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显微镜计数法
3.计数池
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显微镜计数法
3.计数池 各池 刻划有9ｍｍ2面积 的刻度，分为 9个 大方格，每格长、 宽各1ｍｍ，面积1 ｍｍ2，体积为 0.1 ｍｍ３，容量 0.1μl 。
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计数白细胞的四个大方格
四个角的大 方格都用单线划 分为16个中方格 ，为计数密度小 的（白）细胞用 。
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稀释液中各组分的作用
蒸馏水— 低渗溶解红细胞， 乙 酸— 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固
定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨 认。 染 料— 使核略着色，且易与红细胞稀释液 区别。
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显微镜计数法
【操作】 １．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。 ２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。 ３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试
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显微镜计数法
【器材】 1.显微镜（目镜10×；物镜10×） 2.微量吸管（Hb吸管） 传统的Hb吸管玻璃
上有10µl和20µl（误差＜±1%）两个刻度 。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负 压
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Hb吸管的消毒清洗
每次使用后，应 经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸 泡2ｈ消毒。然后依 次用蒸馏水冲洗， →0.95Ｌ/Ｌ乙醇除 脂脱水，→乙醚干燥 后，才能再次使用。 注意清洗的顺序不可 颠倒。
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镜下白细胞形态
似成熟蚕卵 ，中央核深染， 胞质色淡。
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显微镜计数法
5.计数方法 用低倍镜依次计数四
角的四个大格内的白细胞 数。对于压线的白细胞， 应采取数上不数下；数左 不数右（左、上计入，右 、下弃去）的原则，保证 计数域的一致性，使计数 准确。
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外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组 成、注意事项
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形
态 4.学会白细胞分类计数方法
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外周血常见白细胞的种类与功能
(一)外周血常见白细胞的种类 1.白细胞的形态：
白细胞检验测定方法及 分类计数
2020年4月29日星期三
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
本章目录
第一节 白细胞生理概要 第二节 白细胞计数 第三节 白细胞分类计数 第四节 中性粒细胞常见的形态变化 第五节 白细胞计数和白细胞分类计数的临床意义 第六节 嗜酸性粒细胞计数 第七节 红斑狼疮细胞检验
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第一节 白细胞生理概要
容量： 0.1μl/大方格
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计数红细胞的五个中方格
中央的一个大方格 ，用双线划分为25 个中方格，每个中 方格又被单线划分 为16个小方格，共 有400个小方格， 供计数密度大的（ 红）细胞用。
容量： 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格
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４.盖玻片
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稀释倍数的确认
稀释倍数＝（溶质＋溶剂）/溶质 注意：体积单位需一致后方能运算。
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白细胞的寿命
粒细胞： 10～15天 淋巴细胞：数天～20余年 单核细胞：数月
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白细胞的归宿
衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也 有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排 出。
B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特 异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏 后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。 粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞 后发育为成熟单核细胞，释放入血液。
无色有核，球形，直径7μm～25μm。 2.白细胞的种类（形态分类）：
三类五种--------
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中性粒细胞（N） 粒细胞 嗜酸粒细胞（E）
嗜碱粒细胞（B）
白细胞 淋巴细胞 （L）
单核细胞 （M）
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白细胞的发育
起源于骨髓多能造血干细胞。
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白细胞的功能
中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞 内酶有复杂的杀菌系统。
嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物 ，灭活组织胺减轻过敏反应。
嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组 胺导致速发性变态反应。
淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。 单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。
让我们共同计数下列大格的细胞
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让我们再试一次：
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显微镜计数法
【计算 】
四个大格白细胞数
白细胞数／Ｌ＝ ———————— × 10× 20× 106
4
式中：÷４ 得每个大格（即 0.1µl）内白细胞平均数 ×10 因一大格容积为0.1µl，换算为1µl ×20 血液稀释倍数。 ×106 将1µl换算为 1Ｌ。
特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面 平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬 浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两 面的平整度是：0.002ｍｍ以内，
大小: 24mm×20mm×0.6mm。
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显微镜计数法
【试剂】 白细胞稀释液
冰乙酸 2.0ｍｌ 10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴 蒸馏水加至100ｍｌ
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学习目标
1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂 组成、注意事项。
2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞 形态。 4.学会白细胞分类计数方法。
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显微镜计数法
【原理】 用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍 数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在 显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换 算即可求得每升血液中白细胞的总数。
管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次 ，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。
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操作
４.充液 将计数 板和盖玻片擦净，盖片 盖在计数池上，用毛细 滴管或玻璃棒取已混匀 的细胞悬液1滴，充入 计数池与盖玻片间的缝 隙中，静置2min～ 3min，待白细胞下沉 。