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细胞工程名词解释

1.细胞工程学:细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学方法在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得新的应用性状的细胞系或生物体的有关理论和技术方法的科学.2.外植体:是指用于离体培养的活的植物组织,器官等材料.3.细胞同步化:是指同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期.4.生物反应器:是指由于高等生物细胞批量化培养的装置及其相应的控制系统.5.微繁:离体无性繁殖是在人工控制无菌条件下,使植物在人工培养基上繁殖的技术,是一种微型操作过程,有时称之为微繁.6.早熟萌发:幼胚接种后,离体胚不继续胚性生长,而是在培养基上萌发成幼苗,通常称之为早熟萌发.7.对称融合:两个完整的细胞质体融合.8.非对称融合:利用物理或法学方法使其亲本的核或细胞质失活后再进一步融合.9:体细胞杂交:指两个离体细胞通过一定的诱导技术使质膜接触而融合在一起随后导致两个细胞核融合在一起的技术,植物体细胞杂交是只除细胞壁后的原生质体融合.10.人工种子:具有良好发育的体细胞胚并能发育成正常完整植株;具有人工胚乳可提供种胚发育的营养;具有能起到保护作用的人工种皮。

类型:裸露的或休眠的繁殖体;人工种皮包被的繁殖体;水凝胶包被的繁殖体。

人工种皮的要求:具有一定的封闭性,保证人工胚乳的各种成分不易流失,同时又具有良好的透气性,保持繁殖体生理活性;具有一定的坚硬度,以加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作;无毒无害,能保证繁殖体顺利穿透发芽;配制简单易行,成本低。

11.体细胞无性系:Larkin和Scoworoft(1989)提出把任何形式的细胞培养所形成的植株统称为细胞无性系.12.细胞全能性:一个细胞所具有的产生完整植株的能力,称之为植物细胞的全能性.13:脱分化:离体培养条件下,使一个已经分化的细胞恢复到原始无分化状态的过程就是细胞脱分化.14:器官发生:植物的离体器官发生是指在培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根,不定芽的过程.15:细胞悬浮培养:是指将单个游离的细胞或细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术.16.原生质体:指除去细胞壁后的细胞,是一个被质膜包裹的裸露细胞.17.干细胞:细胞在分化过程中往往由于高度分化而完全失去了再分裂的能力,最终衰老死亡,机体在发展适应过程中为补充不足,保留了一部分未分化的原始细胞称之为干细胞. 18.胚性细胞:分化程度不高,具备发育为胚胎或植株的全能性细胞.19.体细胞胚:离体条件下没有经过受精过程,但经过胚胎发育过程所形成的胚的类似物,统称为体细胞胚.20.2,4-D:2,4-二氯苯氧乙酸,生长素的一种,启动愈伤组织形成.21.ZT:玉米素,分裂素的一种,为天然物.22.2-ip:异戊烯腺嘌呤,诱导木本植物芽的萌动,诱导离体细胞增殖不定芽.23.BA:6-苄基氨基嘌呤24.CH:水解酪蛋白,成分:水解氨基酸,后期发生体胚诱导.25.L-H:水解乳蛋白,(诱导愈伤)26.GA:赤霉素,可促进细胞的伸展和茎叶的伸长,长日照植物提前开花,促进果实发育,诱导单性生殖,并且在禾谷类种子萌发中起作用.27.VPP:烟酸或N ick酸,可促进新陈代谢和胚胎发育,高浓度具有抑制,常用量为0.5mg/L.28.V-B6:对根的生长具有促进作用.29.PEG:聚乙二醇,用于诱导体细胞融合.30.DMSO:二甲基亚枫,冻剂.31.FDA:荧光素双醋酸酯盐,活体染色,荧光素在原生质中呈G 光.32非胚性细胞:高度分化或特化的细胞,已经失去分裂和再分化的能力,即使在培养的条件下也不能发育成植株。

33遗传稳定性:离体培养的细胞学基础是有丝分裂,有丝分裂的DNA半保留复制和染色体的均等分裂机制,从理论上保证离体培养物在一定情况下的遗传稳定性。

1.体细胞工程的核酸技术是无菌操作2.细胞全能性通过细胞周期,细胞脱分化和细胞再分化实现的3.GA用于组培中菌体芽的萌动和伸长4.肌醇用量在维生素最高,一般为100MG/L,对细胞形成和愈伤组织增殖有作用5.培养基中常用来解除毒害的是活性碳6.用HCL,KOH调节培养基的碳酸度7.培养基中必须要有一定量的有机菌,方可用与体细胞胚的培养8.细胞工程实验包括准备室,接种室,培养室9.可利用细胞工程的遗传性可以进行植物的快速繁殖,补充植物种质资源和生产有用化合物,利用其变异性,我们还可进行体细胞杂交10.根据在培养中所取的外植物体的部位不同,植物胚胎培养包括胚培养,胚乳培养,胚曩培养,子房培养11.一个成功的悬浮装置,必须满足三大条件,悬浮物分散性很好,细胞团狭小,均一性好,细胞形状和细胞团大小大致相同12.常用植物反应器有搅拌式,气生式.固定式反应器13.原生质体分离常用酶14.同种细胞核,异种细胞质或共质体具有一个亲本的细胞和两个亲本的细胞分离是利用比里原理15.铬酸洗液是用浓硫酸和重铬酸钾配制而成.16.1902年,haberlang提出细胞全能性.17.细胞脱分化的特点是液泡蛋白体出现和质体消失.18.器官发生所经过的三个阶段:第一阶段:外植体诱导形成愈伤组织,第二阶段:生长中心形成,第三阶段:器官原基形成.19.辐射能较大的射线,诱导材料器官组织,较小的射线诱导细胞.20.花药培养属器官培养,花粉培养属细胞培养范畴.21.在培养基中加入秋水仙素,可使单细胞变成二倍体,具体方法有(1)花药离体培养(2)培养植株系用秋水仙素处理,或在花粉细胞形成前的小孢子母细胞,可用秋水仙素处理.22.胚乳培养的目的是获得三倍体.23.适合建立悬浮液的愈伤组织应是松散,生长快,其外观一般是色泽鲜艳,乳白色或淡黄色,呈细小颗粒状,疏松易碎. 24.细胞同步化是指悬浮培养的细胞都同时通过某一特定时期,当细胞处于饥饿时通常获得G1,G2期的细胞同步化,当细胞处于N饥饿时,则获得G1期的细胞同步化.25.成批培养是指在一个培养体积中,接种细胞和添加培养基后,中途不添加培养基也不更换培养基的方法.1.激素在细胞分化中的调控作用.共有五种激素,AUX,CTK,GA,ETH,ABA在细胞分化中的调控作用:(1)AUX:包括IAA,IBA,2,4-D,NAA等,作用:促进离体细胞分裂形成愈伤组织,或者诱导试管苗生根.IAA/IBA是生根剂的主要成分.(2)CTK:包括KT,BA,ZT,2-ip等,作用:参与细胞分裂和器官分化,打破芽的休眠,打破顶端优势,推迟叶片老化,增加酶活性,促进物质运输,提高机体通透性,离体培养时诱导离体培养的芽形成丛生芽,诱导离体组织的细胞增殖,并再生不定芽.其中,ZT为天然形成,2-ip为诱导木本植物再生芽.(3)GA:40多种,常用GA3,作用:促进细胞的伸展和茎叶的伸长,长日照植物提前开花,促进果实发育,诱导单性结实,并且在禾谷类种子萌发中起作用.(4)ETH:PH类与Eth竞争前体,作用;加速果实成熟和老化,对组织的生长,胚胎发生和芽的形成有抑制作用,如何抑制:降低蔗糖浓度或者用葡萄糖代替,加入5-15ml/L的AgNo3可抑制培养物形成乙烯.(5)ABA:在研究桦树芽的休眠和棉花叶的脱落中发现.作用:促进芽和种子进入休眠状态和促进某些短日照植物开花,可用于抑制胚胎过早萌发,使胚胎形成形态正常的植株.2.影响体细胞遗传与变异的因素.影响体细胞遗传与变异的因素有以下几点:A.外植株:1外植株的来源:1自然环境下的植物园2人工控制温度下的植物3无菌室内植物园 2外植株取材:取材部位的树龄,一般以繁殖器官作为外植体3外植体的灭菌过程。

B.激素:(1)生长素:促进离体细胞分裂形成愈伤组织,促进生根(2)分裂素:促进离体细胞分裂和器官分化,再生不定芽(3)青霉素:促进叶伸长和伸展,促进果实发育单性繁殖(4)乙烯:促进器官老化脱落(5)脱落酸:促进芽和种进入休眠状态,打破胚胎过早萌发.C.渗透压:渗透压高低也影响体细胞遗传和变异,低渗较高渗都会产生变异.D.继代次数:一般说来,继代次数越多,则产生的变异的可能性越高3.体细胞胚的结构和发育特点A .体细胞胚的结构特点.1)与器官发生比较:体细胞胚具独立性,器官发生不具独立性别体细胞胚呈V型维管束,器官发生V型维管束不完整(2)与合子胚比较:一般没有真正的胚柄,只有类似胚柄的结构调整子叶常不规范化体积明显小于合子胚,在一些贮藏物质的含量上也存在较大差异,并且体细胞胚不能有明显的脱水干燥过程.没有明显的休眠期,一般在心形期以后的各个阶段均可直接发育成小植株(早熟萌发)B.体细胞胚的发育特点(1)体细胞是离体培养的产物,只限于离体培养范围使用,以区别于无融合繁殖胚(2)体细胞胚起源于非合子细胞,以区别于合子胚(3)体细胞胚经过了胚胎发育过程,以区别于离体培养中器官发生的过程(4)类似于植物合子胚的发育,胚胎细胞发生--早期胚发生--球形胚形成--完整胚结构形成(5)类似于动物胚早期的发育.4.植物脱病毒技术的基本原理.A.茎尖脱毒基本原理:(1)病毒在植物体内分布具有不均匀性,能量竞争,传导抑制,激素抑制,酶抑制,抑制因子.能量竞争:病毒和植物细胞分裂因DNA合成均匀需要消耗大量能量,而分生组织本身细胞活跃,其DNA合成是自我提供能量自我复制,而病毒核酸的合成需植物提供能量来自我复制,因而得不到足够能量,从而就抑制了病毒核酸合成.传导抑制:病毒在植物体内传播是通过维管束实现的,但在分生组织中,维管束还不完全,从而抑制了病毒向分生组织的传导.激素一直:在分生组织中,生长素和细胞分裂素水平都很高,因而阻滞了病毒的侵入或者抑制病毒的合成.酶缺乏:1969年, Stace-smith提出,可能病毒的合成需要的酶分子在分生组织中缺乏或还没建立,因而病毒无法在分生组织中复制.抑制因子:1976年,Matin-tangcey等提出了抑制因子假说,认为在分生组织中存在某种抑制因子B.高温和低温脱毒技术原理:分裂和病毒繁殖互相存在竞争,在激烈分裂的细胞中正常核蛋白的合成占优势,而在细胞伸长期间病毒核蛋白合成占优势,加速分生组织细胞分裂,能够获得无病毒植株C.微体嫁接离体培养脱毒法:方法原理见<1> 5.什么是玻璃化冻存方法?答:A,玻璃化是指液体转变为非晶体的固化过程。

B,使溶液玻璃化有两条途径:一是极大地提高冷却速率,二是增加溶液浓度,(当抗冷冻剂,如甘油,KMSO,丙二醇等浓度为40~60%W/V)时易形成玻璃态。

C,玻璃化法:是将生物材料经极高的玻璃化液体,快速脱水后直接投入液氨,发生重排,不形成水晶,也不产生结构和体积的变化,因而不会对材料造成伤害,终止保存,复温时要快速化冻,防止去玻璃化发生,材料能安全度过冷却和化冷两个关口,就可以保证冻存的成功D,包埋玻璃化法:是包埋脱水法和玻璃化法的结合,保存材料用藻酸钙处理包埋,然后经蔗糖浓度梯度脱水和玻璃化溶液处理后直接侵入液氮保存,其材料存活率要比用包埋-脱水法要高,可能是用藻酸钙包埋后,减轻了玻璃化溶液瓣毒性。

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