吉非替尼、厄洛替尼药物检测基因—EGFR（表皮生长因子受体）
EGFR属受体络氨酸激酶家族，通 过激活络氨酸激酶，将信号传导 至胞内。
EGFR在调节肿瘤细胞生长、修复 和转移中起重要作用。
EGFR是肿瘤靶向药物作用的重要 对象。
EGFR络氨酸激酶突变是吉非替尼、厄洛替尼靶向用药的前提
检测靶标
吉非替尼（易瑞沙）、厄洛替尼（特罗凯）药物检测
主要治疗肿瘤疾病分类： ➢ 非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、脑胶质瘤
检测内容： ➢ 非小细胞肺癌：EGFR(Exon18/19/20/21)基因突变 ➢ 乳腺癌： EGFR(Exon18/19/20/21)基因突变 ➢ 胰腺癌： EGFR(Exon18/19/20/21)、K-ras、B-raf基因突变 ➢ 脑胶质瘤： EGFR(Exon18/19/20/21)基因突变 适用标本： ➢ 新鲜肿瘤组织、穿刺样本、蜡块
• 肺癌药物及靶标 • 乳腺癌药物及靶标
……
肺癌药物靶标检测方案
药物名称
顺铂/卡铂
异环磷酰胺
化 依托泊苷 疗 长春瑞滨/长春花碱 药 紫杉醇/多西紫杉醇 物
伊立替康
吉西他滨
培美曲赛
靶 吉非替尼/厄洛替尼
向 药
西妥昔单抗
物 贝伐单抗
靶标
ERCC1，BRCA1，XRCC1，GST CYP2CI9*2，CYP2C9*3 TOPOⅡa，CYP3A4*4，UGT1A1，MDR-1 TUBB3，STMN1 TUBB3，STMN1，CYP2C8*3 UGT1A1*28， UGT1A1*6 RRM1 TS EGFR（Exon18/19/20/21) EGFR，K-ras，B-raf VEGFR
能特异的与EGFR结合，阻断磷酸化作用和与受体相关联激酶的活性， 抑制细胞生长，诱导细胞凋亡。
可形成一种药物-酶-DNA三者之间稳定的可裂性复合物，干扰DNA拓朴 异构酶Ⅱ（DNA TOPOⅡ）致使受损的DNA不能修复。
具有抗肿瘤双重作用，既破坏DNA合成修复，又阻断细胞周期调控。
环磷酰胺/异环磷酰胺 赫赛汀 贝伐单抗 索拉非尼
研究表明： XRCC1编码区Arg194Trp 突变型患者化疗有效率高于野生型 Arg/Arg 3倍。
XRCC1编码区Arg399Gln位点Arg/Arg 基因型患者治疗有效率高于Arg/Gln 或Gln/ Gln2.7倍 。
同时携带突变型194突变型基因和 399野生型患者，化疗效率进一步提 高。
）
检测结果
不突变
突变
临床意义
K-ras基因正常，未引起原发性耐药，药物疗效较好
K-ras基因突变，引起原发性耐药，降低药物疗效
西妥昔单抗药物检测基因—B-raf
B-raf基因为EGFR信号通路中位于K-ras下游的基因，编码 MAPK通路中丝氨酸苏氨酸蛋白激酶，参与细胞周期调控。
检测靶标
B-raf （V600E）
目录
一、肿瘤个体化医疗进展 二、抗肿瘤药物介绍 三、爱轻欣肿瘤药物靶向检测 四、爱轻欣肿瘤疾病分类检测 五、操作流程
• 铂类药物的检测 • 氟尿嘧啶的检测
……
铂类药物的检测
主要治疗肿瘤疾病分类： ➢ 非小细胞肺癌、结直肠癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、卵巢癌、头颈
癌、宫颈癌、前列腺癌、膀胱癌
检测内容： ➢ mRNA表达水平：ERCC1、BRCA1 ➢ 基因多态性分析：XRCC1、GSTP1、MRP2（男性）
TM肿瘤分子靶向用药检测
目录
一、肿瘤个体化医疗进展 二、抗肿瘤药物简介 三、肿瘤药物靶向检测 四、肿瘤疾病分类检测 五、爱轻欣操作流程
目前肿瘤临床用药存在的问题
低毒，低副作用
毒性较强、副作 用明显
接受化疗的肿瘤患者有效率
肿瘤治疗模式的历史演变
局部治疗时代
第一代
化疗时代
个体化治疗时代
第二代
第三代
所有肿瘤细胞均有ERCC1表达， 其表达量直接影响DNA修复的生 理过程。
临床证实ERCC1参与铂类药物化 疗耐药发生。
表达水平低的患者对铂类药物敏 感，反之表达水平高的患者表现 耐药。
检测靶标
ERCC1 mRNA 表达水平
检测结果
高 低
临床意义
DNA切除修复能力增强，药物疗效降低 DNA切除修复能力减弱，药物疗效增强
铂类药物检测基因——BRCA1（乳腺癌易感基因）
首个发现的家族性乳腺癌易感基 因，参与细胞DNA损伤应答。
BRCA1与BRCA2促进DNA重组酶 Rad51亚核装配。
BRCA1能使经顺铂处理后细胞继 续存活。
乳腺癌BRCA1 mRNA检测
检测靶标 检测结果
临床意义
BRCA1 mRNA
高
DNA切除修复能力增强，药物疗效降低
EGFR-Exon 18,19,20,21
检测结果
临床意义
不突变 EGFR基因正常，肿瘤细胞信号正常转导，降低药物疗效
突变 EGFR基因突变，阻断肿瘤细胞信号转导，提高药物疗效
西妥昔单抗(爱必妥)药物检测
主要治疗肿瘤疾病分类：
➢ 结直肠癌、非小细胞肺癌、食管癌、头颈癌、胃肠道肿瘤 检测内容：
➢ 基因突变：K-ras,B-raf ➢ mRNA表达水平：EGFR
K-ras 信号通路
K-ras常发生密码子12、13、61 的突变，其中以12号密码子 GGT→GTT最常见。
NCCN 2010年临床指南中推荐： 在接受西妥昔单抗治疗前， 进 行KRAS基因突变检测，可确定 患者是否适合接受靶向治疗。
结直肠癌 K-ras突变检测
检测靶标
K-ras （第12、13 、61位突变
—— 新英格兰医学杂志.2009.9.v361(10).
对EGFR基因突变阳性的非小细胞肺癌患者，不使用EGFRTKIs类药物简直就是“悲剧”。
——德克萨斯大学安德森癌症中心，2011
2011年 ASCO大会主席George W.Sledge教授指出： 转化医学研究开启了肿瘤个体化诊疗的新纪元！
目录
结直肠癌药物靶标检测方案
药物名称
化 铂类
疗 药
5-Fu/卡培他滨
物 伊立替康
靶 西妥昔单抗
向
药 物
贝伐单抗
靶标 ERCC1，BRCA1，XRCC1，GSTP1，MRP2 TS，OPRT，MTHFR，DPYD，GSTP1 UGT1A1*6，UGT1A1*28 K-ras，B-raf，EGFR VEGFR
转化医学（分子诊断技术）
►2004年 ASCO会议预测：5-10年后进入 “个体化疗”时代 ►2009年ASCO会议倡议：吹响肿瘤个体化医疗的号角 ►2011年ASCO会议：肿瘤“个体化医疗”进入快车道
一项覆盖了9个国家和地区，1217例病人的泛亚洲科 研显示：没有相关的靶标却接受了靶向治疗，死亡风险将 增加185%。
一、肿瘤个体化医疗进展 二、抗肿瘤药物介绍 三、爱轻欣肿瘤药物靶向检测 四、爱轻欣肿瘤疾病分类检测 五、爱轻欣操作流程
药物种类 铂类
氟尿嘧啶类 紫衫醇类 蒽环类
吉非替尼 厄洛替尼 伊马替尼
他莫昔芬 伊立替康
部分抗肿瘤药物
药理作用
引起靶细胞DNA链内与链间交联，阻碍DNA复制与合成，运用于多种肿瘤 。
为双功能烷化剂及细胞周期非特异性药物，与DNA发生交叉联结，抑制 DNA合成，对S期作用最明显。
作用于 HER2的细胞外部位，干扰HER2与ErbB结合，抑制HER2过度表 达肿瘤细胞的增殖。
为抑制肿瘤血管生成类药，与 (VEGF)结合并阻断其生物活性，抑制肿 瘤细胞生长。
同时抑制RAF/MEK/ERK信号通路和VEGFR、PDGFR阻断肿瘤新生血 管生成。
通过抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶而抑制DNA的合成，运用于多种肿瘤。
抗微管药物,通过促进微管蛋白聚合抑制解聚,保持微管蛋白稳定,抑制细胞有 丝分裂。
直接嵌入DNA碱基对之间，干扰转录过程，阻止mRNA的形成，抑制DNA 和RNA的合成,对拓扑异构酶II也有抑制作用，为细胞周期非特异性药物，对 多种移植性肿瘤有效。
表达水平
低
DNA切除修复能力减弱，药物疗效增强
BRCA1 基因突变
突变 未突变
DNA切除修复能力减弱，药物疗效增强 DNA切除修复能力增强，药物疗效降低
铂类药物检测基因——XRCC1（X线交错互补修复基因1）
XRCC1参与DNA损伤的碱基切除修复途 径，参与顺铂或卡铂引起的DNA损伤 修复过程。
与乳腺细胞的雌激素受体结合，不刺激转录作用，对蛋白激酶C有特异性抑 制作用，可抑制依赖雌激素生长的肿瘤细胞。
其活性代谢产物SN-38可抑制多种肿瘤，对拓扑异构酶II也有抑制作用。
药物种类 吉西他滨 西妥昔单抗 依托泊苷 替尼泊苷
药理作用
为细胞周期特异性抗代谢类药物，其代谢产物dFdCDP抑制核糖核苷酸 还原酶，减少DNA合成、修复所需的脱氧核苷酸（dCTP）
适用标本： ➢ 新鲜肿瘤组织、穿刺样本、蜡块
西妥昔单抗药物检测基因—K-ras
K-ras基因属Ras基因家族，正 常时能调控细胞生长路径；异常 时，导致细胞持续生长。
K-ras蛋白是EGFR信号传导中 关键下游调节因子。
研究发现， K-ras基因突变使 结直肠癌患者对西妥昔单抗治疗 产生耐药性。
食管癌药物靶标检测方案
药物名称
铂类 化 疗 5-Fu/卡培他滨 药 物 紫杉醇/多西紫杉醇
伊立替康
靶 伊马替尼（格列卫）
向 药
西妥昔单抗
物 贝伐单抗
靶标 ERCC1，BRCA1，XRCC1，GSTP1，MRP2
TS，OPRT，MTHFR，DPYD，GSTP1 TUBB3，STMN1，CYP2C8*3 UGT1A1*6，UGT1A1*28 C-Kit K-ras，B-raf，EGFR VEGFR