杀菌剂的毒力测定和.
抑制百分率=50%,机率值=5
将 5 代入回归方程,然后求其反对数,即
LD-P-Line(剂量对数---机率值直线)。
ED50 可以作为多种药剂对同一病菌等效剂 量的毒力比较,在一定的范围内可以用它来 衡量一种药剂对病原菌毒力的大小,但不能 做为田间防治的实际指标。
三、田间试验
室内筛选的药剂必须进行田间试验,通
少氧而受影响。
(2)抑菌圈法
广泛地应用于真菌细菌的杀菌剂筛选,基本原理
是将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀
冷凝后,在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度 药剂的圆形滤纸片(直径6mm)左右,或放特制的直 径 8mm 高 10mm 的不锈钢环,将配好的药液定量加 在 钢环内,经定温培养一定时间后,由于药剂的扩 散 作用,使病菌生长受到抑制,即形成“抑菌圈”。 测量抑菌圈的大小,以比较杀菌剂的毒力。
丝生长、变色、变形等指标作为毒力衡量的标准。
但近代随着新型内吸杀菌剂的发展,对杀菌剂的生物筛选
逐渐由经典的离体筛选趋向活体筛选。 因为它不仅模拟田间实际,同时可以防止那些在离体平板 上无效,而必须在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。 但活体筛选涉及的因素较多,对寄主植物、试验条件要求
较高,如光照、湿度、温度,为控制病原菌与寄主相互作用的
条件,必须有适合的温室,费工耗资都较大。 离体测定能反映化合物毒力的本质和程度,方法简便,为 研制新农药不可缺少,但它存在有一点缺点,应该和温室活体 的盆栽试验结合起来。
1.毒力测定的方法
室内离体平板法:
(1)孢子萌发测定法 (2)抑菌圈法
(3)生长速率测定法
(1)孢子萌发测定法
有载玻片萌发法及平板培养基培养法。 即将不同的药液喷布于玻片表面或平板上,定量
持效期的试验:
以上各种方法,用先喷药后接菌或先接菌后喷药,间隔不
同日期进行处理,可以测定杀菌剂残效。
剪叶法分级标准:
0 级(不发病); 1 级(<剩余叶面 1/4 ); 2 级(剩余叶面
1/4-1/2);3级(>剩余叶面1/2);4级(全部发病)。
二、有效中量的测定
采用一系列的药剂剂量或浓度,每一剂 量或浓度可以得出一个相应的孢子抑制百分 率,得到两组数据,然后把各剂量换算成对 数值,将抑制百分率换算成几率值,将换算 后的 5 对数据建立回归方程,在直坐标系 中画出回归直线,此直线称为剂量对数--抑制百分率几率值直线(ED-P-line直线)。
过试验确定其药效的好坏,经济效益的高低,
也就是说,田间试验是确定一种药剂在生产 上有无实用价值的主要方法。 田间实验的具体方法可参考《农药药效 试验的设计与分析》一书,防治效果可用以 下公式计算。
(2)治疗作用:
测定方法是先在植株上接菌,保温,保 湿一定时间,待病菌菌丝侵入或始见发病, 再进行喷药处理,其他调查统计方法同上。
(3)内吸作用:
测定根的内吸输导试验,可以采用水培的稻株或棉株,在营 养液中加定量的药剂,待 24h 或 48h 后进行接菌,发病后调查,
若以土培盆栽方法,则药液定量灌入土中,程序与上相同。
组合法,根据杀菌剂物不同作用机理,有测定 以下作用的方法。 (1)保护作用;(2)治疗作用; (3)内吸作用。
(1)保护作用:
一般经定量喷雾法处理供试植物,喷药后间隔 一定的时间再接种(方法很多,如多针接种,剪叶
法或将菌丝块贴在叶片上等),保持发病所需的温、
湿度条件,发病后再按病情分级标准进行统计,以 病叶率,病情指数增长等指标判断药效。
滴加孢子悬浮液,药液与悬浮液接触后,经一定培育
时间,镜检孢子萌发的百分率,载玻片法适合于水溶 性较好的保护剂,能计算单位面积药液的沉积量及药 液浓度,接近实际条件,但对萌发时需氧较多的病原 菌不适用。
平板萌发适用于不易分解的保护剂,根据测定对
象生长需要的配方来制备合适的培养基,由于孢子在 培养基的表面能得到较充足的空气,萌发时不致因缺
第三节 杀菌剂的毒力测定和
田间药效试验
一、毒力测定
杀菌剂对病菌的毒力是指药剂本身对病原菌直
接作用的性质和程度,它是在严格控制条件下测定
的,常用有效中量(ED50)表示,是指抑制50%病菌
孢子萌发所需的剂量或有效中浓度(EC50)。
杀菌剂的毒力测定方法很多,长期采用经典的
离体平板法,即以孢子萌发,抑制孢子发芽率或菌
一,活性效应显现较快,缺点是有时与活体测
定结果不一致,有时会漏筛或误筛,如用粉锈
宁处理大麦白粉病菌,离体测定不仅分生孢子
能萌发且能形成吸器,但此药在活体上却表现
高效。所以初筛手段不采用平板法,采用盆栽
法,即病原---寄主植物组合法。
2.盆栽方法
在温室内进行的,具体方法随各种不同病害
而异,例:小麦赤霉ห้องสมุดไป่ตู้采用分生孢子 --- 幼苗
(3)生长速率测定法
即在琼脂培养基中加入药液,冷凝后接
菌的方法,用木塞钻孔器切取正常培养基上
的供试菌丝体,放在平板上(也称菌碟),
经一定时间后观察测量菌落生长速率,一定
时间菌落直径的长度与对照组比较,求出抑
制百分率,绘浓度对数 --- 抑制百分率毒力
曲线图,以ED50来比较毒力程度。
平板测定是室内杀菌剂活性测定最常用的 方法,优点是条件比较一致,影响因子比较单