抗肿瘤药紫衫醇脂质体的研究姓名：黄迅学号：100705038班级：2010级5班【摘要】目的介绍紫衫醇脂质体的作用机理、制备和发展应用。
方法根据近几年来国内相关文献，介绍和评价紫衫醇脂质体的作用机理、制备和发展应用。
结果更多的让我们了解了紫衫醇脂质体制备方法和各种发展方向。
结论在了解更多的制备方法和、发展方向，望将来能开辟更好的抗肿瘤临床新途径。
【关键字】紫衫醇脂质体抗肿瘤应用与发展制备【abstract】objective to introduce the purple shirt alcohol mechanism, preparation and development of application of liposomes. Methods according to the domestic related literature in recent years, introduce and evaluate the purple shirt alcohol mechanism, preparation and development of application of liposomes. Results more let us know the purple shirt alcohol liposome preparation methods and various development direction. Conclusion in know more about the preparation methods and development direction, and hope in the future to open up new ways of better anti-tumor clinical.【keywords】the purple shirt alcohol liposome antitumor application and development of preparation紫杉醇是治疗晚期非小细胞肺癌常用化疗药物，但紫杉醇不溶于水，目前临床上使用的紫杉醇均是溶于一种由聚氧乙基代蓖麻油与无水乙醇员颐员比例混合的复合溶媒中，而悦则鄄耘蕴可引发严重的过敏反应，使得临床使用紫杉醇前需应用糖皮质激素及抗组胺药物处理以减轻过敏反应。
可临床作用于卵巢癌,乳腺癌,非小细胞肺癌,肿瘤科,乳腺外科,妇产科。
1 紫衫醇脂质体的作用和作用机理。
紫衫醇脂质体可用于治疗巢癌,乳腺癌,非小细胞肺癌，也可以用于肿瘤科，乳腺外科，妇产科。
紫杉醇脂质体为细胞毒类抗肿瘤药，它的作用机理是促进微管双聚体装配并阻止其解聚也可导致整个细胞周期微管的排列异常和细胞分裂期间微管星状体的产生从而阻碍细胞分裂抑制肿瘤生长由于紫杉醇不溶于水及多种药用溶媒，但脂质体是一种新的药物载体，它具有改善药物的溶解性，延长药物的半衰期，提高药物靶向性和降低药物毒副反应等优点。
注射用紫杉醇脂质体（力扑素），采用脂质体这一药物新载体，解决了紫杉醇不溶于水的难题，不再使用聚氧乙基代蓖麻油和无水乙醇的混合溶媒，从而避免了因其引起的人体毒性反应和过敏反应。
本文研究比较了注射用紫杉醇脂质体和紫杉醇注射液的体内外抗肿瘤效果和相关毒副反应。
此外，因使用预处理方案，限制了伴有糖尿病、高血压和溃疡病的肿瘤病人使用。
注射用紫杉醇脂质体是以磷脂、胆固醇等为膜材料，采用特殊制备工艺将紫杉醇包裹在脂质体中，不再使用混合溶媒，避免了因使用混合溶媒而对人体所产生的毒副反应和临床使用的限制。
2 紫衫醇脂质体的制备2.1 仪器与药品L-2400高效液相色谱仪；RE5299旋转蒸发仪；Z-3高压均质机；RH-5倒置显微镜；激光粒度分析仪；Z-160M台式微量离心机。
Tax及其对照品；胆固醇；精制蛋黄卵磷脂；二硬脂酰磷酸甘油；葡聚糖磷胶；紫杉醇脂质体；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
2、2 处方与制备EPC660mg,DSPG77mg,胆固醇10mg,Tax25mg,氯仿-甲醇(3∶1)混合溶液5mL,磷酸盐缓冲液（PBS,pH714)20mL水化脂质体薄膜,即得脂质体。
分别称取EPC、DSPG、Tax各660、77、25mg,完全溶解于氯仿/甲醇混合溶液后,置于磨口梨形烧瓶中,于50℃水浴、100r・min-1条件下,减压蒸去有机溶剂,使磷脂成半透明或白色蜂巢状膜,用PBS充分水化薄膜,15000Psi高压均质循环2～3次,分别过200、100nm的聚碳酸酯膜各2次,即得。
2.3含量测定2.3.1 色谱条件及色谱行为色谱柱:VenusilMPC18(150mm×416mm,5μm)；流动相:乙腈-水(60∶40);长:227nm;流速:110mL・min-1;温度:室温;进样量:20μL。
2.3.2溶液的配制对照品贮备液。
精密称取Tax对照品510mg,置于50mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,置于4℃冰箱中避光保存。
供试品溶液。
精密量取Tax脂质体溶液012mL,置于10mL容量瓶中,加入一定量的甲醇破膜,摇匀,待溶液完全澄清透明后用乙腈-水(60∶40)稀释至刻度,摇匀,即得。
空白脂质体溶液。
取不含主药以外的空白脂质体0.2ml。
2.3.3 标准曲线的绘制分别精密量取对照品贮备液7.5、6.0、3.0、1.5、0.75、0.15、0.03mL,10m 容量瓶中,用甲醇稀释至刻度。
进样分析,以峰面积对浓度进行回归分析,得回归方程A=161.48C—84107(r=0.9998)。
结果,Tax检测浓度的线性范围为0.3～75μg・mL-1。
2.3.4 精密度试验取“3.5”项下低、中、高3种浓度溶液,按“3.2”项下供试品溶液制备方法处理样品,进样分析，以同日内每种浓度测定3次所得的Tax浓度计算日内RS D;以连续5d测得的Tax浓度计算日间RSD。
结果,低、中、高浓度日内RSD分为1.1%、1.0%、0.4%;日间RSD分别为1.9%、1.1%、1.4%,表明本方法精密度良好。
.352.3.5回收率试验用空白脂质体、对照品贮备液配制浓度分别15.00、18.75、22.50μg・mL-1(低、中、高浓度)的样品各3份,按“3.2”项下方的处理样品，进行分析，计算回收率。
2.3.6 样品含量测定取样品3批,按“3.2”项下方法配制溶液,注入高效液相色谱仪,记录色谱,测定含量。
结果,3批样品中紫杉醇的含量分别为948、951、972μg・mL-1。
紫杉醇(Paclitaxel,Tax)是一种具有独特抗癌机制[1]的生物碱,对治疗多种晚期癌症有一定疗效。
但由于其在水中的溶解度极小,口服无法吸收,且现临床应用的Tax注射液为由聚氧乙烯蓖麻油/无水乙醇混合溶媒制成的浓溶液,临用前须稀释,不仅使用不便,而且会引起多种毒副作用[2～4],其中过敏反应最为严重,由此使其应用严重受限。
脂质体作为一种新型药物载体,自问世以来一直广受关注,所以本试验将其结合旨为临床提供一种新的高效低毒的Tax制剂。
3 紫衫醇脂质体研究发展3.1 紫衫醇脂质体纳米粒紫杉醇(paclitaxd,taxol,TAX)最初从红豆杉中分离和确定的，不久，KUSAMA 和MANDAl分别用线性合成法和会聚方法全合成得到TAX，但合成路线长、产率低、用于工业化生产有一定难度。
2005 年美国 FDA批准白蛋白结合紫杉醇纳米粒注射混悬液上市，该药去除了助溶剂聚氧乙烯蓖麻油，能安全增加高紫杉醇的用药剂量，缩短滴注时间，并且在用药前不需要给予患者预用药以预防过敏反应。
因此,TAX的高效低毒的靶向制剂的尤其是纳米粒的研究已成为近几年的热点。
3.1.1 纳米粒的优点纳米粒是指大小为0.1～100 nm的粒子，其具有表面反应活性高、表面活性中心多、催化效率高、吸附能力强等优良特性。
静注的TAX药物时由于以下原因：①药物被吸收、转运、代谢过程中被网状内皮系统(RES)吸收[；②由于粒径在10nm-100nm之间,药物大部分滞留在血液中,未分布到肺、心脏、肝脏等器官；③受实体瘤的高通透性和滞留效应的影响,据统计每十万个单位只有1～10 个能够到达药用部位。
纳米粒解决了这个难题:一方面,表面附着聚乙二醇等亲水多聚物，可以改善纳米粒溶解度和在体内的相容性，又可保护结合蛋白免受体内酶的降解。
另一方面，纳米粒的表面可修饰性可与配体分子结合，增加药物的特异性，可提高药效，减少对正常细胞的损伤等毒副作用。
3.1.2 纳米粒的制备方法一：乳化聚合法以水作连续相的，将单体分散于水相乳化剂中的胶束内或乳滴中，遇OH－或其他引发剂分子或经高能辐射发生聚合，然后通过聚合形成由103 ～105个聚合物分子组成的固态。
TAX聚氰基丙烯酸烷酯（polyalkylcyano- acrylate, PACA）纳米粒 PACA极易生物降解，在体内几天即可消除。
在室温下的聚合反应以水中OH－离子作引发剂，反应式如下：方法二：天然高分子材料凝聚法TAX多糖纳米粒先将多糖溶于含TAX 的0.2 mol/L磷酸盐缓冲液，加入丙烯酸环氧丙酯（或加有偶联剂），室温搅拌，反应10 天，离心分离，即得。
其反应式如下：方法三：液中干燥法取20 mgTAX与400 mg PLA溶于2 ml氯仿中作为油相，与0.5%明胶溶液40 ml在15 ℃以下超声乳化45 min制得O/W型乳状液，升温至42 ℃挥发氯仿，再超声42 min除尽氯仿，离心，水洗后将NPS混悬于水，冻干2 天。
NPS平均粒径为476 nm，纳米球收率80.0%，其中药物收率69%，载药量4.3%。
3.2 紫杉醇脂质体联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌紫杉醇是治疗晚期非小细胞肺癌常用化疗药物，其与顺铂联合应用是晚期非小细胞肺癌的标准治疗方案之一。
紫杉醇是一种广谱植物类抗癌药物，通过与微管多聚体结合，并抑制微管解聚，形成稳定的微管束，从而破坏肿瘤细胞的有丝分裂。
但溶媒引起的过敏反应成为限制紫杉醇应用的主要原因。
尽管应用紫杉醇前经过激素和抗组胺类药物处理，可使严重过敏反应降至5%以下，但轻度过敏反应率仍高达30%。
Cr-EL也可在血液中形成微小颗粒并包裹紫杉醇分子，影响药物分子向组织间扩散，从而改变紫杉醇药代动力学，使其呈非线性分布，降低其抗肿瘤疗效。
另外，外周神经病变也Cr-EL被认为是的效应之一。
因此，使用另一种载体取代Cr-EL，对减少不良反应的发生，提高患者的安全性和耐药性，增强化疗效果具有重要意义。
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