风湿病常用血清学检查
2.临床意义:IgM-RF的常用检测方法是半定量的乳胶凝集 试验,一般认为RF滴度1:80~1:160具有临床意义。 目前许多实验室已开展应用比浊度法或ELISA法定量检 测IgM-RF,前者的正常值范围约为<20 IU/ml。
四.类风湿因子
RF与多种疾病相关,可概括为“CHRONIC”(见下),此外,正常 人尤其是老年人(5%)也可以RF阳性,而且随年龄的增长RF阳性率可 增高,所以RF对RA的诊断不具特异性。
2.正常值:正常人阴性。 3.意义:LE细胞检查是五、六十年代检测ANA的主 要方法,对于SLE具有一定的特异性。由于LE细胞检查 费时、费力,而且受吞噬细胞功能等因素的影响,目前 临床上基本已不再开展。尽管如此,LE细胞的发现推 动了继后的SLE等自身免疫病中多种抗核抗体的研究, 具有重要历史意义。
二.抗核抗体(ANA)
11.何谓ANA谱:ANA谱是由针对一组重要的核抗原(包括 部分胞浆抗原)的各种特异性自身抗体组成的,这些自身 抗体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别 诊断具有重要意义。
标准的ANA谱包括:抗dsDNA、抗Sm、抗U1RNP、抗 SS-A/Ro、SS-B/La、抗核糖体P蛋白、抗组蛋白、抗Scl70、抗着丝点蛋白、抗Jo-1抗体等。 各种自身抗体的临床意义见表2。
参考文献:中国实验诊断学 2005年2月 第9卷 第1期
二.抗核抗体(ANA) —抗组蛋白抗体
1.抗组蛋白抗体 组蛋白包括H1,H2A,H2B,H3, H4等亚型,是核小体的重要组成部分,抗组蛋白抗体 (AHA)与抗DNA抗体有一定相关性,且与疾病活动度 有关。 2.AHA在异烟肼,肼苯哒嗪,普鲁卡因酰胺等诱导 的药物性狼疮中阳性率几乎达到100%,是诊断药物 性狼疮的重要抗体。
参考文献: 中华风湿病学 第21章
基本荧光核型
荧光核型 (核)均质型 Homogeneous
(核)周边型 Perinuclear
荧光染色特点
细胞核均匀染色,分裂期细胞染色体 区域着染。
相关抗体
抗组蛋白抗体, 抗dsDNA抗体
细胞核均匀染色,核周染色更强; 分裂期细胞染色体区域强着染。
抗层粘素` 抗核膜-核孔复合物, 抗DNA
二.抗核抗体(ANA)
1.定义:抗核抗体(ANA)泛指作用于细胞核 (浆)内蛋白质、(脱氧)核酸或由其组成的大分子复合物 等多种抗原成份的自身抗体,迄今为止已发现几十种 以上。
2.意义:许多自身免疫性风湿病的患者血清中存 在多种ANA,ANA的检测和识别可以为风湿性疾病的 诊断、鉴别诊断乃至病情判断提供重要的实验室依据。
1.是SLE的特异性抗体,特异性为90%~95%,敏感性约70%。
2. 用ELISA法可同时检测IgG,IgA和IgM等亚型, 不同亚型 与不同的SLE临床表型有关。
3. IgM型可能与SLE皮肤损害有关,而存在IgG亚型抗体的患 者具有较高的狼疮性肾炎发生率。
ForgerF,MatthiasT,OppermannM,etal.Clinicalsignificance of anti-dsDNA antibody isotypes: IgG/IgM ratio of anti-dsDNA antibodies as a prognostic marker for lupus nephritis [J].Lupus,2004,13(1):36.
表2:自身免疫性风湿病的抗核抗体谱(阳性率%)
抗
抗Sm 抗
dsDNA
RNP
SLE
40
70%
药物性 狼疮
15 30% 30%
抗 SS-A/Ro
பைடு நூலகம்35%
抗 SS-B/La
15%
抗核 糖体 P蛋白
510%
抗 Scl70
SS
少见 6070% 5060%
抗 Jo-1
stranded DNA antibody[J].ClinExpRheumatol,2002,20:13.
四.类风湿因子
1.定义:类风湿因子(RF)是指针对人或动物IgG分子 Fc段 上抗原决定簇的特异性抗体,RF包括IgM,IgG,IgA 或IgE型,其中IgM-RF是RF主要类型,也是临床上常 规开展检测的RF。
二.抗核抗体(ANA) —抗Sm抗体
1.在SLE中阳性率约为30%,特异性几乎达100%,对早期不 典型SLE的诊断有重要意义。
2.Sm抗原为核内小核糖体蛋白,抗原成分中包括了u1RNP, 两者联合检测有一定意义。
3. 抗Sm抗体和抗ulRNP抗体一旦出现一般会保持一个相 对恒定的水平,它们不会在疾病的静止期消失。
二.抗核抗体(ANA)
7. ANA荧光核型是指在荧光显微镜下观察到的核 荧光染色的类型。
8. 常见荧光核型有(以HEp-2细胞株为基质的 IFANA):周边型、均质型、颗粒型、核仁型、着 丝点型及增殖细胞核抗原(PCNA)型等。
9.意义:核型的不同反映了标本血清中存在针对不 同核抗原的自身抗体.如:核仁型多见于PSS,周边型 多见于SLE.
[1]苏茵,韩蕾,栗占国等.抗核小体抗体测定在系统性红斑狼疮诊断中的意义[J].中华风湿病学杂 志,2003,13(1):474. [2]Min DJ,Kim SJ,Pank SH,etal.Anti-nucleosome antibody:sigmifi-Cance in lupus patients lacking anti-double-
二.抗核抗体(ANA)
表1. 不同风湿病的IFANA阳性率(HEp-2细胞为抗原基质)
疾病 SLE 药物性狼疮 SSc MCTD SS PM/DM
ANA阳性率(%) 99 100 97 93 90 78
参考文献:Peng SL, Hardin JA, Craft J. Antinuclear Antibodies. In Kelley WN, Harris ED, Ruddy S, Sledge CB(ed): Textbook of Rheumatology fifth edition W.B. Saunders Company 1997.
混合性结缔组织病(MCTD),干燥综合症(SS),多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)等; N (Neoplasms) 肿瘤; I (Infections) 感染,如AIDS,单核细胞增多症,寄生虫感染,慢性病 毒感染,慢性细菌感染(结核、 亚急性细菌性心内膜炎,其它); C (Cryoglobulinemia) 冷球蛋白血症。
3.在ANA阴性的SLE患者,SSA抗体阳性率可较高。 4.抗SSB抗体在SS中的阳性率与SSA抗体近似,而特异
性较SSA高。 5.两个抗体联合检测有利于SS的诊断,有报道两者均
阳性的患者约83%符合SS诊断标准。
[1]Bodolay E,Csiki Z,Szekanecs Z,etal.Five-yearfollow-up of 665 Hungarian patients with undifferentiated connective tissue disease (UCTD)[J].ClinExpRheumatol,2003,21:313.
二.抗核抗体(ANA)
5. ANA阳性的定义:一般将超过95%正常人群ANA水平的 数值定义为ANA阳性,对大多数实验室而言,通常认为 IFANA滴度1:80为阳性。
6.ANA阳性的临床意义 :可见于多种临床情况,除了自身免 疫性风湿病(表1)外,还可见于各种原因引起的肝硬化、自 身免疫性肝病、肿瘤以及少数正常人尤其是老年人,但在 正常人中通常IFANA滴度较低。
间期细胞核内均匀分布细颗粒染色; 抗着丝粒/动粒抗体 分裂中期细胞中细颗粒沿染色体中板 呈线性分布。
同一视野阴性、阳性染色细胞共存; 抗PCNA抗体 不同细胞周期的细胞染色类型不同。
SSc CREST综合征 SLE
二.抗核抗体(ANA)
10.药物性狼疮:普鲁卡因酰胺、肼苯达嗪、苯妥英钠、 异烟肼、奎尼丁等一些药物可诱导出现ANA阳性,其中 部分病人有发热、关节痛、肌痛、浆膜炎、面部皮疹、 口腔溃疡、狼疮发等临床表现而肾脏、血液、神经系 统较少受累称为药物性狼疮。 在这种情况下,停用相应药物后数月至数年内ANA仍 可阳性,其ANA主要作用于组蛋白, 抗组蛋白抗体是诊 断药物性狼疮的必要实验室条件。
相关疾病
SLE, 药物性狼疮, 其它
慢性活动性肝 炎, SLE
(核)斑块型 Speckle
细胞核颗粒状、块状着染;核仁通常 抗盐水可抽提核抗原
不着染;分裂期细胞染色体区域不着
(ENA)抗体
染。
SLE,MCTD, SS,SSc,其它
核仁型 Nucleolar
着丝点型 Centromere
PCNA型
核仁着染,表现为核内几个大的块状 抗核仁抗体 或颗粒状染色(通常不超过6个)。
风湿病常用血清学检查
总论
风湿病的常用血清学检查是风湿病诊 断、鉴别诊断的重要辅助手段之一,部分 检测项目可以作为病情和预后判断、疗效 考察的参考指标。临床实践中应综合临床 和实验室资料对疾病作出正确的诊断和评 估。
一.狼疮细胞
1.定义:狼疮细胞即LE细胞,是指胞浆中有一个苏 木精染色呈紫红色的很大的椭圆形小体,而细胞核却被 推挤在一边的吞噬细胞(多为多形核白细胞) 。
二.抗核抗体(ANA)
3.ANA筛选实验的方法:间接免疫荧光抗核 抗体检测(IFANA)。
目前以HEp-2细胞(人喉癌上皮细胞)为抗 原基质的IFANA是国际公认的高敏感性标 准ANA筛选实验。
二.抗核抗体(ANA)
4. ANA筛选实验基本原理:患者血清中存在的 ANA(第一抗体)能与相应细胞核(浆)抗原成 分结合,再用荧光标记的抗人球蛋白抗体(第 二抗体)复染,经过荧光显微镜观察即能反映 ANA的存在,而且通过对患者血清做一定稀释 后的检测还可以对抗体含量作半定量(滴度) 测定。