检测IgM抗体对早期诊断有价值。 立克次体抗原吸附于载体。泛影葡胺梯度离心纯化 抗原为优，检出血清的抗体效价高，纸上 ELISA 测 定抗体，方法简便。将感染卵黄囊悬液加于玻片 ( 经氯仿 ·甲醇洗净 ) 上，凉干、固定，加稀释血清 于抗原点上，每张玻片上包括阳性和阴性对照，加 酶标兔抗人IgM/G于抗原·血清点作用后，将浸透新 鲜配制的底物无灰滤纸覆盖在玻片上约 4-6min，可 见滤纸条上阳性对照点位置显紫棕色，取下滤纸条 (即终止反应)，观察是否显色，与对照比较判定结 果。此法简便，并可保存实验记录。
钩端螺旋体病------一种人畜共患传染病
•疾病特点
起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结 膜充血、腓肠肌压痛、浅表淋巴结肿大
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四体
•免疫性
疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力，
体液免疫为主
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四体
三、微生物学检查法
1.病原体检测 发病10天内取血液;1周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液 • 直接镜检（Fontana镀银染色法，暗视野查活菌） •分离与鉴定 接种至Korthof培养基，置28℃孵育。 阳性标本在 2 周内可见培养液呈轻度混浊→暗视野显微 镜检查→有→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。 •动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔 •分子生物学方法
四体
3．分离培养
(1)动物接种 选用健康雄性豚鼠接种以便观察阴囊肿胀现 象。每日测体温，至 40 ℃ 发热时采血或脏器 悬液、接种鸡胚卵黄囊或细胞培养以分离立 克次体； 感染莫氏立克次体豚鼠在发热 1 —2日内出现 阴囊红肿，解剖可见腹股沟淋巴结肿大、充 血、脾大2-3倍，有腹水；有阴囊反应者，睾 丸有小出血点，鞘膜充血并有浆液性渗出物 等。鞘膜涂片可查到立克次体。
螺旋体
四体
致病性与免疫性
致病物质：

荚膜样物质、黏附因子、透明质酸酶
▲
致病过程及临床特征：
获得性梅毒和先天性梅毒
四体
• -
获得性梅毒病程及特征：
I 期 梅 毒 ： 外 生 殖 器 硬 下 疳 （ hard chancre），传染性强。 II 期 梅 毒 ： 皮 肤 及 粘 膜 梅 毒 疹 （syphilid），传染性强、组织破坏小。 III 期梅毒：动脉瘤、脊髓痨或全身麻 痹，传染性小，组织破坏大。
回归热螺旋体 伯氏螺旋体
密螺旋体属：
梅毒螺旋体
钩端螺旋体属：
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钩端螺旋体
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四体
、钩端螺旋体 （Leptospira）
四体
生物学性状
•
形状： 一端或两端弯曲成钩状， 菌体常呈问号状或 C 、 S 形。

•
结构： 柱形原生质体、内鞭毛、 外膜（由内至外）。

•
动力：

常用暗视野显微镜观
四体
4．抗体检测
立克次体病常用的血清学诊断方法除外斐 反应、间接免疫荧光(IFA )试验、酶联免 疫吸附试验(ELISA)外，还有补体结合(CF)
试验、微量凝集(MA)试验、间接血凝(IHA)
试验、胶乳凝集(LA)试验等 。
四体
(1)外斐反应
除Q热、立克次体痘及罗沙利马体感染为阴性 外，其他为阳性。 患者OX凝集素上升较晚，在病程2周左右方出 现阳性，病程中双份血清试验，若效价有4倍
四体
致病类别


肺炎支原体（M.pneumoniae) 人型支原体(M.hominis) 生殖器支原体(M.genitalium) 穿透支原体(M.penetraus) 溶脲脲原体(U.urealyticum) 发酵支原体（F. pneumoniae)
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四体
泌尿生殖道感染 多见于艾滋病
表面感染
表面感染 入血
溶脲脲原体 发酵支原体
泌尿生殖道感染，垂直传播 关节炎
表面感染 表面感染
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一、肺炎支原体

感染呈全球性分布，主要侵犯呼吸系统,借滑行运 动穿过粘膜上皮细胞纤毛屏障，主要粘附因子为一 类对胰酶敏感的表面蛋白，称Pl蛋白。
四体
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四体
2.血清学诊断
• 病初和发病后第3~4周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液 • 方法:
显微镜凝集试验(MAT) 间接凝集试验
以乳胶 (聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物
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四体
四、防治原则
• 防：
• 防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。 • 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接 种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。
四体
(2)鉴定

用免疫荧光法鉴定感染动物脏器、鸡胚卵 黄囊、细胞培养物中的特异性抗原以已知 抗原测定动物恢复期血清中的相应抗体。 必要时用补体结合试验、微量凝集试验等， 作群和种的鉴定。
四体
(3)分离株繁殖及保存
①鸡胚卵黄囊培养 收获卵黄囊，经涂片 染色镜检, 含立克次体较多而又未发现细 菌的卵黄囊膜，或将其作成适当浓度的 悬液置-70℃冰箱保存，或冰冻干燥保藏； ②细胞培养：选鸡胚、成纤维、人羊膜、 HeLa等细胞，接种培养、鉴定后将立克 次体大量繁殖的感染细胞置-70℃储存。
• 治：首选青霉素2018/11/1511四体梅毒螺旋体
• • • • •
形状：两端尖直。 结构：与钩端螺旋体相同。 动力：移行、滚动等方式运动。 染色法：与钩端螺旋体相同。
暗视野显微镜下的梅毒
螺旋体
培养：不能在无生命的人工培
养基上生长繁殖，但可用棉尾
兔上皮细胞或接种家兔培养 。
镀银染色法染色的梅毒
四体
外
梅毒疹
生 殖 器 硬 下 疳
心
内 梅 毒 瘤
四体
•
先天性梅毒：

流产、早产或死胎，新生儿皮肤病变、马
鞍鼻、锯齿牙、骨软骨炎、先天性耳聋等体征， 俗称梅毒儿。
锯齿牙
骨软骨炎
四体
▲
免疫性：
传染性免疫，以迟发型超敏反应
为主的细胞免疫抗感染作用较大。
四体
微生物学检查及防治原则
▲
微生物学检查
察，呈旋转式活泼运动。
暗视野显微
镜下的钩端螺 旋体
四体
•
染色法：
常用镀银染色法，菌 体呈金黄色或棕褐色。

是唯一能够人工培养的致病性螺旋体 镀银染色法染色 的钩端螺旋体 营养要求复杂，常用Korthof培养基 适宜生长温度为28~30℃ 生长缓慢，需氧或微需氧， 5 － 7 天半 透明云雾状生长（液面 1cm 处最丰富）
四体
三 立克次体 (rickettsia)
多形态，革兰染色阴性，大小介于细菌和病毒之间 专性寄生(活细胞内寄生，似病毒）、二分裂繁殖 （似细菌） DNA、RNA及复杂酶系统，对多种抗生素敏感（似 细菌） 与节肢动物关系密切，寄生在吸血节肢动物体内，或 为寄生宿主、或为储存宿主、或同时为传播媒介 大多是人兽共患病的病原体
四体
四体
支原体
立克次体
衣原体
螺旋体
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一
螺旋体
(spirochete )
概念：螺旋体是一类细长、柔软、一端或两端弯曲 成螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。基本结 构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分 裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等 主要类型：

疏螺旋体属：

四体
二、致病性与免疫性
•传染源 •传播途径 鼠和猪 经粘膜或破损皮肤进入; 经胎盘垂直传播 致病物质---类似细菌内毒素与外毒素
•1．内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS) •2．溶血素 •3．细胞毒性因子(CTF) •4. 细胞致病作用(CPE)物质
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•所致疾病
-
病原学检查：（一期）硬下疳、（二期）梅毒疹渗出
液，用暗视野显微镜、直接免疫荧光法或ELISA检查。
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血清学检查： RPR 或 TRUST 初筛， TPHA 或 TPPA 确
诊。
▲
防治原则
预防：加强性卫生教育和性卫生，但目前尚无疫苗。
治疗：青霉素类药物长程治疗。
-
四体
二 支原体 (mycoplasma)
流行性斑疹伤寒
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2 斑疹伤寒立克次体：
（1）传染源：患鼠，患者 （2）传播媒介：鼠虱，鼠蚤 （3）所致疾病：地方性斑疹伤寒（鼠传型斑疹伤寒） （4）传播途径：
鼠粪中立克次体
破损皮肤，口， 鼻眼黏膜
体 内
地方性斑疹伤寒
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(三)微生物检验
生物学性状

形态与结构 最小，0.2~0.3μm 多形性：球形，双球状，丝状（无细胞壁） 细胞膜含有大量固醇 特殊结构：荚膜，顶端结构，微丝 繁殖方式：二分裂，出芽等 染色方法：Giemsa染色 淡紫色 革兰染色阴性
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培养



营养要求比一般细菌高 在pH7.8~8.0间生长，低于7.0则死亡（溶脲脲原 体pH6.0~6.5） 生长缓慢 典型的菌落呈荷包蛋样 液体培养基澄清（以颜色改变作为生长现象）
四体
1.寄居泌尿生殖道，传播途径为性接触和母婴传播。 致病机制与侵袭性酶有关。吸附后产生磷脂酶分 解胞膜中的磷脂，脲酶分解尿素产氨，影响宿主 细胞生物合成。产生IgA蛋白酶，破坏IgA的局部 抗感染作用，有利于粘附和致病。