血清总胆红素和结合胆红素的测定
一、概述
1、胆红素的代谢 2、结合胆红素和未结合胆红 素的概念
胆红素的代谢
1
4
结合胆红素和未结合胆红素的概念
未经肝脏 处理的胆 红素
间接胆红素
直接胆红素
重氮试剂
经过肝脏处理,与葡萄 糖醛酸(少量与硫酸) 结合后的胆红素
二、实验:
血清总胆红素和结合胆 红素的测定
参考值
• 血清总胆红素 5.1~19μmol/L
• 血清结合胆红素 1.7~6.8μmol/L
临床意义
• 总胆红素 ——反映黄疸的程度
• 结合胆红素 ——鉴别黄疸的类型
注意事项
• 标准和标本应尽量避光 ——胆红素对光敏感
• 避免严重溶血 ——血红蛋白可与重氮试剂反应, 产物可破坏偶氮胆红素
操作
• 样品的测定 • 校正曲线的制作
样品的测定
加入物(ml) 总胆红素管 结合胆红素管 对照管
血清
0.2
0.2
0.2
咖啡因-苯甲酸钠 1.6
--
1.6
对氨基苯磺酸
--
--
0.4
重氮试剂
0.4
0.4
--
37℃水浴10min
叠氮钠
--
0.05
--
咖啡因-苯甲酸钠
--
1.55
--
碱性酒石酸
1.2
1.2
1.2
充分混匀，波长600nm，对照管调零。
校正曲线的制作
加入物(ml)
管号
0
1
2 34
胆红素标准贮存液
--
0.1 0.2 0.3 0.4 0
(100μmol/L)
同一稀释用血清 0.2 0.4 0.3 0.2 0.1
相当于胆红素浓度 0 20 40 60 80 1
充分混匀，按总胆红素测定法操作。用0号管调零。
方法
重氮反应法 胆红素氧化酶法 直接分光光度法
改良J-G法测定血清总胆 红素和结合胆红素
原理
非结合胆红素
咖啡因-苯甲酸钠
结合胆红素
胆红素
试剂
• 咖啡因-苯甲酸钠试剂 • 碱性酒石酸钠溶液 • 对氨基苯磺酸溶液 • 重氮试剂 • 叠氮钠溶液 • 胆红素标准液(100μmol/L)
• 取空腹血 ——血脂对测定有一定的干扰
Thanks