小檗碱的含量，筛选黄连中盐酸小檗碱的水提工艺，为其进 为 10μL ，理论塔板数以盐酸小檗碱计算大于 3000，此条件
一步的研究提供参考。
下，样品中盐酸小檗碱的与相邻峰的分离度大于 1． 5，色谱
1 仪器与试药
图见图 1。
中 华 1． 1 仪器
2． 2 对照品溶液的制备
中
Lumtech K － 501 高效液相色谱仪（ 绿绵安特分析系统
连及其制剂中盐酸小檗碱的提取和测定已有报道［4 － 5］，提 饮片厂并经中药资源教研室俞冰副教授鉴定为毛莨科植物
取时一般采用甲醇、氯仿、乙醇等有机溶剂，但存在溶剂用 黄连 Coptis chinensis Franch。
量大，成本高，安全方面等问题。对于盐酸小檗碱含量的测 2 方法与结果
定时，则 一 般 采 用 薄 层 扫 描 法［6］、荧 光 分 光 光 度 法 等 方 2． 1 色谱条件与系统适应性试验
R 2． 196 1． 031 0． 650 0． 340
SS 3． 004 0． 625 0． 219 0． 060
2． 840 3． 037 3． 320 3． 487 4． 009 3． 742 3． 642 3． 954 3． 797
2． 5． 3 方差分析 表 3。
将正交实验结果进行方差分析，结果见 表 3 方差分析表
Wall． 的干燥根茎，具有清热燥湿，泻火解毒等功效［1］，其中
盐酸小檗碱对照品（ 由中国药品生物制品检定所提
主要有效成分是以小檗碱为代表的季铵型生物碱［2］，具有 供，批号为 0713 － 9906） ，乙 腈、甲 醇 为 色 谱 纯，水 为 超 纯
抗病毒、抗炎、抗菌、降血糖及免疫调节等作用［3］。有关黄 水，其余试剂均为分析纯。黄连购于浙江中医药大学中药
在，可以离子化呈强碱性，能溶于水。本实验中黄连的小檗
第 29 卷 第 3 期 2011 年3 月
中华中医药学刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 29 No． 3 Mar． 2 0 1 1
粗针治疗血管性痴呆 ADL － R 评价
为： Y = 3705． 100X + 65． 515，r = 0． 9996，结果表明盐酸小
檗碱在 0． 0453 ～ 1． 450μg 浓度范围内与峰面积具有良好线
性关系。
2． 5 提取工艺研究
2． 5． 1 因素水平表 以盐酸小檗碱的含量为考察指标，采
用正交试验对盐酸小檗碱提取的加水倍量，提取次数，提取
小檗碱的提取。
关键词： 黄连； 盐酸小檗碱； 提取工艺
中图分类号： R284． 2
文献标识码： A 文章编号： 1673 － 7717（ 2011） 03 － 0528 － 03
Study on Aqueous Extraction of Berberine From Ｃ ｏｐｔｉｓ Ｃ ｈｉｎｅｎｓｉｓ Franch
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黄连中盐酸小檗碱的水提工艺研究
黄家卫，盛振华
（ 浙江中医药大学药学院，浙江 杭州 310053）
组在治疗 30 天、60 天及 180 天回访时，均有统计学意义： 对照组在治疗 30 天时无统计学意义，治疗 60 天及 180
天回访时有统计学意义。组间比较，在治疗 30 天、60 天及 180 天回访时组间评分比较均有统计学意义。说明粗
针和吡拉西坦治疗均有效，粗针治疗优于吡拉西坦。结论： 粗针可明显改善血管性痴呆的日常生活能力量表评
A
B
A 盐酸小檗碱标准品图
B 黄连样品图
1 盐酸小檗碱
图 1 盐酸小檗碱高效液相色谱图
中，加盐酸 － 甲醇 = 1 ∶ 100 混合溶液稀释，60℃ 水浴温浸
15min，冷却至室温，加盐酸 － 甲醇 = 1： 100 混合溶液稀释
至刻度，摇匀，0． 45μm 微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
2． 4 线性关系的考察
由表 2 中极差 R 值大小显示，各因素作用主次为 A ＞ B
＞ C，即加水倍量 ＞ 提取次数 ＞ 提取时间，最佳工艺应为 A3 B2 C3 。经方差分析（ 表 3） 可知： A 因素具有显著性意义（ P ＜ 0． 05） ，以 A3 为佳，B、C 两因素的影响无显著性意义（ P ＞ 0． 05） ，故在实验范围内，考虑实际生产成本，最佳优选组合
稀释至刻度。从 250mL 量瓶，取滤液 0． 5mL，置 25mL 量瓶
中药及天然有效成分的研究与开发。
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表 2 正交试验表及结果
因素
试验号
A
B
C
D 盐酸小糪碱量 /%
1
1
1
1
1
2
1
2
2
2
3
1
3
3
3
4
2
1
2
3
5
2
2
3
1
6
2
3
1
2
7
3
1
32Βιβλιοθήκη 8321
3
9
3
3
2
1
K1 9． 197 9． 969 10． 535 10． 646 K2 11． 237 10． 999 10． 321 10． 421 K3 11． 393 10． 8588 10． 971 10． 761
法［7］，但上述两 种 方 法 操 作 繁 琐，影 响 因 素 多，准 确 性 较 差。故本文根据盐酸小檗碱为季铵碱，易溶于水，设计以水 溶剂的提取方法，采用正交实验设计，以 HPLC 法测定盐酸
色谱柱： Hypersil BDS C18 （ 250mm × 4． 6mm，5μm） ； 流 动相： 乙腈∶ 0． 02moL·L － 1 KH2 PO4 = 30 ∶ 70，pH = 3． 0； 流 速： 1． 0mL·min － 1 ； 检测波长： 350nm 柱温： 30℃ ； 进样量
精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液 1 mL，稀释成浓度为 145． 000、72． 500、36． 250、18． 125、9． 0625、4． 531μg· mL －1
的系列梯度对照品溶液，按照上述“2． 1”色谱条件，各精密
吸取 10μL 注入液相色谱仪，记录峰面积。对峰面积 Y 和
进样量 X（ μg） 进行线性回归，得到盐酸小檗碱的回归方程
条件为 A3 B1 C1 ，即药材加 12 倍量水，提取 1 次，提取 1h。 2． 6 验证性实验
按照上述最佳提取工艺进行验证试验，平行提取 3 次，
测得盐酸小糪碱的平均得率为 4． 16% （ 高于正交表中 9 次
试验的结果） ，RSD 为 1． 51% 。表明该提取工艺能较好地
反映黄连中盐酸小檗碱的提取条件。
2． 7 精密度试验
精密吸取对照品溶液 10μL，连续进样 6 次，测定盐酸
小檗碱的峰面积的 RSD 为 0． 34% ，表明精密度良好。
2． 8 稳定性试验
取供试品溶液在 0、2、4、6、8、12h 分别进样 10μL，记录
峰面积，结果盐酸小檗碱面积值的 RSD 为 2． 49% ，可见供
试品溶液在 12h 内基本稳定。
摘 要： 目的： 优选黄连中盐酸小檗碱的最佳提取工艺条件。方法： 采用正交试验设计，以盐酸小檗碱的含量
为考察指标，考察加水倍量、提取次数和提取时间 3 因素对提取结果的影响。结果： 盐酸小檗碱的最佳提取工艺
为加药材 12 倍量的水回流提取 1 次，提取时间为 1h。结论： 该优化提取工艺稳定可行，重现性好，可用于黄连中
分，具有积极的治疗血管性痴呆的作用。
关键词： 粗针； 身柱穴； 血管性痴呆
中图分类号： R246
文献标识码： B 文章编号： 1673 － 7717（ 2011） 03 － 0530 － 02
Evaluation with ADL － R on Vascular Dementia Treated with Thick Needles
528
2． 3 供试品溶液的制备［8］
学
收稿日期： 2010 － 09 － 20
精密称取黄连药材 5g，分别根据表 1、2 试验条件进行
刊 基金项目： 浙江省教育厅资助项目（ 20071129）
加水回流提取，趁热过滤，转移至 250mL 量瓶中，加蒸馏水
作者简介： 黄家卫 （ 1961 － ） ，男，浙江杭州人，副教授，研究方向：
误差来源
SS
f
S
F
P*
A
3． 003
2
1． 502 50． 222 ＜ 0． 05
B
0． 625
2
0． 313 10． 457 ＞ 0． 05
C
0． 219
2
0． 110 3． 666 ＞ 0． 05
误差
0． 060
2
0． 030
F0． 05 （ 2，2） = 19； F0． 01 （ 2，2） = 99。
Key words： Coptis chinensis Franch； Berberine； Extractio
黄连为毛茛科植物黄连 Coptis chinensis Franch、三角叶 公司） ；
黄连 Coptis deltoidea C． Y． Cheng et Hsiao 或云连 Coptis teeta 1． 2 试药