甘油化时滴速对冰冻解冻去甘油红细胞质量影响
【摘要】目的对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞方法进行探索，并对其质量进行分析评价。

方法随机抽取本站红细胞悬液4℃保存9 d以内20u，随机分成甲组10u，加甘油速度40滴/分和乙组10U加甘油速度120滴/min，分别进行甘油化，-80℃冰冻及用ACP215全自动血细胞处理仪解冻。

甘油化处理，进行质量检测：甲组游离血红蛋白（0.14±0.05）g/L；乙组游离血红蛋白（1.01±0.02）g/L，两组差异有统计学意义，（P＜0.01），甲乙两组其他指标符合国家标准，差异均无统计学意义。

结论本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法高效高质，值得推广。

【关键词】冰冻红细胞；冰冻解冻去甘油红细胞；全自动血细胞处理仪
成分输血在我国已经广泛开展，其中Rh（D）阴性血的用量逐年增加，Rh （D）阴性血比例在我国汉族人群仅占（0.3～0.5%）[1]，超低温甘油化冰冻保存红细胞作为血站平时贮备，一旦临床急需可立即进行解冻洗涤，即极大方便了临床用血，又保证抢救生命时间，而甘油化制备冰冻解冻红细胞是长期保存Rh（D）阴性血最理想方法，作者按加甘油时不同滴速分成甲、乙两组，检测洗涤后质控指标，对冰冻解冻去甘油红细胞制备方法进行探索，并对其质量进行评价。

1 材料与方法
1. 1 试剂与耗材复方甘油试剂（北京博德桑特）、三珠袋（北京博德桑特）、ACP215红细胞洗涤耗材（美国血技）、9%氯化钠（北京博德桑特）、0.9%氯化钠（山东威高）、输血器（江西洪达）、贺利氏6000I离心机（德国）、三洋-80℃速冻冰箱（MDF-U32V型、日本）、调速多用振荡器（HY-4型、金坛市）、电热恒温水浴箱（HHW21-600型、天津）、无菌接驳机（SC-201型、日本）、钨酸钠（天津化学试剂四厂）、氢氧化钠（天津博迪化工）、乙二醇（天津富宇精细化工）、无水乙醇（沈阳华东试剂厂）、稀释液（希森美康医用电子有限公司）、酚酞（沈阳华东试剂厂）、高碘酸钠（天津福晨化学试剂厂）、血浆游离血红蛋白试剂盒（北京瑞尔达生物科技）、溶血剂（希森美康医用电子有限公司）。

1. 2 取样用本站检测红细胞悬液4℃保存9 d以内20 U，随机分成甲组10 U，乙组10 U。

1. 3 冰冻红细胞制备取9 d内红细胞悬液各20 U，经2200转，25 min 离心后，分出上清，转移至三珠袋，通过无菌接驳机与输血器相连接，加入57%复方甘油溶液，振荡器60次/min，（甲组滴速40滴/min，加5min后静止5min再继续加入，仍是40滴/min，至加甘油完毕；乙组滴速120滴/min，匀速加完，不需静止）排尽空气，室温平衡放置30min，纸盒装入后放在-80℃保存一个月后待用。

1. 4 冰冻解冻去甘油红细胞制备保存一个月后，冰冻红细胞从-80℃冰箱取出立即放入37～42℃恒温水浴箱中溶化，4～6 min/（袋·U），启动ACP215全自动血细胞处理仪，应用去甘油化程序洗涤，用9%氯化钠80ml、0.9%生理盐水2000 ml，解冻洗涤过程大约60 min。

1. 5 质量标准红细胞回收率≥80%，白细胞残留率≤1%，血小板残留率≤1%，甘油含量＜10g/L，血浆游离血红蛋白含量≤1g/L，体外溶血≤50%。

1. 6 统计学方法计数资料以（x±s）表示，两组采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

见表1。

2 结果
3 讨论
冰冻解冻去甘油红细胞在制备过程中，冰冻红细胞制备是质量的前提，冰冻与解冻洗涤过程操作必须严格按照操作规程进行，减少红细胞损失[2]。

甘油的加入能使红细胞膜受到很大冲击，渗透压逐步达到平衡很重要，如果在加入甘油时先40滴/分，加5 min后静止5 min再继续加入40滴/min，使红细胞膜渗透压能得到很好的平衡，甲组以可间歇再加入方式每次为40滴/min，是本站经过实践检验后确立的操作方法；乙组为设立对照组加入甘油滴速120滴/min，其余条件相同，甲组游离血红蛋白（g/L）为0.14±0.05，乙组游离血红蛋白为（1.02±0.04）g/L，两组差异具有统计学意义，（P＜0.01），实验证明，过快的加入甘油，使红细胞膜受到强烈刺激，血与甘油混合后渗透压得不到很快平衡，很容易产生溶血，使血液制备质量得不到保证，所以作者认为加甘油时滴速的保证起到关键作用。

参考文献
[1] 邱艳.全血成分血质量要求与血液标准化.北京：中国标准出版社，2002.
[2] 安万新，于卫建.输血技术学.北京：科学技术文献出版社，2010：152.。