4试剂、仪器
4.1革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血琼脂平板、巧克力平板、沙保罗平板及相关生化试剂等。
4.2恒星BC-60血液细菌培养仪、恒星HX-21细菌鉴定药敏分析仪，成人血培养瓶，厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、恒星细菌鉴定药敏分析试剂板。
4.3接种针、接种环、红外灭菌器、显微镜、电热恒温箱、CO2恒温培养箱、生物安全柜等。
1目的
规范血液及骨髓标本细菌学标准超作规程，确保检验结果准确可靠
2适用范围
血液及骨髓
3标本
3.1标本类型血液及骨髓
3.2标本采集
3.2.1抗菌药物治疗前，发热初期或高峰时抽血。
3.2.2采血频率对怀疑菌血症的成人患者，推荐同时在不同部位采集2~3套（每套包括一瓶厌氧一瓶需氧）对感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集：婴幼儿患者，推荐同时不同部位采集两套，可不做厌氧培养。
3.2.3采血量以无菌方法从患者肘静脉或股动脉采血。采血量以培养基的1/10为宜，成人一次采血10-20mL，儿童为3-5mL.血液抽出后立即以无菌操作注入血培养瓶，充分混匀后送检。
3.2.4骨髓标本用骨髓穿刺针从髂前采集1-2mL，立即以无菌操作注入血培养瓶，由于骨髓标本量少可选择小儿需氧及厌氧瓶。
4.4试剂有效期和使用参照试剂说明书。
5细菌鉴定及药敏质控
参见《微生物组内质量的控制程序》。
6检验步骤
接收标本后，立即对标本进行编号登记。门诊病人登记联系方式
6.1自动化培养
6.1.1置全自动血培养仪中。当标本有细菌生长时，仪器发出阳性报警，应立即用无菌注射器抽取瓶内培养液作直接涂片格兰染色，镜检，将结果向临床医生报告，同时转种血琼脂平板，并进行直接药敏试验，置35℃、5%CO2培养箱培养18-24h。若涂片为酵母样真菌时转接沙保罗培养基。从琼脂平板挑去菌落进行涂片染色及触酶和氧化酶实验。根据初步分出的菌属选不同的鉴定及药敏卡片上机进行细菌鉴定和药敏试验。
8.4传染病（伤寒沙门菌）报院感科及医务科。
8.5传染病菌株保存（伤寒沙门菌）交疾病控制中心复核
9注意事项
9.1抽血后无需更换针头即可注入血瓶
9.2抽血前即应贴好标签，标签不可掩盖培养瓶自身条形码。
9.3若不能立即送检，应置于35℃温箱或室温，绝不可放于冰箱。
9.4自动血培养仪阳性报警时应及时处理。
注：最终结果如与初步报告不符，应及时与临床沟通，并在书面最终Байду номын сангаас告注明变更内容。
8.1.3三级报告报告细菌菌属、药敏试验、结果评价和建议。
8.2阴性结果报告血培养72h未见细菌生长，应通知临床医生，以便作相应处理，但培养瓶要继续培养至第5日，方可发出阴性报告。如发现细菌生长，可补发报告。
8.3对已发出的报告进行销号，并做好菌名或无菌报告日期登记。
3.3标本拒收
3.3.1血培养瓶破裂或明显污染。
3.3.2培养瓶标识与检验申请单不符。
3.3.3用过期培养瓶采集标本，采血量不足等。
3.3.4对不合格标本，应及时通知采集人员重新留取标本。
3.4标本保存
采集标本后立即送检，不能及时送检的可室温放置，切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程应采取一定的保暖措施。
6.1.2仪器培养为阴性，报阴性后卸下血培养瓶，可报告阴性结果。
7操作流程
8结果报告
8.1.1一级报告阳性报警血培养瓶应进行革兰染色，将涂片结果电话（或其他方式）通知临床，同时记录报告日期、时间、内容及接收报告人姓名及工号。血培养阳性应列为危急值。
8.1.2二级报告报告直接药敏试验结果。
直接药敏试验，讲血培养阳性标本进行革兰染色，如涂片找到细菌，根据革兰染色结果选择药敏培养基，去阳性血培养标本约0.2ml用无菌棉签涂布于琼脂表面根据革兰氏染色结果选用抗菌药物纸片，如镜检发现革兰阴性杆菌选择肠杆菌科常用抗生素：若为革兰氏阳性球菌成对排列选择葡萄球菌常用抗生素纸片。然后置于35℃，孵育18-24h读取初步药敏结果。纯培养再进行菌株鉴定和药敏实验，发最终报告。
9.5如不同部位采集的两瓶血培养瓶出现一瓶阴性一瓶阳性，或者两瓶均为阳性，检测结果均为凝固酶阴性葡萄球菌，这两种情况应该临床报告和沟通。
10临床意义