电泳法分离蛋白质
电泳法分离蛋白质
• 蛋白质是两性电解质,在一
定pH条件下,蛋白质带有电 荷,不同的蛋白质所带电荷 的种类和数目不同,因此其 在电场中移动的速度不同,理效应:
电荷效应 浓缩效应 分子筛效应
聚丙烯酰胺凝 胶电泳(PAGE)
•等电聚焦
等电聚焦电泳 (IEF)
• 基本原理
• 基本原理
据等电点定义,人们将两性电解质添加在聚丙烯 酰胺凝胶中,在电场作用下,不同pH的两性电 解质在凝胶呈梯度分布,带有电荷的蛋白质样 品在此凝胶中移动,当其移动到与其等电点相 同的pH梯度处后静电荷为零,在 凝胶中不再移 动,也就是相同等电点的蛋白质聚焦在相同的 pH梯度处,因此称为等电聚焦。