2517颗微球信号值4800
6400
信号值（MFI）
每个符号最多表示 33 个观测值。
8000
9600
11200
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 6.独特的抽样技术
CV%
25.0% 20.0% 15.0% 10.0%
5.0% 0.0%
0
抽样量与变异系数趋势图(理论抽样)
50
类风湿因子本质是一种免疫球蛋白，可以特异性的识别自身IgG的Fc部分， 属于一种自身抗体。主要存在形式为IgM RF（约占80%）及IgG RF。 RF产生原因有（1）人体IgG在物理因素下其抗原性发生变化持续刺激免疫 系统；（2）免疫功能紊乱；（3）遗传因素。
二、结果不一致原因分析
（2）.类风湿因子（Rheumatoid Factor,RF）干扰
三、常见问题答疑
Q5 有关于肿瘤标志物试剂盒组成问题
B液（PE标记抗体）
A液（反应缓冲液）
C液（微球混悬液）
D液 H液
96孔板 光盘
校准品
三、常见问题答疑 Q6 有关肿瘤标志物f-PSA临床意义的问题
解答：
患良性疾病 概率增加 患前列腺癌 概率增加
三、常见问题答疑 Q7 肿瘤标志物阳性意味着什么？
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-准确度、正确度、精密度
1.准确度 2.正确度 3.精密度
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-不精密度补充说明
95%置信区间
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-灵敏度和特异度（阳性符合率、阴性符合率） 试验方法和金标准比较2*2列联
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-相关性
三、常见问题答疑 Q3 有关肿瘤标志物试剂盒装量的问题
解答：公司试剂盒装量一般按照110人份的量进行装量，多出来的 试剂一个是为了防止枪头、粘壁等的损失，一个是弥补需要做标准 品的缺点。
三、常见问题答疑
Q4 有关肿瘤标志物定标频率的问题
解答：因为手工操作误差、反应温度、移液器系统误差及其它系统 误差，每次试验间会有区别，造成整体信号值的变化，因此不做标 准曲线会导致结果存在系统偏差。公司要求必须每次试验做标准曲 线。
动态监测
三、常见问题答疑 Q8 无症状的肿瘤标志物升高的患者如何处理？
肿瘤标志物动态监测
动态监测TM水平变化，比参考范围更有意义
TM水平
0
1
3
cutoff
6
月份
三、常见问题答疑
Q8 无症状的肿瘤标志物升高的患者如何处理？
单项标志物轻度升高者，定期复查监测指标的数值变化情况，有条件的尽量复 查全部的常用标志物，一旦体内有恶性肿瘤存在，可能会有几种标志物异常。 如果复查后数值一直维持在参考值上限的临界水平，则意义不大。
A液 消 除 干 扰 样 本 效 果 图 （ 干 扰 类 型 ： 类 风 湿 因 子 ）
指标名称
CEA CYFRA21-1
F-PSA AFP NSE
CA125 T-PSA CA242 free-β-hCG
0
加A液处理 不加A液
5000
10000
15000
Luminex信号值
20000
25000
二、结果不一致原因分析
解答：
TM阳性 ≠ 恶性肿瘤
三、常见问题答疑
Q7 肿瘤标志物阳性意味着什么？
1.采血检测PSA项目前，进行直肠指检、前列腺穿刺等临床操作，PSA水平 可升高；丝裂霉素、顺铂等抗肿瘤药物使PSA水平增高；
2. 采血检测CA125项目，受检对象处于月经期，CA125水平会增高； 3. 妊娠会引起AFP、freeβhCG、CA125水平的增高； 4. 吸烟人群CEA水平会有轻度升高； 5. 在肿瘤手术治疗、化疗和放疗过程中，由于肿瘤组织受到破坏或肿瘤
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-相关性
二、结果不一致原因分析 1.基本概念-相关性
二、结果不一致原因分析 2.不同免疫检测方法检测肿瘤标志物结果差异原因分析
（1）计量学溯源问题
上梁不正下梁歪
二、结果不一致原因分析
物质
校准 赋值
程序
a)CGPM的SI单位定义
c) 一级校准品
计
量
学
e) 二级校准品
。
人体表皮皮屑、唾液、汗液导致SCCA指标假性升高。 人体表皮细胞中含大量SCCA抗原，皮屑汗液等如果在实验过程中
掉入到反应体系中将对SCCA产生假阳性。
细菌污染导致假阳性 另外细菌污染导致血清产生大量悬浮物与沉淀，在反应中导致非特
异性吸附的发生，易导致假阳性。
携带污染和交叉污染 此类污染易出现在ELISA方法学及采用相同样品针的仪器上。
100
150
200
250
300
抽样量
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 7.获得信号值
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 8.剂量反应曲线
样本2
样本1
Y5=b5x5+a5 Y4=b4x4+a4
Y3=b3x3+a3 Y2=b2x2+a2 Y1=b1x1+a1
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 核心反应原理
80
90
比较方法 罗氏 Elecsys CEA测值（ng/ml）
三、常见问题答疑 Q1 有关肿瘤标志物Hook效应问题
无HOOK效应
弱HOOK效应
强HOOK效应
HOOK效应即钩状效应, 由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象
解答：AFP在临床上有非常高的样本出现，因此我们有设置HOOK微球指 示，其它项目因为我们试剂本身检测范围较广，出现HOOK的概率非常低 ，所以没有设置HOOK指示微球。
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理 4.肿瘤标志物物试剂盒组成
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理
4.肿瘤标志物检测试剂盒组成
① 反应缓冲液（A液）：1瓶，2.5ml/瓶。 ② PE标记混合抗体溶液（B液）：1瓶，2.5ml/瓶。 ③ 校准品：6瓶，0.2ml/瓶，分别为：CAL1-CAL6。 ④ 微球混悬液（C液）：1瓶，2.5ml/瓶。 ⑤ 终止液（D液）：1瓶，15ml/瓶。 ⑥ AFP HOOK 指示微球溶液（H液）：1瓶，250ul/瓶。（仅限含AFP指标） ⑦ 说明书：1份。 ⑧ 封板纸：2张。 ⑨ 96孔反应板：1块。 ⑩ 光盘（读数模板+计算模板）
（3）HAAAs（HAMA）干扰 (human anti-animal antibodies,HAAAs)
二、结果不一致原因分析
（4）.异嗜性抗体干扰模式图
二、结果不一致原因分析
（5）.补体干扰
免疫检测系统中捕获抗体在向固相包被中和标记抗体的标记过程中,抗体分子 发生变构,其Fc 段的补体C1q 分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连 接起来,从而造成假阳性。一些公司为了增加检测的敏感性,使用链霉亲和素包 被固相,将捕获抗体用亲和素标记,此过程也可引起捕获抗体的构象发生改变,造 成假阳性或假阴性升高。
坏死时某种肿瘤志物产生增加，从而影响肿瘤标志物的测定，造成假 阳性 6. 标本放置时间过久或溶血会导致NSE水平增高 7. 唾液、汗液会引起SCCA、CEA、CA19-9水平增高； 8. HAMA效应会造成多种肿瘤标志物假阳性； 9.良性疾病会引肿瘤标志物升高，肝脏良性疾病如肝炎、肝硬化会造成
三、常见问题答疑 Q8 无症状的肿瘤标志物升高的患者如何处理？
二、结果不一致原因分析 （10）室间质评样本差异
二、结果不一致原因分析
（10）室间质评样本差异
CEA方法学比对数据 n=45 120
100
y = 1.0317x - 0.1995
评价方法 Tellgen CEA
80
60
40
20
0 0
-20
病人血清样本 上海市临检中心样本
10
20
30
40
50
60
70
表 目前已知肿瘤标志物有国际标准（国际约定校准）的指标
二、结果不一致原因分析
表 无国际标准标志物溯源情况
二、结果不一致原因分析
二、结果不一致原因分析
图 不同方法学胃蛋白酶I检测的系统误差，因为缺乏国际 标准，导致系统间存在显著的差异：
二、结果不一致原因分析
（2）.类风湿因子（Rheumatoid Factor,RF）干扰
以下几类情况要特别重视： 单次检查升高特别明显，数倍于正常值的上限 反复检查，数值动态持续升高 有家族性遗传史肿瘤筛查时肿瘤标志物增高
三、常见问题答疑
Q8 无症状的肿瘤标志物升高的患者如何处理？
无症状患者伴CA19-9水平升高的临床处理原则
三、常见问题答疑 Q9 肿瘤标志物阴性意味着什么？
二、结果不一致原因分析
（6）.抗体标准化问题-CA125
二、结果不一致原因分析 （6）.抗体标准化问题-CEA
罗氏CEA说明书
二、结果不一致原因分析 （6）.抗体标准化问题-CA19-9
Sonia L. La’ulu, and William L. Roberts Performance Characteristics of Five Automated CA 19-9 Assays[J], Am J Clin Pathol 2007;127:436-440.
图像诊断
• •
CT 核磁共振
• 免疫学指标 化学诊断 • 血清学
• 癌反应
细胞及组 织
一.肿瘤标志物概述及试剂检测原理
•1.肿瘤标志物定义： 肿瘤标志物（tumor marker，TM）是指恶性
肿瘤发生和发展过程中，由肿瘤细胞合成分泌或是 由机体对肿瘤细胞反应而产生和（或）升高的，可 预示肿瘤存在的一类物质。存在于血液、体液、细 胞或组织中。