荧光探针概述
为什么用荧光探针 荧光原理及影响因素 重要荧光发色团 荧光探针的类别 ……
为什么用荧光探针？
荧光分析：超敏、快速、 荧光成像：微环境、无 多通道、高通量、安全、 损、高分辨率、原位在 低成本 线
荧光原理
吸收（激发） 内部转换 振动弛豫 荧光发射
系间跨越
磷光发射
荧光：分子接受光能激发后，从第一电子 激发态最低振动能级返回基态时发射出的光。
重要荧光发色团
HO O O
N
O
N
O OH
O OH
N F
B
N F
O
N
O
N
O
O
NH
N+
n
N
重要荧光发色团
趋势：长波长、近红外荧光发色团
Chem. Commun., 2008, 1780.
J. Org. Chem., 2012, 77, 669.
荧光探针的主要类别
应用 生物标记试剂 核酸探针 酶活性探针 亚细胞定位探针 金属离子探针 微环境探针 ……
（Φ测量方法、公式）
荧光强度 FI 正比于ε·φ·I0
ε·φ：内在亮度(intrinsic brightness) （举例）
荧光必要条件：吸收强(ε大)，量子产率高
( φ大 )
荧光影响因素
分子结构 （内因） 共轭体系（芳环、稠环） 刚性共平面性 取代基效应（复杂）
环境因素（外因） 极性 酸碱度 粘度 温度 ……
荧光原理
吸收（激发）光谱 物质呈现颜色为吸收的补色 荧光光谱 荧光颜色 Stokes位移 半峰宽
吸收强度 A = ε·C· L 荧光强度 FI 正比 于ε·φ·I0 I0可以很大，
荧光分析理
荧光量子产率φ
发射荧光的光子数 f 吸收激发光的光子数
原理 化学反应性 电子转移 能量转移 电荷迁移 …… 材料 荧光染料 荧光蛋白 发光配合物 荧光微球 纳米量子点 ……