术后１周后胆管明显扩张
肝脏
胆囊
胃
术后１周后可见胆囊、胆 囊管及肝总管明显扩张； 皮肤、肝脏明显变黄
胆囊
胆囊管 肝总管
正常组
BDL 组
BDL 组
每个组 4只
正常组 1只 加药组 3只
考核方式 :
1.平时成绩（平时实验操作能力，实验态度，出
勤率 ）3Βιβλιοθήκη %2.实验报告书70%
思考题
?肝纤维化和肝硬化的病理特点？ ?人体肝门部解剖特点？手术时注意事项？ ?人体胆总管与十二指肠的关系？ ?肝外胆汁淤积引起肝损伤的机理？ ?胆漏的原因及临床表现？
? 无色、易挥发、不易燃的液体。具 氯仿的微甜气味。化学性质稳定。
? 分子量153.84，微溶于水，可与乙 醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶。
? 操作注意事项：有毒，加强通风。
CCl4对肝脏损伤机理
CCl4通过肝微粒体细胞色素 P450氧化酶激活后 , 产生自由基 CCl3-及Cl
CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合 ,破坏肝细胞功能
注射CCl4一个月后
正常组
CCL4 组
CCL4 组
结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
切开 皮肤
切开 腹膜
正常人体胆总管解剖
小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管， 两端丝线结扎
切断胆总管、缝合
结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
小白鼠的生物学特性
１）体型小，体重 20-40g ，寿命一般为 2-3年。 ２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感。 ３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿。对温、湿度 变化敏感。 ４）性成熟早，繁殖力强。
小白鼠的捉拿与固定方法
先用右手将鼠尾抓住并提起， 将其旋转数周后放在实验台面 上，在小白鼠向前爬行时用力 向后拉尾，此时用左手的拇指 和食指捏住小白鼠两耳和头颈 部皮肤，然后将鼠置于左手心 中，拉直后肢并用左手无名指 和小指压紧尾巴和后肢，右手 即可作注射、灌胃等实验操作
（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯 、水合氯醛、氯胺酮等
特点： 优点是使用方法简便、麻醉过程平稳， 且一次用药便可维持较长时间等；缺点是动物的苏 醒较慢，麻醉深度和使用量较难控制。
5%水合氯醛，按0.2m1/20g 腹腔注射
麻醉药给药途径
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
肝纤维化、肝硬化
CCl4模型制备过程
?给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最后 一次给药24h之后处死并取材。
?药物剂量：20% CCl4 ? 0.1ml/20g ?特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
实验课要求
1. 进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2. 必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3. 动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4. 取及动物时，注意个人安全。
5.鼠笼及垫料需要 每周更换１－２次 ，用过的鼠笼必
２）口服给药法：灌胃法 ３）其他途径：呼吸道给药
脊髓内给药 直肠内给药
麻醉效果的观察
?呼吸：深慢而平稳 ?反射活动：明显迟钝 ?肌张力：全身肌肉松弛 ?皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失
正确持剪刀法
为拇指和第四指分别插入剪刀柄的两环， 中指放在第 四指环的剪刀柄上， 食指压在轴节处起稳定和向导作 用，有利操作。
正确持镊法
正确持镊是用 拇指 对
食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
缝针
? 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
? 圆针：弧度大者多用于 深 部组织及软组织 。
? 三角针：前半部为三棱形， 较锋利，用于 缝合皮肤、 软骨、韧带等坚韧组织， 损伤性较大 。
常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
腹腔注射方法
? 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手 将注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～ 1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液， 为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹 。
? 可先回抽注射器，确认
无血管或脏器刺破。
? 切勿用力过猛，以免刺
伤内脏器官。
动物术前准备
实验前动物需： 禁食 12-24小时 禁水 4-6小时
以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象
动物实验常用麻醉剂
（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等 特点：a.麻醉量与致死量相差大； b.麻醉深度
易于掌握； c.麻醉后恢复快
? 铲头针：临床较少用。
圆针 铲头针
三角针 直针
器械打结法
肝硬化造模的主要方法
?化学性肝硬化模型 ?结扎胆总管肝硬化模型 ?实验性免疫肝硬化模型 ?血吸虫虫卵所致肝硬化模型 ?转基因肝硬化模型 ?复合法
化学性肝硬化模型
四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachloride
CCl4结构式
须及时清洗干净。
6. 如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂 ,每次实验结束后都要
轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
形态学实验（一）
实验主要内容
?小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ?动物麻醉及正确使用手术器械方法 ?肝硬化模型制备方法 ?解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）