核酸类药物的生产
主要内容
1、 核酸药物的分类 2、核酸类药物的生产方法 3、核酸类药物的生产实例 4、核酸类药物的检测
5、核酸药物的应用
核酸药物的分类
具有天然结构的核酸类物质
天然碱基、核苷、核苷酸 的类似物或聚合物
如：DNA、RNA、肌苷、ATP、 辅酶A、脱氧核苷酸、肌苷酸等。 获得：微生物发酵或从生物资源 中提取生产。 药理功能：有助于改善机体的物 质代谢和能量代谢平衡，加速受 损组织的修复，促使机体恢复 正常生理功能。
核酸类药物的生产实例
核酸类药物的生产实例
RNA的生产
1、来源：微生物——酵母 2、RNA的提取——等电沉淀法 3、工艺过程
（1）预处理：压榨、除水 （2）提取：0.13%NaOH，使细胞壁变性，使核酸从细胞内释放 出来 （3）中和、除菌体 （4）分离：等电点法，调pH2.5，使RNA沉淀下来 洗涤、干燥
核酸类药物的生产实例
4.发酵法生产 高含量RNA酵 母及其RNA提 取工艺流程
核酸类药物的生产实例
ATP制备
基本工艺路线：
核酸类药物的生产实例
辅酶A的生产
核酸类药物的检测
1、DNA含量测定
DNA是磷酸和戊糖通过磷酸二酯键形成的长链，所以磷酸或戊糖 的量正比例于DNA的量，可通过测定磷酸或戊糖的量来测定DNA 的量，前者称为定磷法，后者称为定糖法。 （1）定磷法 磷酸与钼酸反应生成磷钼酸，再转变为钼蓝，吸收峰在660nm。 （2）定糖法——二苯胺法 670nm
核酸类药物的生产方法
核苷酸、核苷及碱基类似物的生产方法
1、酶解法
核酸类药物的生产方法
核苷酸、核苷及碱基类似物的生产方法
2、半合成法
微生物发酵与化学合成并用。 由于发酵法生产核苷的产率很高，因此可由发酵法生产 核苷后经提取，精制再经磷酸化制取核苷酸。 方法：将核苷悬浮于磷酸三甲酯或磷酸三乙酯中，在冷 却条件下加入氯化氧磷，进行磷酸化。从核苷生成5‘核苷酸收率可达90%。
如：三氟代胸苷、叠氮胸苷等。 获得：由自然结构的核酸类物质 通过半合成生产。 药理功能：治疗病毒、肿瘤、爱滋 病的重要药物，也是产生干扰素、 免疫抑制剂的临床药物。
核酸类药物的生产方法
DNA和RNA的生产方法
DNA主要存在于细胞核中，RNA主要 存在于细胞质中。1、核酸的生产一般 采用提取法，即从粉碎、破裂的生物 组织细胞中通过一定的方法获取总 DNA或总RNA。 2、获取大分子核酸的另一方法是人工 合成，即利用化学的方法按照设定的 核苷酸顺序逐一加入形成核酸。现已 有核酸合成仪，但合成长度还有一定 限制，并且该仪器价格昂贵。因此这 种方法一般用于研究，不适合生产。
2、RNA含量测定
（1）定磷法——二苯胺法，595nm （2）定糖法——地衣二酚（苔黑酚）法
3、核苷酸、核苷含量的测定 紫外分光光度法
核酸药物的应用
核酸类产品的重要用途是用作药物、保健品和食品添中剂。 用作食品添加剂的主要是鲜味肌苷酸(IMP)、乌苷酸(GMP)等。 作为保健品，它对促进婴儿生长发化妆 品也逐渐成为人们生活的必需品。 作为药物在临床已应用于中枢神经、泌尿、代谢和心血管等许 多方面。
3、直接发酵法
采用营养缺陷型菌株或营养缺陷型兼结构类似物抗性 菌株来发酵大量生产目的核苷或核苷酸。
核酸类药物的生产实例
DNA的生产技术
1、来源
选用细胞核含量比例大的生物组织作为提取制备DNA的材 料，如胰脏、脾、胸腺等。
2、提取原理
细胞内的核酸通常是与蛋白质形成复合物——核糖核蛋白 （RNP）和脱氧核糖核蛋白（DNP），这两种复合物在不 同电解质溶液中的溶解度有较大差异。
谢 谢 观 赏！
Make Presentation much more fun