微生物药敏
目录 • 一、标本的采集 • 二、培养与鉴定 • 三、药敏结果
一、标本的采集
血液标本
1、血培养适应症：发热（＞38℃）、体温（＜36℃）、
白细胞增多、粒细胞减少、低血压、局部感染、突发精神 萎靡的儿童或老年人 2、最佳采血时机：（1）使用抗菌药物之前 （2）在寒战和发热起初时 每次要求从不同部位采集2~3套标本，每套包括一个需氧瓶 和一个需氧瓶，成人（5~10ml）婴儿（1~2ml）。每份血 培养间隔时间不超过30min
• 咽拭标本
用无菌棉拭子轻轻擦拭患者鼻咽部黏膜，留取标本，置 无菌试管内送检（立即）。
二、培养与鉴定
• 1、接种 分区划线分离法：先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小 区（第一区内），约占平板1/5面积，再在二三…区依次 连续划线，以获得单个菌落。 • 2、培养 在35℃,5%CO2下孵育18~24h。
口，以减少常居菌的污染，应从气管深部咳出痰，吐入无 菌容器内。 （2）支气管喉镜或支气管毛刷，由医生采 集，建议直接输送培养基。
连送3日
• 便标本
自然排便后，挑取其脓血，黏液部分2~3g，液体粪便取 絮状物2~3ml,盛于灭菌容器内送检。
• 伤口分泌物标本
先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支无菌棉拭取溃疡深处 接近组织的分泌物后插入运送培养基内送检。一支为涂片 检查用，一支作培养用（立即）。
全敏感，为金葡
有一耐药，为MRSA
青霉素、氨苄全耐药报屎肠
• 屎肠、粪肠
青霉素、氨苄全敏感报粪肠 西丁耐药，左氧、环丙敏感报大肠
•
大肠、阴沟
西丁敏感，左氧、环丙耐药报阴沟
The End
深部真菌显色
绿色（白色念珠菌）
真 菌 显 色
蓝色（热带念珠菌） 粉色（克柔念珠菌） 紫色（光滑念珠菌） 淡紫色（近平滑念珠菌）
三、药敏与结果
贴药敏纸片
培养18~24h
根据抑菌圈 直径回报结果
辅助药敏实验:OP敏感实验（肺炎链球菌） D实验
药敏小结
• 药敏结果辅助判别的细菌： • 葡萄球菌（西丁、苯唑）
典型微生物培养特性
• • • • • • • • • 4、肺炎克雷伯菌 血平板：圆形，较大，凸起，灰白色 伊红美蓝：较大粉红色菌落，可拉丝 5、铜绿假单胞菌 血平板：形成大而扁平，湿润，有金属光泽，蓝绿色菌落 伊红美蓝：粉红，伞状较干菌落 6、鲍曼不动杆菌 血平板：圆形，灰白色，光滑边缘整齐的菌落 伊红美蓝：粉红，凸起
• 骨髓标本
一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本，最好在用药前、 寒颤前或寒战后1h发热初期或高热期采样，阳性检出率较 高。
• 脑脊液标本
临床医师以无菌操作腰椎穿刺，抽取脑脊液2~3ml，盛于 无菌容器中送检（立即），不宜将其置于冰箱保存，否则 影响检出率（15min内)。
一、标本的采集
• 痰标本
1、送检指征：咳痰、咳血、呼吸困难、发热 2、标本采集：（1）晨痰养瓶
各类标本接种培养基
血平板 痰、咽拭子 尿 便 分泌物 脑脊液 伊红美蓝 巧克力 SS琼脂 沙保罗
菌种的鉴定
G-球 阳性 凝固酶
G+球
革兰染色 G+杆 肉眼观察 抗酸染色 G/GM实验 克玛佳 G-杆
触酶 阴性
氧化酶
典型微生物培养特性
• 1、金黄色葡萄球菌 血平板上典型菌落为金黄色，周围有明显的β溶血环。 • 2、肺炎链球菌 血平板上圆形、中央呈脐窝状，表面光滑，绿色扁平，周 围有草绿色溶血环。 • 3、大肠杆菌 血平板：呈圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色； 伊红美蓝：菌落呈紫黑色，并有金属光泽
一、标本的采集
• 尿标本 1、尿培养临床指征:（1）尿痛、尿急、尿频、血尿、脓尿 （2）膀胱排空功能受损 （3）泌尿系统疾病手术前 （4）留置导尿管太长，患者出现发热 （5）白细胞高或亚硝酸盐阳性 2、标本采集：用药前采集，晨尿，清洗干净尿道口，留取 中段尿。（做厌氧菌培养时应膀胱穿刺采集尿）
一、标本的采集