酮 （3） 250-300 nm 有中等强度的吸收峰，芳环的特征 吸收 （4） 200-250 nm有强吸收峰 ，表明含有一个共轭体系 （5）260nm,300 nm,330 nm有强吸收峰，3,4,5个双键的共轭体系
（1）紫外光区有很多有机物没有吸收或吸收不强烈 （2）有机物紫外吸收光谱大体相似
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二、基本原理
当一束紫外可见光通过一透明物质时，具有某中能量的光子被吸收， 而另一些能量的光子则不被吸收，这与物质内部结构与光子能量有关， 当光子能量等于电子能级的能量差时，则此能量的光子被吸收，使电 子由基态跃迁到激发态。由于分子选择性的吸收了某些波长的光，所 以这些光的能量就会降低，将这些波长的光及其所吸收的能量按一定 顺序排列起来，就得收光谱法是利用某些物质的分子吸收 200～800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。这种分 子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级 间的跃迁，广泛用于有机和无机物质的定性和定量测定。
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3
特点：
（1）灵敏度高 （2）准确度较高 （3）方法简便 （4）应用广泛
局限性：
紫外-可见吸收光谱分析
Ultraviolet and Visible Spectroscopy, UV-VIS
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1
主要内容
• 一、概述 • 二、基本原理 • 三、紫外-可见光光度计 • 四、紫外-可见分光光度法的应用
重点：光学分析法的分类,吸收曲线,吸收定律,分光光度计,分析
方法,显色反应,定量分析方法,光度测量误差和测量条件的选择。
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④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射 狭缝； ⑤出射狭缝。
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3.样品室
样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架 附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用 石英池，可见区一般用玻璃池。
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4.检测器
利用光电效应将透过吸收池的 光信号变成可测的电信号，常用 的有光电池、光电管或光电倍增 管。
Axy 1
x1bcx
y1bcy
Axy 2
x 2
bcx
y2bcy
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3、高含量组分的测定—示差法
方法：配制一系列待测组分的浓度相差较小，且待测组分浓度与 试液浓度相近的标准溶液，以其中浓度最小的标准溶液(Cs)作参比 溶液，测定其它标准溶液的吸光度，以吸光度对测定溶液和参比溶 液的浓度差作图，得一过原点的标准曲线。
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各种有机化合物最大吸收波长和最大吸光度有确定值。同一物质 的浓度不同，光吸收曲线形状相同，最大吸收波长不变，只是相应的 吸光度大小不同，物质不同，分子结构不同，吸收光谱曲线不同。
苯的紫外吸收光谱
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三、紫外-可见分光光度计
（一）主要部件
光源
单色器
样品室
检测器
显示
1、光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射 强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
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（2）增量法
把未知试样溶液分成体积相同的若干份，除其中的一份不加入待 测组分的标准物质外，在其它几份中都分别加入不同量的标准物质。 然后测定各份试液试液的吸光度并绘制吸光度对加入的标准物质的浓 度（增量）作图，得一标准曲线。由于每份溶液中都含有待测组分， 因此，标准曲线不经过原点。将标准曲线外推延长至与横坐标交于一 点，则此点到原点的长度所对应的浓度值就是待测组分的浓度。
可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。
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2、单色器
将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长 单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；
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2、利用紫外-可见光吸收光谱来判别有机化合物的同分异构 体
例：乙酰乙酸乙酯 酮式：没有共轭双键，在206nm处有吸收 烯醇式：在245nm处有强吸收
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（三）定量分析
1、单组分物质的定量分析 （1）标准曲线法
配制一系列不同含量的待测组分的标准溶液，以不含待测组分 的空白溶液为参比，测定标准溶液的吸光度，并绘制吸光度—浓度 曲线，得到标准曲线（工作曲线），然后再在相同条件下测定试样 溶液的吸光度，由测得的吸光度在曲线上查得试样溶液中待测组分 的浓度，最后计算得到试样中待测组分的含量。
5. 显示、记录系统
检流计、数字显示、微机进行仪 器自动控制和结果处理。
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（二）分光光度计的类型
1、单光束分光光度计 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能
作全波段光谱扫描，要求光源和检测器有高的稳定性。 2、双光束分光光度计
自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变 化等因素的影响，仪器复杂，价格较高。 3、双波长分光光度计
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2、多组分的同时测定
在含有多种组分的溶液中，如果要测定多个组分，可以根据 情况的不同，采用不同的方法来进行测定。
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如果溶液中各组分之间的吸收曲线互相不干扰，可以选择适当 的不同的波长分别测定。图a)：X,Y 组份最大吸收波长不重迭， 相互不干扰，可以按两个单一组份处理。
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如果多个组分之间的吸收曲线有干扰则可利用吸光度的 加和性，以解联立方程式的方法，求得各个组分的含量或 浓度。图b)和c) ：X,Y 相互干扰，此时可通过解联立方程 组求得X和Y的浓度：
将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到 达检测器。产生交流信号。无需参比池。
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四、紫外-可见分光光度法的应用
（一）定性分析
通常根据吸收光谱的形状、吸收峰的树木以及最大吸收波 长的位置进行定性鉴定，一般采用比较光谱法，即在相同的 测定条件下，比较待测物质和已知物质的吸收光谱曲线，如 果完全等同，则可认为是同一物质。