四、试验步骤
1、取滤纸剪成20×10厘米的滤纸条一张，在一端打孔， 系一根细线，在另一端 2~3cm 处用铅笔画一横线，在 线上画两个点（原点）。 2 、取毛细管一支 ( 回收 ) ，吸取氨基酸混合液和甘氨酸 标准液，在上面两个点处点样，样点直径不宜超过 5mm,每点一次用吹风机吹干，点2~3次为佳。 3、点样后将滤纸放入层析缸中展层，注意点样线要高 于层析液面，滤纸不要贴在层析缸璧上，当展层至另 一端1~2cm处时，停止展层（大约2~3小时）。 4、取出滤纸，用铅笔记下溶剂前沿，然后用热风吹干 （或烘箱60℃）烘干。 5、均匀喷上茚三酮 —无水丙酮液，注意使溶液不倒流， 不间断。 6、用吹风机吹干，观察层析点，确定其几何中心。 7、量取数值，计算各自的Rf值，与表中标准氨基酸Rf 值比较，确定样品氨基酸种类。（书上图谱横着看）
• 影响纸层析氨基酸移动速率的因素有那些 ， 它们是如何影响的？
实验六 氨基酸的纸层析法
一、原理
以滤纸为支持物的层析法，称为纸层析法。纸层析所用展层 剂大多由水和有机溶剂组成。展层时，水为静止相，他与滤纸纤 维亲和力强；有机溶剂为流动相，它与滤纸纤维亲和力弱。有机 溶剂在滤纸上又下向上移动的，称为上行法；有上向下移动的， 称为下行法。 将样品在滤纸上确定的原点处展层，由于样品中各种氨基酸 在两相中不断进行分配，且他们的分离系数各不相同，所以不同 的氨基酸随流动相移动的速率也不相同，于是各种氨基酸在滤纸 上就相互分离出来，形成距原点不等的层析点。 在一定条件下（室温、展层剂的组成、滤纸的质量、PH值 等不变），不同的氨基酸有固定的移动速率（Rf值） Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 用混合氨基酸做样品时，如果只用一种溶剂展层，由于某些 氨基酸的移动速率相同或相近，就不能将它们分开，为此，当用 一种溶剂展层后，可将滤纸旋转90度，以第一次所的层析点为原 点，在用另一溶剂展层，从而达到分离的目的。这种方法称为双 向层析法。 本试验主要介绍的是单向层析法。其中混合氨基酸有甘氨酸、 苯丙氨酸组成。
二、实验仪器
1、 新华滤纸 2、 层析缸 3、 细线 4、 点样管 5、 橡皮筋 6、 电吹风 7、 喷雾器
三丙氨酸） 2 、展层剂：正丁醇： 12% 氨水： 95% 乙醇：蒸馏水 =13：3：3：1（v:v） 3、0.5%茚三酮—无水丙酮溶液：0.5g茚三酮溶于 100ml无水丙酮，贮于棕色瓶中