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免疫胶体金_PPT课件


最近由于原料的精选和制作工艺的改进,已能制备出可用于定量测定的GICA试剂。Roche公司生产的用于急性心 肌梗死诊断的肌钙蛋白和肌红蛋白的GICA试剂和匹配的简便测读器Cardiac Reader,其精密度和准确性均符合 定量测定要求。
04
免疫胶体金技术的展望
免疫胶体金技术展望
01
提高胶体金的制备质量
04
实现多元化检测
采用多膜复合或单膜多元 受体固定的方式,是实现 多元检测的有效方法。
谢谢聆听
汇报人:詹积 学号:6160109017 专业:营养与食品卫生学
抗体和金颗粒的耦联
在适宜条件下,抗原和抗体与胶体金颗粒 反应产生聚集,达到一定的密度时,大量 聚集的标记物显示出肉眼可见的红色或粉 红色斑点。
胶体金的制备——化学还原法
基本原理:在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原成金原子。在适当条件下,还原的金原子
凝聚成一定大小的金颗粒,形成金溶胶。
Stop heating when a deep red color is obtained.
Hale Waihona Puke 3胶体金技术的种类及特点免疫胶体金快速诊断技术
快速免疫金渗滤法
免疫层析法 ( immunochromatogra-phy,ICA)
(immuogold filtration assay ,IGFA)
A:金标记抗体 B:标本中的抗原 C:包被抗体 D:NC膜 E:吸水材料 F:塑料盒
Add 100 mL of 1.0 % HAuCl4 to a 200 mL Erlenmeyer flask on a stirring hot plate. Add a magnetic stir bar and bring the solution to a boil.
To the boiling solution, add 1.5 mL of a 1% solution of trisodium citrate dihydrate, Na3C6H5O7 · 2H2O
制备大小均匀、分散度好的胶 体金颗粒在检测中至关重要。
02
提高灵敏度、检测范围
提高检测灵敏度的关键是对捕获信号进 行放大。 结合相应的生物传感器和电化学设备等, 对靶信号染色标记,可拓宽检测范围
03
实现半定量或定量检测
通过检测线结合已知定量的分 析物,产生温度计式的条带梯 度,达到定量或半定量的检测 目的
免疫层析法中滴加在膜一端的样品溶液受膜的毛 细管作用(基于层析作用的横流 (lateral flow) )
主要由两部分组成:膜渗滤装置和标记结合物。前 者为一塑料小盒,其中填满吸水性物质,面上紧贴 放置一片吸附有抗体(以双抗体夹心法测抗原为例) 的硝酸纤维膜,标记结合物为免疫金。
向另一端移动。移动过程中被分析物 与固定在膜 上某一区域的受体(抗原或者抗体)结合而被固相化, 无关物质则越过该区域而被分离,然后通过标记 物显色来判定试验结果,以胶体金为标记物的实 验称为胶体金免疫层析试验。
免疫胶体金技术的特点
技术优点:
1. 胶体金制备简单 2. 标记简单,检测快速 3. 特异性强 4. 敏感性高 5. 定位准确 6. 适应性广 7. 易于双重和多重标记
技术不足:
胶体金免疫测定中应用的是单份试 剂,难于进行质量控制。即使是同 一批生产的试剂,也很难保证每个 试剂的同一性。因此胶体金免疫测 定一般只能用于定性试验。 其定量检测和灵敏度的提高还有赖 于新原料和新材料的开发与应用。
胶体金技术相关定义
免疫胶体金技术 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗
体的一种新型的免疫标记技术。
胶体金标记 实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金
颗粒表面的包被过程。
目录
CONTENTS
01 发展历程 02 制备方法
03 种类及优点
04 技术展望
01
胶体金技术的发展
Development of Immune colloidal gold technique
胶体金基本原理
胶体金概念
是氯金酸 (chloroaurie acid,HAuCl4 ) 在还原 剂( 白磷、抗坏血酸、枸 橼酸钠和鞣酸等 ) 作用 下,聚合成带负电的疏
水胶溶液。
胶体金颗粒带电情况
胶体以金颗粒为核,表面吸附AuCl4-和H+双层离子, 与蛋白质分子及其它非共价的生物大分子 ( 毒素、酶、 抗生素、激素、多肽等 ) 正电荷基团形成静电结合, 且不影响其生物特性。
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