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免疫学 I-流式细胞学 外周血白细胞分类
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免疫学 I-流式细胞学
） 正常BM细胞的图形（CD45/SSC
R8:幼稚细胞群,正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺
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免疫学 I-流式细胞学 正常骨髓细胞的流式分布
• 1:淋巴细胞区 • 2：中晚幼粒细胞区 • 3：单核细胞区 • 4：原始幼稚细胞区 • 5：嗜酸细胞区 • 6：有核红细胞、 • 或 细胞碎片区
T-ALL特点： 1. 幼稚T细胞数量增多：CD34+，TdT+↑； 2. 泛T标志丢失； 3. CD4/8双阳或CD4/8单阳。
伴有重现性遗传学异常AML
AML伴有 t(8;21)(q22;q22),(AML1/ETO) AML伴有骨髓异常嗜酸粒细胞,inv(16)(p13;q22)或t(16;16) (p13;q22),(CBFβ/MYH11) APL[AML伴有t(15;17)(q22;q12),(PML/RARα)及变异型] AML伴有11q23(MLL)异常
而FAB分类是简单的形态学分类。
2. WHO分类中诊断AML的血或骨髓原始细 胞下限从FAB的30%，降为20%。
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造血系统M疾IC病M常用的诊断方法
形态学(Morphology) :
细胞学:外周血涂片、骨髓涂片 组织学：骨髓活检、淋巴结活检
免疫学(Immunology ) ：
免疫组织化学 流式细胞学分析
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免疫学 I-流式细胞学
正常/白血病细胞免疫标志特点
干祖（原始细胞）:CD34、CD117、HLA-DR、CD38。 髓系：CD13、CD33、MPO、CD11b、CD16、CD64;
分化抗原：CD14、CD15。
T系：CD3、CD5、CD7,分化抗原：CD4、CD8。
B系：CD10、CD19、CD22、CD79a；分化抗原：CD20。
细胞遗传学(Cytogenetics) ：
染色体核型分析、荧光标记探针的原位杂交(FISH)
分子生物学(Molecular) ：
白血病融合基因(PCR、RT-PCR) ;基因突变；克隆性基因重排；正常基 因 表达水平过高（ DNA测序）
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形态学 M
细细胞胞学-学骨髓-骨涂髓片涂片
• 细胞形态保存完好,各系、 各阶段细分辨较容易
（CD3、CD20等）为阴性；单核系（CD14）为阴性；原始细 胞标记（ CD34、CD117、HLA-DR、 CD11b、CD38）为阴性。
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免疫学 I-流式细胞学 各系发育特征
• 泛B标志:CD19,HLA-DR，cCD79a/CD22;幼稚B标志：CD34，TdT， CD10；成熟B标志：CD23，CD5。
AML: 急性髓系白血病;
APL: 急性早幼粒细胞白血病
MDS: 骨髓增生异常综合征； MPD:骨髓增殖性疾病
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AML: WHO分类的特点 与FAB分类的区别
1. WHO分类综合白血病形态学、免疫表型、 遗传学和患者临床特征作为分类诊断标准, 尽可能使每一亚类 成为具有不同实验、 临床、预后特点的特定病种。
• 可能会出现干抽或稀释， 影响诊断
• 不能观察骨髓组织的结构 及其全貌。
• 不易察觉早期的肿瘤细胞 浸润。
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形态学 M
组组织织学学-骨-髓骨活髓检活检
• 常规做HE染色和网织纤维染色 及HGE染色。
• 可以对细胞密度、组织结构、 造血成分的比例及分化情况和 间质情况等进行评估,不存在标 本稀释问题。
伴有多系病态造血AML
继发于MDS或MDS/MPD 无先期MDS或MDS/MPD
治疗相关性AML和MDS
烷化剂相关型 拓扑异构酶Ⅱ抑制剂相关型(某些可为淋巴细胞型) 其他型
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不另做分类的AML
AML 微分化型 AML 无成熟型 AML 有成熟型 急性粒单核细胞白血病 急性原始单核细胞 / 急性单核细胞白血病 急性红白血病（红系 / 粒单核系和纯红系白血病） 急性巨核细胞白血病 急性嗜碱粒细胞白血病 急性全髓增殖症伴骨髓纤维化 髓系肉瘤
➢大多数情况下, B细胞系淋巴瘤CD19、CD20阳性,分化 早期CD20阴性，CD10、CD34阳性;分化晚期CD5、 CD23阳性
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免疫学 I-流式细胞学
特征性表型
• 成熟B淋巴细胞:CD10（-）,CD20（+）; • 单核细胞：CD14（+）； • T淋巴细胞： CD3（+）； • AML-M3特点：符合髓系：CD13、CD33均(+)；淋系
急性白血病的MICM分型和预后
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白血病的概念
•白血病是造血干/祖细胞发生恶变
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白血病的概念
• 分化障碍 • 增殖失控 原始和幼稚细胞增生累积 • 凋亡受阻 • 浸润其它器官和组织 原始和幼稚细胞（白血病细胞）
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白血病的概念
临床表现: • 正常造血受到抑制：乏力、面色苍白、发
• 泛T：CD2，CD5，CD7,cCD3；幼稚T：CD34，TdT，CD1a， CD4/8；成熟T：CD3，CD4，CD8。
• 全单核细胞标志：CD33，CD13，HLA-DR；幼稚单核细胞标志： CD34，CD117；成熟单核细胞标志：CD14，CD64。
• 全粒细胞标志：CD13，CD33，cMPO；幼稚粒细胞标志：CD34， CD117，HLA-DR；成熟粒细胞标志：CD15，CD11b，CD10， CD64。
• 肿瘤、骨髓纤维化、特别是骨 髓增生性疾病的诊断非常重要。
• 细胞形态没有细胞涂片保存好。
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免疫学 I-流式细胞学
鞘液流动室
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免疫学 I-流式细胞学
光散射检测原理
FALS Sensor
Freq
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Fluorescence detector
Fluorescence
热、出血 • 浸润：肝脾淋巴结肿大、皮肤、中枢神经
系统等浸润
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急性白血病分型
➢ FAB分型: 细胞形态学及细胞化学染色
AML: M0、M1、M2、M3、M4、M5、M6、 M7
ALL: L1、L2、L3
➢ WHO分型: 2008年修订 MICM
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世世界界卫卫生生组组织织(W(WHHOO)A)AMMLL分分类类