解。 （2）约10%~20%来自于组织中非Hb的血红素，如肝中
释放的的血红素等。 （3）极少部分是由于骨髓造血过程中，生成的Hb或血红
素，以及少量未成熟RBC的分解（无效造血）产生的 血红素。
胆红素的分类
（1）未结合胆红素(Bu)：未与葡萄糖醛酸基结 合，具亲脂性，须加入加速剂破坏分子内部的 氢键后才能与重氮试剂反应，又称间接胆红素。 占总胆红素的4/5。
--
样本(ml)
--
--
0.05
混匀， 37 ℃孵育5分钟，550nm,空白管调0，读取 标准管和样本管的吸光度。
TB 操 作
空白管 标准管 样本管
工作试剂 (ml） 2.5
2.5
2.5
3 7 ℃孵育5分钟
蒸馏水(ml）
0.05 --
--
标准液(ml）
--
0.05
--
样本(ml)
--
--
0.05
混匀， 37 ℃孵育10分钟，550nm,空白管调0，读取标 准管和样本管的吸光度。
黄疸分类
根据造成黄疸的原因 (1)溶血性黄疸 (2)肝细胞性黄疸 (3)阻塞性黄疸
三种黄疸的比较
病因
溶血性黄疸
肝细胞性黄疸
阻塞性黄疸
RBC大量破坏 肝脏实质性病变 胆道阻塞
Bu
↑↑ ↑
↑↑
↑
Bc
↑
↑↑
↑↑↑
测定方法
(1) 重氮盐法 (2) 胆红素氧化酶（BOD)法 (3) 高效液相色谱法（HPLC) (4) 导数分光光度法 (5) 直接分光光度法 (6) 钒酸盐法
试剂组成 试剂A
试剂B
试剂
直接胆红素 盐酸
对-氨基苯磺酸
总胆红素 盐酸
对-氨基苯磺酸 表面活性剂
亚硝酸钠 亚硝酸钠
强调
两项目分开测定，利于时间控制。
DBi 操 作
空白管 标准管 样本管
工作试剂 (ml） 2.5
2.5
2.5
37 ℃孵育5分钟
蒸馏水(ml）
0.05 --
--
标准液(ml）
--
0.05
DBil测定原理(改良J-G法)
血清中的DBi在强酸环境中，与重氮对氨基苯磺 酸反应,生成有色偶氮胆红素, 通过测定550nm处吸 光度值的变化，即可计算出样本中DBi的浓度。
TB测定原理(改良J-G法)
血清中的结合胆红素在强酸环境中与重氮 对氨基苯磺酸反应,生成有色偶氮胆红素,非 结合胆红素在表面活性剂的作用下,也能进行 这样的反应,通过550nm比色,计算其含量。
(1.2—12mg/dL)
பைடு நூலகம்
注意事项
标准品、标本、试剂避光保存、溶解、使用。 本试剂线性范围可达300 µmol/L，超过用NS稀释。 溶血可引起测定结果偏低。 脂血及脂溶性色素可致结果假性偏高。 胆红素重氮反应对温度较敏感，测定时应予以恒温。 反应形成的色素可稳定1小时。
方法评价
在重氮试剂法中，改良J-G法有好的灵 敏度，抗干扰能力较好。
临床意义
（1）黄疸及鉴别 DBi/TB 比值<20% 溶血性黄疸 比值40%~60% 肝细胞性黄疸 比值> 60% 阻塞性黄疸
（2）肝细胞损害程度和预后的判断。 （3）新生儿黄疸病情掌握。 （4）再障等疾病，TB减少。
思考 题
TB与DBi测定中试剂有何区别，为什麽？
实验八
胆红素测定 ( 改 良 J – G 法)
实验目的
掌握总胆红素和直接胆红素 (改良J-G法)的测定原理，参考值范 围，注意事项。
胆红素测定作用
反 映 肝 脏 的 分 泌 与 排 泄 功 能。
胆红素的来源
Hb分解释放的血红素为胆红素的直接来源。 （1）约70%~80%是由衰老的RBC破坏、释放出的Hb分
计算方法
DBi浓度（umol/L)=A样/A标× DBi标准液浓度 TB浓度（umol/L) =A样/A标× TB标准液浓度 国际单位换算：
umol/L×0.0585=mg/dL
参考范围
成人直接胆红素：0—6umol/L (0--0.3mg/dL)
成人总胆红素：2--20umol/L (0.1—1.2mg/dL) 新生儿总胆红素：20--200umol/L
胆红素的分类
（2）结合胆红素(Bc) ：与葡萄糖醛酸基结合， 具亲水性，与重氮试剂直接反应，又称直接 胆红素。占总胆红素的1/5。
黄疸分类
根据总胆红素的浓度 隐性黄疸:总胆红素17.1~34.2µmol/L。 显性黄疸:总胆红素大于34.2µmol/L。
注：TB 17.1µmol/L(2mg/dL)