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贵州道地药材白芨工厂化育苗技术

408—1 410.
将在增殖与壮苗培养基中培养60 d左右的组培 苗进行驯化移栽,苗高在8—10 cm。即先将组培瓶拿 出培养室,置育苗温室进行瓶内炼苗2—3 d,然后打松 瓶盖1—2 d,让组培苗逐渐适应温室环境。再用镊子 轻轻夹出组培苗,洗去粘附的培养基,移栽于160孔漂 盘,所用基质为市售蔬菜育苗基质,覆盖塑料薄膜保持
ZHANG
Jiel,WANG Jun-jinl,FANG
Xiao.b02,SHI Jian.10n91,LIU Hong—meil
摘要:建立了白芨工厂化育苗技术,即选用白芨成熟蒴果为材 料.1/2 MS+5%土豆汁+5%白砂糖为发芽培养基,1/2
6一BA 2 mg/L+NAA 0.5 MS+
1.2培养基
2.1无菌播种
白芨种子无菌播种15—20 d后,观察到有种子开 始萌发,即种子吸胀,颜色转绿。30 d左右,种子变为 绿色小球体,即原球茎。45 d后,原球茎冒出绿色的芽 尖和幼叶。成熟度好的种子在1号、2号培养基中,萌
万方数据
种子生产
张洁等:贵州道地药材白芨]:厂化箭f制支术
发率相当,但在1号培养基萌发快,而且整齐(图1)。 对成熟度不好的种子,2号培养基萌发数量相对l号 培养基多,但在同一培养基中,常存在不同发育时期的
原球茎、芽和幼苗。
图3漂盘中驯l化45 d的白芨组培苗
3讨论
(1)激素对种子萌发的影响:许多文献报道激素 对白芨萌发影响较大¨。J。该体系表明,当白芨种子
图1 1号发芽培养基中白芨种子萌发情况
成熟度不好时,萌发率较低,添加6.BA后,能显著提 高萌发率,但在同一组培瓶中,苗长势不均匀,常存在 不同发育时期的原球茎、芽和幼苗。当种子完全成熟 时,种子萌发容易,2种发芽培养基中萌发率相当,与 袁宁等旧。的研究结果一致。而且在无激素的发芽培
Hale Waihona Puke 本文链接:/Periodical_zhongz201403035.aspx
消毒30 s,无菌水洗涤2次,再用稀释1倍的84消毒
白芨需求量急剧增加,价格逐年攀升,2013年突破500 元关口。野生白芨遭到过度采挖,数量急剧减少,又由 于白芨种子非常细小又无胚乳,在自然条件下很难萌 发和生长,资源濒临枯竭。为保护白芨野生资源,保护 生物多样性,人工繁育和栽培白芨迫在眉睫。白芨传 统栽培主要靠分株繁殖,但周期长,效率低,耗种量大, 难满足市场需求。白芨蒴果无菌播种技术已非常成 熟¨。J,但驯化栽培一直存在较大困难。课题组在长 期对白芨无菌播种基础上,攻克了驯化栽培难题,使成 活率提高到95%以上,总结出一套白芨工厂化育苗技 术体系。
基质。
采集贵州紫花白芨成熟而未开裂的蒴果。
2结果分析
收稿13期:2013—11—09 基金项目:贵州道地药材白芨工厂化育苗技术研究,贵阳医学院大学生 创新创业训练计划(编号:0212031)。 作者简介:张洁(1978一),贵州都匀人,硕士,讲师,研究方向:药用植 物组培快繁与病害防治;E—mail:705803950@qq.eom。 通讯作者:刘红美(1975一),贵州遵义人,博士,硕士生导师,研究方向: 药用植物组培快繁与病害防治;E—mail:hmliu@ganc.edu.cn。 ・114・
第33卷第3期2014年3月
种子(Seed)
V01.33
No.3
Mal.
2014
贵州道地药材白芨工厂化育苗技术
张洁1。 王军晶1, 方小波2, 石建龙1, 刘红美1
(1.贵阳医学院,
贵州贵阳550004;
2.贵州省遵义市龙驰生物科技有限公司,
贵州遵义563100)
Commercial Production Technology of Bletilla striata of Guizhou Famous—region Drug
养基中长势更均匀。
2.2增殖与壮苗培养 将无菌播种60 d后的白芨幼苗,按30株每瓶接 种于增殖与壮苗培养基中。经过一段时间的培养,叶 片伸长,幼芽长高变粗,底部出现小鳞茎(图2)。培养
45
d左右,有4叶片时,即可进行驯化移栽二
(2)生根培养:生根培养在种苗组培快繁体系中 是非常关键的一步,生根好坏或快慢将大大影响后面 的驯化成活率。相关文献对白芨组培苗生根都有报 道。该体系中,不需要对组培苗进行生根培养,整个繁 育周期缩短到160 d左右。与和寿星等¨3的2步培养
法相比,还缩短约30 d的时间。
利用无菌播种法繁育白芨种苗,可以克服自然分 株繁殖效率低、周期长等弊端,在短时间内获得大量生 长势一致的小苗。体系不经过生根培养,大大缩短了 育苗时间,降低了成本。该体系的建立对促进白芨人 工栽培产业发展以及保护野生资源都具有重要意义。
图2增殖壮苗培养基中生长45 d的白芨幼苗
MS+6-BA2
mg/L+5%土豆
增殖与壮苗培养基:1/2
0.5
MS+6-BA 2 mg/L+NAA
中图分类号:S
文献标志码:B
mg/L+5%土豆汁+5%白砂糖。
文章编号:1001—4705(2014)03-0114-02
以上培养基均加入0.45%的琼脂,pH值调整为
5.80~6.00,并在121℃下灭菌20
湿度90%以上。15 d后,按常规管理,即15 d喷1次
营养液和杀菌剂,成活率达95%以上(图3)。45 d后, 即可移栽大田。
・115・
万方数据
贵州道地药材白芨工厂化育苗技术
作者: 作者单位: 刊名: 英文刊名: 年,卷(期): 张洁, 王军晶, 方小波, 石建龙, 刘红美, ZHANG Jie, WANG Jun-jin, FANG Xiao-bo, SHI Jian-long, LIU Hong-mei 张洁,王军晶,石建龙,刘红美,ZHANG Jie,WANG Jun-jin,SHI Jian-long,LIU Hong-mei(贵阳医学院,贵州 贵阳,550004), 方小波,FANG Xiao-bo(贵州省遵义市龙驰生物科技有限公司,贵州遵义,563100) 种子 Seed 2014,33(3)
参考文献: 2.3组培苗驯化
[1]和寿星,徐中志,薛润光,等.白芨无菌播种育苗技术[J].云 南农业科技,2010(6):38—39. [2]袁宁,何俊蓉,何锐,等.白芨组培快繁育苗技术研究[J].西 南农业学报,2009,22(3):781—785. [3]管常东,叶静,郑晓君,等.白芨组织快繁育苗技术研究进展 [J].云南大学学报:自然科学版,2010,32(S 1):416—421. [4]叶静,郑晓君,管常东,等.白芨的无菌萌发与组织培养[J]. 云南大学学报:自然科学版,2010,32(s 1):422—425. [5]石云平,李锋,凌征柱.白芨组织培养与快速繁殖技术研究 [J].广西农业科学,2009,40(11):1
1号发芽培养基:1/2 MS+5%土豆汁+5%白
砂糖;
mg/L十5%土豆汁+5%白砂糖为增殖
壮苗培养基,不需生根培养,用蔬菜育苗基质和漂盘进行驯化 栽培,成活率高达95%以上,整个育苗周期为160 d左右,降低 了成本,缩短了育苗周期。 关键词: 白芨;道地药材;育苗技术
567.23
2号发芽培养基:1/2 汁+5%白砂糖;
h/d,保持湿度80%。 将无菌萌发的白芨幼芽以每瓶30株接种于增殖
1.3.2幼芽增殖与壮苗培养
与壮苗培养基。培养条件为温度(25±2)℃,光照强
度2 000~2
500
lx,光照时间12 h/d,保持湿度80%。
1.3.3组培苗驯化
1材料与方法
1.1材料
将在增殖与壮苗培养基中培养60 d后的白芨苗 进行驯化栽培,所用驯化栽培基质为市售蔬菜育苗
min。
白芨(Bletilla striata(Thumb.)Reichb.,)又名紫 兰、连及草等,为兰科白芨属多年生宿根草本植物,假 鳞茎块根状,块根为传统中药材,具有收敛止血、消肿 生肌的功效。白芨主产中国,广泛分布于长江流域各
省,尤以贵州量大、质优。随着白芨胶的提取与应用,
1.3方法
1.3.1外植体灭菌与无菌播种 将采集的成熟未开裂的蒴果先用75%酒精表面
液消毒10 min,无菌水冲洗4~5次,置无菌滤纸晾干。 在超净工作台内,用无菌刀片切去蒴果前端
0.5~1
em,然后用无菌镊子抖动蒴果,将种子播种到
发芽培养基中,为使种子均匀分布于培养基表面,在培 养基中滴适量无菌水。作好标记,置培养室培养。培 养条件为温度(25±2)℃,光照强度l
12 800
lx,光照时间
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