液基薄层细胞学检查中不同样本的细胞保存液配制探讨刘汉忠1，2张平安1(1武汉大学人民医院检验科湖北武汉430060;2湖北省孝感市中心医院病理科湖北孝感432000)【摘要】目的在不同临床细胞样本液基薄层细胞学(TCT)检查中，配制其相应的液基细胞保存液，达到最佳检测效果，提高临床细胞学的诊断率。
方法配制液基细胞保存液①、②、③号，在不同的临床细胞学标本中［常规标本用①号保存液、对于血液多的标本再加用②号保存液(②+①号)、对于黏液多的另加用③号保存液(③+①号)］处理，观察作用效果及诊断成功率，并与常规直接涂片的制片质量及诊断成功率做对照，比较其优缺点及临床应用价值。
结果配制的3种细胞保存液用于细胞制片效果良好，诊断成功率高(99．3%);与常规涂片细胞学检查有显著性差异(P 〈0．05)。
结论①、②、③号液基细胞保存液配制在不同的临床细胞学样本诊断中有较重要的意义，能够提高临床细胞学诊断成功率。
【关键词】液基薄层细胞学细胞保存液配制A preliminary study on different preparation of cell preservation solution for thin－prep liquid based cytology test．LIU Han－zhong1，2，ZHANG Ping－an1．1．Department of Clinical Laboratory，The People＇s Hospital of Wuhan University，Wuhan Hubei430060，China;2．Depart-ment of Pathology，The Central Hospital of Xiaogan，Xiaogan Hubei432000，China．【Abstract】Objective To explore the thin－prep cytology test(TCT)for examination of clinical cell samples，to prepare the correspond-ing liquid－based cell preservation solution，and to acqure the best results for test and to raise the accurate rate of clinical cytological diagnosis．Methods The preparation of liquid－based cell preservation solutions(No，1，2and3)for different clinical cytological specimens had been car-ried out．The preservation solution No．1was applied for conventional specimens，solutions No．2plus No．1were applied for bloody samples，and solutions No．3plus No．1were used for mucous specimens．The quality of examination and rate of successful diagnosis，advantages，disad-vantages and clinical significance of TCT were compared with those of conventional direct smear test．Results The preparation of three kinds of cell preservation solutions used for cytology test obtained good effect and successful diagnostic rate(99．3%);and the difference between TCT and conventional smear cytological examination was significant(P＜0．05)．Conclusion The preservation solutions No．1，2and3for preparation of liquid－based thin－prep cytology test have important significance for clinical diagnosis of cytologic specimens，and they can raise the successful rate of clinical cytological examination．【Key words】TCT;Cell preservation solution;Preparation膜式超薄液基细胞学检测（thinprep liquid basedcy-tology test，TCT）技术近年来已广泛应用于临床细胞病理学诊断。
研究显示该技术在细胞学病理检查中有很大的诊断价值［1－3］。
然而由于临床细胞样本多样化而对细胞保存液有不同的要求，因而液基细胞在临床不同细胞学样本诊断中的应用受到了一定限制。
为适应临床不同细胞学检测样本的液基细胞，本研究于2008年4月至2011年4月对不同的样本所需细胞保存液进行了配制探讨，特别是在食管刷片、痰液、尿液、胸腹水细胞学液基细胞保存液的研制与应用取得了较好的效果，对宫颈液基细胞学的检测也有较大的进步，现总结如下。
1资料与方法1．1一般资料选择行TCT检测的272例患者标本，其中痰液标本24例（8．8%），食管刷片24例（8．8%），尿液标本46例（16．9%），宫颈制片112例（41．2%），胸腹水66例（24．3%）。
另将272例患者样本做常规涂片作为对照组。
1．2不同细胞保存液的成份①号保存液：氯化钠、甲醇、冰乙酸、二硫化碳；②号保存液：甲醇、冰乙酸；③号保存液：二硫化碳、胰蛋酶。
1．3方法将取得的不同细胞样本移入细胞保存液中［宫颈刷片、胸腹水、尿液标本、食管刷片用①号保存液；而对于血液多的再加上②号保存液体（既②+①号）；痰液、食管刷片及宫颈黏液较多的细胞标本另再加用3号保存液（既③+①号）］，利用膜式超薄液基细胞学检测系统制片机制片，分别采用巴氏、伊红染色（H．E）、瑞氏染色（还可以根据需要行特殊染色及免疫组化检查），膜式超薄液基细胞学制片同时，将不同的细胞标本传统方法直接涂片，瑞氏染色，光镜阅片，并将二者制片质量及诊断结果对照。
1．4制片质量判断标准大体观察无黏液、血液成分，图片上细胞均匀分布，细胞视野集中，显微镜下细胞集中、均匀排列，同时必须有诊断性细胞，细胞背景清晰能够发出诊断结果为制片良好，诊断成功；与之相反，若细胞样本制片后完全不能判读或者（和）无诊断性细胞则为判为制片效果差，诊断失败。
1．5统计学处理应用SPSS10．0统计软件包，对资料进行t检验，P＜0．05。
2结果TCT系统制片272例，所制片中均无黏液、血液及其他人为制片干扰，制片质量良好，诊断成功270例（成功率为99．3%）。
而272例常规涂片中，制片质量不良，有的有黏液、血液及其他人为干扰，有诊断意义的细胞很少，诊断成功202例（成功率为74．3%）。
TCT与常规涂片细胞学检查诊断成功率有显著性差异（χ2=74．02，P＜0．05）。
3讨论临床细胞学检查已开展多年对临床的诊断做出了巨大贡献，但常规涂片制片不佳，影响了其诊断率，另一·821·Journal of Clinical and Experimental Medicine Vol．12，No．2Jan．2013方面，如需重新取材，对病人造成了痛苦，延迟了诊断。
而膜式超薄液基细胞学检查应用以来无疑带来了临床细胞学样本制片技术的变革，TCT能够最大限度地保存有意义细胞，消除人为的丢失和破坏；图片更清晰，诊断更准确［4，5］，消除了宫颈血液，黏液以及人工制片过程对细胞的影响；能够检测出宫颈的各种病变，尤其是对宫颈癌前病变及宫颈癌的检测准确率更高［6］；TCT保存液剩余的标本还可以作其他病原体检测，减少不必要的重复取材，减轻了病人的负担。
因此在临床诊断中得到了广泛的应用。
然而不同的临床细胞学样本制作需要不同的细胞学保存液，本研究针对不同的临床细胞样本需要进行了其相应细胞保存液的配制探讨，为不同临床细胞样本制备与保存起到了一定的效果，为临床的诊断成功率不断提高起到了促进作用。
本研究所配制的三种液基薄层细胞学的液基细胞保存液，用于常规的细胞学样本为①号细胞保存液，而对于混有血液较多的细胞学样本在①号基础上加用②号液体（既②+①号），血液多的标本无论是常规还是液基细胞学制片，镜下可见较多的红细胞，背景深染成红色，不利于癌细胞查找，直接影响诊断，而加入②号保存液后，可使红细胞破坏，排除了血液的干扰，细胞背景清晰，诊断细胞集中，有利于成功诊断；而对于黏液较多临床细胞学样本再加用③号细胞保存液，对于黏液标本的处理有较强的作用，特别是宫颈刷片、食管刷片具有针对性，能够去掉黏液的干扰，在临床宫颈及食管刷片的液基细胞学诊断具有十分重要的意义，为各种食管癌的早期诊断及鉴别诊断提供了新途径。
3种不同的细胞保存液在临床细胞学的诊断中应用明显提高了诊断率，本组272例中270例成功诊断（99．3%），另外制片质量优良，清晰，消除了人为的干扰，排除血液，黏液等干扰。
对所取得的细胞样本能够较长期保存，重复制片进行了鉴别诊断，提高了临床细胞学诊断率。
目前，国内开展的液基细胞学检查应用的细胞保存液多采用进口分装，其价格昂贵，成本高，增加了病人的负担，而本研究自行配制的液基细胞保存液可应用于临床不同的细胞样本，取得了较好的诊断效果，且价格低，配制简单，值得广泛推广应用。
参考文献［1］季洪爱，周晓军，吉耘，等．新柏氏液基细胞学检测在非妇科细胞学中的应用［J］．医学研究生学报，2008，21（12）：1341－1342．［2］Lerma E，Quintana MJ，Quilez M，et al．Effectiveness of liquid－based cytology and papanicolaou tests in a low risk population［J］．Acta Cytol，2007，51（3）：399－406．［3］张培谊，邹赛英，王玉兰，等．TCT技术在胸腹水恶性肿瘤诊断中应用［J］．临床与实验病理学杂志，2005，21（3）：357－358．［4］吴慰霖，季洪爱，王靖华，等．液基细胞学在肺肿瘤检查中的探讨［J］．医学研究生学报，2005，18（3）：283－285．［5］Dawson AE．Can we change the way we screen？：the ThinPrep Imaging System［J］．Cancer，2004，102（6）：340－344．［6］王旭波，张培影，徐侠，等．液基细胞学与分子病理学对宫颈癌及癌前病变筛查的意义探讨［J］．辽宁中医杂志，2010，37（3）：387－389．（收稿日期：2012－01－09）·921·临床和实验医学杂志2013年1月第12卷第2期。