检验试剂及耗材的采购、验收、管理、领用及使用
样品的采集、运送、接收、处理及保存 检验方法的选择、确认或验证
检验项目及仪器设备标准操作程序的建立和管理
检验结果质量保证
检验报告管理的规定：结果的发放方式、报告的格式和 内容、保护患者隐私的规定 记录的管理：记录的修改。保存及期限 对差错事故及不符合工作的纠正及预防措施
程，系统误差应<7.5%）
应保存主要设备的档案，档案内容应包括：设备标识、型 号、序号或其它唯一性识别、到货日期和投入运行日期、 目前放置地点、接收时的状态、仪器使用说明书或其存放 处、证实设备可以使用的设备验证报告、校准和/或检定 报告、维护、损坏、故障或维修的记录
应制定各类仪器维护保养，校准/检定计划，并有执行记 录。
对服务对象投诉处理
人员要求
实验室至少应有2名取得PCR上岗证，并为本单位在职 技术人员 实验室负责人应具有中级或以上专业技术任职资格 开展遗传性疾病基因芯片诊断技术或基于组织等分子 病理检测技术并出具诊断报告的实验室，还应具备至 少2名取得《医师执业证书》、主治医师或以上专业技 术、从事本专业的本单位在职医师
分析中质量控制
对新项目的性能进行方法学验证，并有相应的实验记录。 仪器、试剂、方法更新时应进行方法学验证，并有记录。 定量检测项目方法学验证的内容至少应包括：精密度、 正确度、线性范围（可报告范围）、检出限；
定性检测项目方法学验证的内容至少应包括：检出限、
精密度、符合率。
室内质量控制
目的 监测和控制实验室常规工作的精密度，即实验 室测定的批内和批间重复性 IQC结果决定了实验室即时测定结果的可靠性和有效性
淋病奈瑟菌有自溶的特性，标本采集后应立即送检。
标本保存
靶核酸(尤其是RNA)易受核酸酶的作用而迅速降解，因此酸为DNA的标本2-8℃保存1-3天，靶核酸为RNA的标本应 －20℃下保存 －20℃下保存1个月 －70℃以下可长期保存 如为提取核酸后用于DNA扩增分析的样本，可于10TE缓冲液 {mmol/L Tris,1mmol/L EDTA(pH7.5～8.0)}2-8℃下保存。 用于RNA扩增分析的样本，则应于上述 TE缓冲液中-70℃保存。
使用玻璃器皿，必须为密闭的、必须经高压灭菌，
以使可能存在的RNase永久性失活。
标本验收、拒收
血液标本：溶血、严重脂血等应拒收
泌尿生殖道分泌物：镜下观察到上皮细胞存在。 痰液：镜下观察上皮细胞很少，一般<10个，白细胞一 般>25个。 标本拒收原因分析，采取有效措施予以纠正
标本运送
实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床标本的运送条件 （温度、时间）作出相应规定。
计量性能要求（容量允许误差、测量重复性）
内部校准-参照《定量、可调移液器试行检定规程》 (JJG646-2006)
注意：环境的要求
计量性能要求（标称容量、标定点、容量允许 误差、测量重复性）
校准点涵盖试验过程中所涉及的量程
生物安全柜
清洁: 75%乙醇擦拭,不宜用次氯酸钠溶液清洁 检定：有资质的第三方检测机构 检定参数：高效过滤器完整性、流入气流流速、下降 气流流速、气流模式
标本接收区建议放在四个区域以外的房间
开展基于组织的分子病理项目宜有独立的切片制备和前处理
（脱蜡、水化）区域
设施和环境
进入和使用实验室各区域应有明确的限制和措施，防止患
者和其他非相关人员的随意进出 各工作区域应有明确的标记，应按照单一方向进入各工作
区域，不同区域内的设备、物品不得混用
实验室应规定环境温、湿度的要求，实施监控，并有记录 应有指定的经过培训的内务管理人员（如保洁人员），有 相应清洁用具，有实验室清洁和消毒相关的记录
拒收）、保存和安全处置的具体要求和操作规程 标本应正确采集并符合检测要求
标本运送应符合相关时间、温度和生物安全的要求，
并进行有效监控 标本接收时有接收时间和状态记录
标本拒收原因要明确，并有记录
实验室应对标本拒收原因进行定期分析，有切实可行的整改 措施 用于分子病理检测的石蜡包埋组织标本应按要求及时进行切 片、脱蜡等处理，新鲜组织标本应及时进行取材作冰冻切片 或切开、固定等处理，穿刺细胞应及时进行制备细胞蜡块、 切片等处理。 标本检测全过程包括核酸提取、扩增、产物分析、保存等应 能溯源.分子病理检测项目在检测过程中应以病理号作为原 始标本、取材标本（包埋盒）、蜡块或切片的唯一性标识
标本采集量
标本的类型和采集量应根据所测病原体而定。 一般来说，如果样本的量对病原体培养够用的 话，则其量亦足以用于核酸提取及其后的扩增
检测。
采样容器
采样所用的抗凝剂及相关试剂材料不应对核酸扩增及
检测过程造成干扰。如全血、骨髓和血浆标本，用
EDTA抗凝，不使用肝素，因其是 Taq酶的强抑制剂， 且在核酸提取过程中很难完全去除。
临床基因扩增检验质量要求
上海市临床检验中心
肖艳群
制定依据
《医疗机构临床实验室管理办法》（卫医发[2006]73号）
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办 医政发[2010]194号）
医学实验室质量和能力认可准则 ISO15189(CNAS-CL02) 医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的 应用说明（CNAS-CL36） 医学实验室质量和能力认可准则在病理学检查领域的应 用说明（CNAS-CL37）
实验室有培训制度、计划，保证其技术人员得到及时 培训，并对培训效果进行评估 实验室应定期评审员工的工作能力，保存评审记录
实验室应分册建立技术人员技术档案，档案至少应包
括以下内容:学历、职称、ＰＣＲ上岗证书复印件；培 训、能力评审等资料，并定期更新
实验室设置
原则上应分为四个区：试剂准备区、标本制备区、扩增区、 产物分析区
产物分析区
扩增区
标本制备区
试剂准备区
缓冲间
基本原则：1、四个区域必须相互独立 2、各区不能直通，应有缓冲间 3、各区有独立通风系统
设备、材料与信息系统
使用的仪器、试剂、耗材、辅助品必须符合国家相关规定。
仪器：必须三证齐全 试剂：必须CFDA批准
相同检验项目在不同仪器或系统上进行检测时，须对检验 结果进行比对( 2次/年，每次至少20份标本，计算回归方

耗材、试剂要求
耗材 带滤芯吸头、离心管爆管和抑制物质检
试剂盒的质检
包括外观质检和性能质检
选择或更换试剂品牌：试剂性能验证 更换试剂批号：试剂批间差，应评价核酸提取效率和 扩增效率（定量项目至少使用高低两个临床样本，结 果在T±0.5范围内可接受）
信息系统
建立信息系统管理制度，制订计算机（办公用除外） 和计算机网络使用权限、登陆密码、维护的规定，有
基本内容
质量管理体系建立
人员
实验室设置、设施和环境 设备、材料与信息系统 分析前 分析中
分析后
质量管理体系建立
质量手册、程序文件、操作规程、记录 现行有效 适合自身实际情况 写你所做的、做你所写的、记你所做的
文件至少应包括
组织和人员管理：各类人员的岗位职责、岗位培训、继续 教育、定期考核、评估等 环境、设施及安全管理文件或程序 仪器、设备采购、验收、管理、领用及使用的文件或程序
• •
如使用全自动扩增分析仪，后两区可合并 如使用核酸提取、扩增和产物分析一体化的全自动分析 系统，后三区可合并
各区有独立的缓冲区
各区都有水池 标本制备区有冲眼器和生物安全柜
各区有独立的通风系统（建议有窗户的房间为PCR实验室），
设施和环境
实验室有足够的空间保证：标本处置符合分析前、后样本分 区放置、仪器放置符合维修和操作要求、打印检验报告时交 叉污染的控制
仪器校准
需校准仪器：温度计、温湿度计、移液器、恒温金属浴、生物安 全柜、高速冷冻离心机、扩增仪、杂交仪、测序仪；开展分子病
理项目需校准切片机（包括冰冻切片机）、捞片水浴槽
校准单位资质 合格的校准/ 检定报告 校准周期：参照国家计量部门或生产厂商的要求进行，厂家没有 规定的则每年至少进行一次
内部校准的辅助设备，实验室应根据国家计量部门或生产厂商的
标本接收
标本接收建议在三个测定区之外
接收的标本应收集在原始容器中，不能接受从其他检
测如生化、免疫检验等分出来的标本，因其有较大的 发生标本间污染的可能性
标本处理
血清（浆）： 应1小时内分离血清，抗凝后4小时内分离血浆，然后转移至1.5ml灭菌离心 管中保存。若血清分离不充分，可1500rpm离心5min 。 如甘油三酯含量超过6mmol/L或肉眼可见血清/血浆呈白色浑浊状的标本， 应4℃13 000rpm离心15min,吸取下层清亮血清或血浆转移至1.5ml灭菌离心 管中保存
标本应按相关规定保存，并进行监控和记录
标本采集时间
1、血清（浆）：无特殊要求 2、如用泌尿生殖道分泌物做CT、NG项目：应在抗生素应用前或停 药两周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用 前采集。 3、如用痰做TB：应在抗结核药物应用前或停药两周后采集标本， 如不能停用抗结核药物，应于下次抗结核药物应用前采集。 因为PCR方法所检测的靶物质为核酸，不受标本生物活性的 限制，对于已经死亡的病原体仍可检测出来，即感染后在药物 治疗有效的情况下，患处仍会有少量已死亡的病原体存在。
靶核酸为DNA的标本，如在无菌条件下，则可以在室温下运送，
建议采集后8h之内送至实验室； 靶核酸为RNA的标本，如在无菌条件下，可在室温下运送，如为
较长时间，则应在加冰条件下运送，建议采集后4h之内送至实验
室； 所有标本采集后送至实验室之前，所有临床标本在采集后送至
实验室前，均应放2－8℃临时保存。
凡出具临床检测报告的项目均应开展室内质控