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OVA诱导小鼠过敏性哮喘模型的建立ppt课件
• 研究进展
1.1 实验动物的选择
(1)、早期,人们往往选择比较容易致敏的豚鼠作为哮喘模型的实验动物, 随着实验的不断进行,人们发现豚鼠的个体差异较大,对于致敏原可能不 反应或者反应显著,甚至出现死亡的情况。
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• 研究进展
1.2 致敏原的选择
选择用尘于螨制的作话过价敏格性昂支贵气;管哮喘动物模型的致敏原主要有卵 白若蛋是白病、毒真和菌真孢菌子则、制尘成螨哮、喘蟑模螂型变虽应为原临等床。中在通制过作控哮制喘病模原型体感 的染过而程控中制,哮选喘择发不生同提的供致依敏据原,基但本其都稳能定制性作较出差各,种其不致同敏的的哮机制 喘还模需型要,进但一是步几的乎研每究个;致敏原都有自己自身的缺点。 蟑螂变应原、花粉以及职业性致敏原等由于种类繁多、模型制 作很难标准化而使模型的复制变得非常复杂,因此在制作哮喘 模型的过程中很少选择; 虽然选择使用OVA作为致敏原,很难制作出重症哮喘模型,然 而,OVA具有易于获得、免疫原性强、相关试剂可选择性大等 特点,作为经典抗原,常与特定的佐剂联合使用。
重要性
重要意义
1.能够更加深入的了解过敏性哮喘这种疾病的分 子机制、识别关键路径以及今后药物治疗的目标 2.证实哮喘的相关机理以及哮喘的相关症状 3.动物哮喘模型还可用作药物的开发实验
病因 病机
病因病机
哮喘的发病机制目前还并未完全明确。西医对此有 如下观点: 遗传因素的观点认为哮喘是可以通过基因遗传给家 族中的其他成员; 神经调节机制的观点认为气道植物神经出现功能上 的问题是获得哮喘的生理上的基础; 免疫机制的观点认为通过相关研究可以表明免疫细 胞以及相关的免疫因子等参与到哮喘的各个环节中; 炎性细胞和炎症介质的观点认为活化的中性粒细胞、 血小板、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞 等均参与了气道炎症的形成,哮喘患者气道上皮细 胞和血管内皮细胞在其发生中也起一定作用
• 研究进展
1.5 小鼠过敏性哮喘模型的评价指标
哮喘是一种慢性气道炎症性疾病,常常伴随着气道高反 应和炎症细胞浸润,因此,一个小鼠过敏性哮喘模型的评价 应从实验小鼠的行为学、气道反应性及病理学三个方面来判 断。
•主要包括以下四个方面:
a.外观:较实验前相比,出现毛发竖起,出现 脸鼻部骚痒、烦躁、打喷嚏、腹式呼吸明显、 口唇发紫、尾部紫绀等症状。
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OVA诱导小鼠过敏性哮喘模型的建立
• Content (目录)
研究 进展
重要 性
病因 病机
治疗 方法
社会工业化进程的加快,人们生活水平的 提高,过敏性哮喘患者的数量呈上升趋势,研究者们也将如 何治疗过敏性哮喘作为了一个重要的研究方向。为了研究过 敏性哮喘的病因、发病机制和探索相应的治疗方法,因此对 过敏性哮喘动物模型的建立尤为重要。本次实验的目的是建 立BABL/c小鼠过敏性哮喘模型。
• 研究进展
1.3 佐剂
佐剂可通过特异性或非特异性免疫增强作用使 机体产生更多的抗体量,不仅可以减轻免疫耐受, 还能节约使用的抗原量。在哮喘模型的制作中常选 择铝佐剂,其中以氢氧化铝最常见。
• 研究进展
1.4 哮喘模型制备方法
制备过敏性哮喘模型的过程大概分为致敏和激发两个阶 段,致敏和激发的药物一般选择OVA,致敏方式一般选择腹 腔注射或腹腔注射与皮下注射相结合。激发方式一般选择雾 化吸入或者滴鼻激发
病因病机
中医对此则有如下观点:宿痰内伏于肺,再加上外 部感染、饮食的问题、精神疲惫意志消沉等原因导 致痰阻了气道,从而导致了哮喘的发生。
治疗 方法
a.抗生素治疗 大环内酯抗生素可以发挥重要的治疗作用,一种新型大环内 酯类药物阿奇霉素对由哮喘引起的肺部炎症情况有较强的治 疗效果,同时副作用较小,临床上已经充分证明了其使用的 安全性和有效性。 b.糖皮质激素治疗 目前临床上广泛使用的糖皮质激素是治疗支气管哮喘最有效 的药物,特点是能够快速减缓哮喘发作时的哮憋等症状。 c.支气管扩张剂治疗 d. 免疫治疗 此方法的治疗机理是通过针对某些特定的过敏原进行防治, 其治疗效果日益显著,目前免疫治疗已经成为有效治疗哮喘 的常规方法之一。但是,由于免疫治疗方法的的应用时间还 不长,该方法还需进行更深远的研究。 e.联合治疗 经过实践证明,某一单一的治疗方法很难对治疗哮喘取得好 的效果,人们往往选择多种治疗方式的联合治疗手段,以取 得较好的治疗效果。
(3)、如今人们对小鼠的免疫遗传背景已经比较了解,小鼠肺功能的测 定已经较为完善,大量可供使用的免疫学和分子学试剂,使得小鼠成为 制备过敏性哮喘模型的最佳实验动物。小鼠逐渐成为了制作哮喘模型的 实验动物的最佳选择。 (4)、相关研究表明,卵白蛋白(OVA)容易引起BABL/c小鼠产生 气道高反应性和血清中IgE超敏反应的过敏反应 [1]。并且雌性BABL/c 小鼠的炎症反应更加显著,
b.肺组织切片:可进行HE染色、MBP染色、刚 果红染色及EOS浸润等观察小鼠肺部的炎症情况。
c.细胞组分的测定:主要是测量其中的白细胞 和嗜酸性粒细胞的数量。
d.生理功能指标:主要是测量小鼠的气道反应 性,常用的方法是离体气道平滑肌收缩力测定 法、肺阻抗(气道峰压测定法)和整体体积描 记法。目前整体体积描记法是被认可的测定小