分析方法验证
一．方法验证概述
1方法验证概念解析
2各方指导原则
3方法验证的常见困难
4风险管理在分析方法中的应用
5限度与定量验证的区别与适用情况
6方法验证的前期准备
7方法验证的方案和报告
首先申明是方法验证：ICHQ2，分析方法的验证是为了证明该方法与预期的目的相一致。
中国药典，药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。
USP1225，通过实验室研究确认方法的性能参数可以满足预期的检测要求。
什么是检测要求：结实（耐用性好）、准确、稳定
是否需要验证？
需要经过验证的：含量测定、有关物质、残留溶剂、基因毒杂质、其他特定杂质、鉴别（仪器）、溶出度、释放度、粒径（激光衍射法）、其他采用液相色谱及光谱法等检测项目。
不需要经过验证的：炽灼残渣、干燥失重、鉴别（化学法）、性状、水分、酸碱度、PH、其他理化检测。
注意事项：方法是否需要验证，应当基于风险评估的判断，惯例只是对于风险的一致认知，并不适用于所有情况。
注册用方法验证的一般要求
代表性的样品：验证用到的样品应当能够代表上市批的质量，工艺一致，批量相当。
规范的过程：验证过程应当符合GMP或GMP 类似要求方法确认与转移相关指导原则
12015年版中国药典四部9101
2.化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则
P1225
4.ICHQ2
5.FDA的Analytical procedures and method validation
方法验证的常见困难：
1 已经验证的方法转移失败。
2 已经验证的方法在日常检测过程中不适用。
3方法验证过程中发现方法不适用
4 某些验证项目需要多次验证才能获得满意的结果。
分析方法风险应对前置于方法开发阶段
1在方法设计阶段应当预测全生命周期内可能存在的风险，如方法转移、可能的OOT/OOS、系统适用性试验失败原因、监管法规的变化、技术进步等。
2 收集相关方的需求，包括QC实验室、合成部门、制
剂部门等。
风险管理在方法验证中的应用
1什么是风险？不确定性对目标的影响
2什么是风险管理？在风险方面，指导和控制组织的协调活动
3 方法验证中应当结合分析方法的生命周期进行系统
的风险评估，识别可能存在的风险，进行与等级相应的应对。
4实验室可以制定相应的风险清单。
二．方法验证指标
限度、定量验证的区别与适用情况
限度，能判定是否超过规定限度，不能提供具体量。
如重金属、残留溶剂、基因毒杂质、工艺杂质等无需提供具体量的检查项。
定量，能提供具体量。
有关物质与需提供具体量的残留溶剂、基因毒杂质等。
原料药与制剂的不同：
空白干扰情况，稀释剂峰应该不影响待测组分的检测。
对于制剂项目，按照同供试品制备相同的辅料量来制备空白辅料溶液，进样分析，空白峰应不干扰待测组分的检测。
一.分析方法转移概念：分析方法转移是一个文件记录和实验室记录的过程，目的是证明一个实验室（方法接收方实验室）在采用另外一个实验室（方法开发方实验室）建立并经过验证的非法定分析方法检测样品时，该实验室有能力成功操作该方法，检测结果与方法与建立实验室检测结果一致。
关键词：
文件记录：应当有经过流程化签批的方案、记录、报告。
经过验证：转移之前需经过方法验证。
非法定分析方法：药典等法定方法不适用方法转移。
有能力：需要评价方法接收实验室执行该方法的能力，包括资源，经验与对该方法的理解。
检测结果一致：可以通过检测结果对比的方式证明。
二．方法确认概念：分析方法确认是指首次使用法定分析方法时，由现有的分析人员或实验室对分析方法中关键的验证指标进行有选择性的考察，以证明方法对分析样品的适用性，同时证明分析人员
有能力使用该法定分析方法。
关键词：
首次使用：在进行方法确认前，不得使用该方法进行检测。
法定分析方法：适用于药典方法、部颁标准、国标等，不适用于企业自议方法（即使批准后）
关键的验证指标：非全验证
三．对分析样品的适用性：由于处方、工艺、合成路线等方面的差异，可能导致杂质谱、晶型、溶解度等性质的不同，法定方法并不一定适用于某些分析样品。
有能力：只要是资质、经验。
方法确认与转移相关指导原则
1.2020年版中国药典四部9099
2.2020年版中国药典四部9100
P1224
P1226
5.FDA的Analytical procedures and method validation
对比试验：最常用的方式。
转移方与接收方对同一批次样品进行分析。
共同验证：一般为方法的重现性验证。
在验证：一般为部分验证
转移豁免：样品类似，接收方有使用经验，一般为同品种不同规格、制剂与原料药等。
法定方法：适用于方法确认
方法相同或相似
转移方相关人员调到接收方。
管理文件：接收方应当有方法转移相关的管理文件，对方法转移相关活动作出规定，包括文件编号规则、方法转移流程、各方责任、培训与签批等。
签批：方法转移方案与报告应当经过适当的签批。
文件控制：方法转移方案、报告以及相关原始记录应当受控，符合GMP或GMP-LIKE相关要求。
四．方法转移的前期准备
转移前的沟通：需要沟通的内容包括转移类型、操作细节、是否需要培训、双方工作分配等。
培训：如必要，由方法建立实验室的相关人员（方法开发、验证人员）对方法接收方实验室相关分析人员进行培训，加深对分析方法的流程、注意事项的理解。
文件交接：主要是分析方法文件从方法建立实验室转移至方法接收方实验室。
物质准备：在方法转移实验开始之前方法接收方实验室应当准备好分析方法相关设备、色谱柱、对照品、样品等。
五．分析方法转移双方的责任与义务
方法建立实验室：1交接分析方法文件。
2技术支持。
3提供样品、对照品。
4培训。
方法接收实验室：1确认转移类型。
2起草、签批转移方案、记录、报告。
3准备检测设备、色谱柱、试剂等。
4进行实验。
六.方法转移类型-对比试验
1方法建立实验室提供样品与检测结果给方法接收方实验室。
2方法接收方实验室确认系统适应性符合要求
3方法接收方实验室对样品进行分析，检测结果与方法建立方实验室的结果进行比较，应符合预定的可接受标准（参考值：原料药含量测定差值不大于2%，制剂含量测定不大于3%，有关物质杂质个数一致且差值不大于限度的20%或30%，残留溶剂差值不大于限度20%或30%，基因杂质差值不大于限度30%）七．方法转移类型-部分验证
专属性：主要确认杂质分离度是否符合要求
系统适应性实验：确认接收方实验室系统符合方法要求，如系统适应性已包含杂质分离度与灵敏度的要求，无需验证定量限与专属性
定量限：确认接收方实验室仪器灵敏度符合要求
精密度：确认接收方实验室能够输出一致的检测结果，包括重复性与中间精密度。
八．方法转移类型-共同验证
1方法建立实验室提供精密度验证数据给方法接收方实验室。
2方法接收方实验室确认系统适应性符合要求
3 方法接收方实验室进行6份预定样品的分析，检测结果与方
法建立实验室提供精密度验证数据进行比较，应符合预定的可接受标准（同方法验证）
九.方法转移失败的常见情况
1.部分验证或系统适用性试验的杂质分离度不合符要求；原
因可能是：仪器品牌型号不一致、色谱柱性能不一致，如方法开发使用旧色谱柱，方法接收实验室使用的为新采购色谱柱，方法耐用性不好，如流动相PH只允许±0.05。
2.检测结果不符合要求；原因可能是：未预期的情况，如双
方实验室超声仪器功率不一致导致的降解速度、水平差异，未评估的日光直射溶液稳定性等。
样品性质不均一，如片重差异大导致含量测定结果差异大。
分析方法误差较大，如不适宜的样品处理过程，过小的样本量。
可接受标准设置过于严格。
十方法转移报告的一般格式
1.目的：说明方法转移的目的
2.范围：说明该转移适用适用的范围
3.转移类型：比较试验、部分验证、共同验证等
4.职责：说明相关人员各自的职责范围
5.分析方法：阐明需要转移的方法
6.转移前准备：对照品、样品信息、试剂、仪器的要求
7.转移内容：每个实验项下均需要说明溶液制备、操作过程与可接受标准、结果与结论
8.相关资料、参考文献、变更记录。
十一．方法确认一般原则
1 方法确认需要确认法定分析方法在以后的长期使用中持续适用，因此需在方法确认阶段对方法进行充分的风险评估。
2分析人员应当具有相应的资质，包括专业教育水平、经验、仪器使用资质、受过相关培训等。
3 确认法定分析方法与样品相适应，如规定的稀释剂应能够溶解待测组分，杂质谱应与法定分析方法一致等。
4实验室应当具有符合要求的仪器设备。
5通用检测方法无需确认
6需要进行必要的预实验，如筛选色谱柱、调试仪器参数等
风险分析：
1滤膜的品牌、材质可能对干扰和吸附有不同的影响
2辅料对待测组分可能有吸附
3溶液稳定的时间未知
4未规定色谱柱品牌、型号、规格、系统适应性存在风险
5研磨过程可能存在吸附的风险，研磨也可能导致分层
6振摇时间对提取结果可能有影响
验证指标
系统使用性试验、专属性、检测结果与理论值对比、精密度、研钵不同位置取样结果对比、准确度、溶液稳定性、滤膜干扰试验、振摇时间。