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缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型详细步骤及说明

缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型详细步骤及说明原型物种人
来源低氧导致的脑损伤
模式动物品系SPF级Balb/c 小鼠,雄性,6~8周
实验分组随机分组:对照组,模型组,阳性药物组和药物组,每组15只实验周期4~6w
建模方法将实验动物置于可视恒压舱内,并持续注入流量为5L/min的低氧气体(8%O2及92%N2),每次90min。

每周干预1~3次,干预周期为3周。

应用疾病模型
模型评价
Morris水迷宫实验所有组别,于12周龄时,进行Morris水迷宫试验,试验分为定位航行实验和空间探索实验。

1. 定位航行实验:小鼠连续接受5天的训练,每天4次,每次时间间隔
30min,记录下小鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间,即逃避潜伏期。

4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果进入到最后统计。

2. 空间探索实验:实验的第6天,撤去平台,从距离平台的最远端入水后,将小鼠放入水中,记录下30s内小鼠的游泳轨迹,并观察分析小鼠在目标象限的停留时间,以及它的穿越平台的次数。

行为学结束后,将各组小鼠摘取全脑,冰上剥去小脑,放入4%多聚甲醛中固定,用于病理学检测。

1. 免疫组化染色
观察海马区和皮层去Aβ淀粉样斑块染色情况。

光学显微镜下,计数6个视野下每组小鼠同一部位的阳性斑块数量,作统计分析。

2. Thiolain S染色
石蜡白片用Tholain S荧光染料染色,染色检测海马区以及皮层区Aβ淀粉样斑块(绿色荧光)的表达。

荧光显微镜下,计数6个视野下每组小鼠同一部位的阳性斑块数量,作统计分析。

应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显著差异。

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