・　１３３２・　国际检验医学杂志２０１０年１１月第３１卷第１１期Ｉｎｔ　Ｊ　ＬａｂＭｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１０，Ｗｏ１．３１，Ｎｏ．１１　甚至可使检测结果小于０．０１　ｎｇ／ｍＬ。当ＴＢＩＬ￣１７２“ｍｏｌ／Ｌ　时对测定无干扰，当ＴＢＩＬ＞￣２０６　Ｆｍｏｌ／Ｌ时，可对结果产生正　干扰。　５．回收试验　分析样本１和２的回收率分别为１０４．　１　和１０１．６　（平均１０２．９Ｖ００）。　

讨　论　ｃＴｎＩ已被临床广泛应用于急性冠脉综合征（ＡＣＳ）的诊　断，ＡＭＩ危险性评估和预后判断等方面，在心脏疾病的诊断与　治疗中发挥着越来越重要的作用　］。　ＩＴＬ脸测ｃＴｎＩ的原理是将ｃＴｎＩ特异抗体结合于胶乳颗　粒表面，标本与胶乳试剂在缓冲液中混合，标本中的ｃＴｎＩ与胶　乳颗粒表面的抗体结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，溶液浊　度增加的程度与标本中的ｃＴｎＩ含量正相关。分析性能评价表　明其总的不精密度小于１Ｏ　，线性达０．７５～２５　ｎｇ／ｍＬ，比例　误差为２．９　，与其他文献报道相似［４　］。其生物检测限达０．　７５　ｎｇ／ｍＬ，说明该试剂受方法学及抗体浓度、包被胶乳颗粒等　因素的限制，检测灵敏度较其他方法差，但其值尚在ＡＣＳ阴性　检测范围内，不会影响对心梗的诊断。本试验的干扰因素也不　容忽视，严重黄疸和溶血对试验有正干扰，而脂血对试验有负　干扰，与其他文献报道不一致　＿６］，可能与检测所用仪器及参数　设置有关；另外类风湿因子及异嗜性抗体对该法检测ｃＴｎＩ的　正干扰，也是我们在检测过程中偶尔遇到的实际问题，可通过　重复检测或同时检测肌红蛋白来加以判断与鉴别。　综上所述，ＩＴＬ检测血清中ｃＴｎＩ尽管影响其结果的因素　确实存在，但只要做好质量控制，尽量避免检测严重溶血、严重　黄疸及脂血的标本，注意可引起心肌轻微损伤的多种非心源性　疾病及非特异性因素，对于ｃＴｎＩ轻度升高的患者多进行动态　观察，该法作为基层医院定量检测ｃＴｎＩ，以判断ＡＭＩ的发生、　发展及其严重程度，监测治疗效果等，不失为一种经济、有效、　简单可行的方法。　参考文献　［１］冯仁丰．临床检验质量管理技术基础［Ｍ］．２版．上海：上　海科学技术出版社，２００７：１１１－ｌｌ９．　［２］Ｒａｖｋｉｄｅ　Ｊ，Ｈｏｒｄｅｒ　Ｍ，Ｃ，ｅｈａｒｄｔ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　ｐｅｒ—　ｆｏｒｍａｎｃｅ　ａｎｄ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒｏｐｅｎｉｎ　Ｔ　ｉｎ　ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ　ａｃｕｔｅ　ｍｙｏｃａｒｄｉａ１ｉｄａｒｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｃａｎｄ　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｌａｂ　Ｉｎｖｅｓｔ，２００７，５３（８）：６７７—６８５．　Ｅ３］潘柏申．心肌标志物的临床应用［Ｊ］．中华检验医学杂志，　２００５，２８（３）：１２４—１２６．　Ｅ４］鄢盛凯．重视心肌标志物在急性冠状动脉综合征中的应　用［Ｊ］．国外医学临床生物化学与检验学分册，２００３，２４　（５）：２４９—２５１．　Ｅｓ］钟利英，杨贺，王彦，等．胶乳增强免疫比浊定量测定血清　肌钙蛋白的方法学评价Ｉ－Ｊ］．中华误诊学杂志，２００８，１，８　（３）：５２８—５２９．　［６］宋丽芳，张理华．胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白Ｉ　ＥＪ］．实用医技杂志，２００７，７，１４（２１）：２８３６—２６３７．　

（本文责任编辑王东　收稿日期：２００９—０６—０１）　・新技术、试剂与设备・　离子色谱脉冲安培法检测尿碘方法的建立及影响因素探讨　

杨平玲，刘西林，刘兴颖　（山东省日照市东港区人民医院　２７６８００）　

【关键词】色谱法，离子交换；　尿；碘；实验室技术和方法　Ｄ０Ｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１０．１１．０６６　中图分类号：Ｒ４４６．１２２　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７３—４１３０（２０１０）１ｌ一１３３２—０３　

目前常用的尿碘检测方法是砷铈催化分光光度法，但该方　法操作复杂、费时、试剂有毒且检测结果容易出现偏差　。”］。色　谱法由于具有相比于传统比色法更强的抗干扰性和灵敏度而　在临床检验中得到越来越多的应用　］。对于尿碘的测定，离子　色谱法具有操作简单快速、结果稳定、灵敏度高、对操作者健康　和环境无害等优点。离子色谱安培检测法检测尿碘，一般选用　ＩｏｎＰａｃ　ＡＳ１２Ａ分离柱　４］，也有报道选用ＩｏｎＰａｃ　ＡＳ７分离柱和　ＩｏｎＰａｃ　ＡＧ７保护柱　，都得到比较好的分离效果。碘离子是　一种常见的疏水性离子，若选择亲水性的分离柱，可以保证碘　离子的较快洗脱，节省分析所需时间。直流安培存在电极逐渐　污染而灵敏度降低的现象，而采用脉冲安培检测法（ＰＡＤ）则可　不断活化电极表面，以保证稳定的灵敏度ｌ６］。本研究采用强亲　水性色谱柱ＩｏｎＰａｃ　ＡＳ１６分离柱和ＩｏｎＰａｃ　ＡＧ１６保护柱，建立　离子色谱脉冲安培法检测尿碘，同时对影响因素进行探讨，并　成功应用于本地区孕妇尿碘的临床检测。　

材料与方法　１．仪器与试剂　ＩＣＳ－９００型离子色谱仪（美国戴安公　司），配备ＥＤ５ＯＡ电化学检测器（美国戴安公司），包含有银工　作电极，ｐＨ／银／氯化银复合参比电极和钛对电极。国家标准　溶液研究中心提供的碘离子标准溶液，编号ＧＳＢ０５—１１３７—　１９９９。　２．标准溶液与淋洗液的配制　用购置于国家标准溶液　研究中心碘离子溶液１　０００　ｍｇ／Ｌ，用去离子水稀释成５Ｏ、１００、　２００、３００、５００“ｇ／Ｌ标准溶液。２００　ｍｍｏｌ／Ｌ硝酸淋洗液配制：　用移液管准确移取浓硝酸２Ｏ．００　ｍＬ，加入到已放有一定量去　离子水的２　Ｌ淋洗液瓶中，用去离子水定容到１．５　Ｌ。　３．色谱条件　分析柱：ＩｏｎＰａｃ　ＡＳ１６（４　ｍｍ×２５０　ｒａｍ）；　保护柱：ＩｏｎＰａｃ　ＡＧ１６（４　ｍｍＸ　５０　ｍｍ）；ＥＤ　５０Ａ脉冲安培检　测器，银工作电极，Ａｇ／ＡｇＣ１参比电极模式，脉冲安培三电位　国际检验医学杂志２０１０年１１月第３１卷第ｌ１期Ｉｎｔ　Ｊ　ＬａｂＭｅｄ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．１１　波形检测，见表１。　表１碘离子测定的三电位波形　

注：“一”表示无数据或无操作。　淋洗液：２００　ｍｍｏｌ／Ｌ硝酸，等度淋洗；流速：１．００　ｒｎＬ／　ｍｉｎ；进样方式：手动进样；进样体积：２５　Ｌ；柱温：３ｏ℃。　４．样品的前处理　留取清晨空腹中段尿液５　ｍＬ，置于　密闭洁净试管中，离心取上清尿液稀释３倍，经０．２２　ｍ滤膜　和Ｃ１８固相萃取小柱去掉颗粒物和大分子有机物，弃去初滤　液３　ｍＬ，后续滤液接出直接进样分析。　５．离子色谱脉冲安培法测定尿碘的方法学评价　１）线　性范围与灵敏度分析：用配制的标准溶液进行检测，测定结果　采用峰面积记录，制备标准曲线，确定回归方程，计算检测线性　范围。当以信噪比（Ｓ／Ｎ）等于３为最低检测限时，本法测定尿　碘的最低浓度即为检测灵敏度。２）精密度分析：分别取高、中、　低３种浓度的标本进行５次平行测定，计算不同浓度标本检测　结果的变异系数（ＣＶ）。３）加标回收率分析：分别取高、中、低　３种浓度的标本，每份４．５　ｍＬ，加入配制的已知碘浓度（５　ｒａｇ／　Ｌ）标准溶液４５　Ｌ，混匀，每份加标尿样进行３次重复测定，所　得结果取平均值，计算回收率，为减少因加标所造成的尿样总　体积的变化，控制加标体积小于尿样体积的１．０　。４）对比试　验：以国际标准方法砷一铈催化分光光度计法和离子色谱脉冲　安培法重复检测同１份尿液标本，各检测７次；对２种方法检　测结果进行统计学比较分析。　６．影响因素分析　１）标本放置时间对结果的影响：取　高、中、低３种浓度尿液样品（浓度分别为５１０．７、２４５．６和５Ｏ．２　￣ｇ／Ｌ），２～８℃条件下密闭、避光冷藏。以离子色谱脉冲安培　法每天测定不同浓度样品各１次，连续测定７　ｄ。计算不同浓　度样品检测结果的变异系数。２）前处理方式的影响：取同１份　尿液标本，分别用Ｃ１８固相萃取小柱和ＲＰ固相萃取小柱去除　尿液标本中存在的可能污染色谱柱的有机物。先后使用５　ｍＬ　甲醇和１０　ｍＬ超纯水灌注上述２种种萃取小柱，平放２０　ｍｉｎ　以上以充分活化固相萃取小柱；分别取５　ｍＬ稀释的标本通过　Ｏ．２２　ｍ滤膜和固相萃取小柱，弃去初始流出液３　ｍＬ，接取约　２　ｍＬ流出的标本直接进样分析。同１份标本用不同的柱前处　理，分别重复７次，计算检测结果平均值、标准差和ＣＶ，并比较　不同前处理方式检测结果均值的差异。　７．临床标本检测　妊娠组为７３３例２００８年ｌＯ月至　２００９年１Ｏ月间在本院进行孕期检查的妊娠期妇女，年龄２２～　４Ｏ岁，平均年龄２８．５岁，其中早孕（１～１３周）１５８例，中孕（１３　～２８周）３７６例，晚孕（２４～４Ｏ周）３３９例。对照组为１３８例未　孕妇女，年龄２０￣４０岁，平均年龄２９．５岁。留取妊娠组及对　照组研究对象晨尿标本，以离子色谱脉冲安培法测定尿碘　浓度。　８．统计学处理　ＳＰＳＳ１１．０软件和ｔ检验。　结　果　・　１３３３・　１．离子色谱脉冲安培法测定尿碘的方法学评价　１）线　性范围与灵敏度分析：色谱面积（Ｙ）与进样浓度（Ｘ）呈正相关　线性关系，拟合标准曲线，回归方程为ｙ一０．００４　８ｘ一０．０９１，ｒ　一０．９９９　８，尿碘浓度在５Ｏ～５００　ｇ／Ｌ之间具有良好的线性结　果；当以Ｓ／Ｎ一３为最低检测限时，离子色谱脉冲安培法测定　尿碘的的最低浓度为４．５　ｇ／Ｌ。２）精密度分析：高、中、低３　种浓度组样品检测结果ＣＶ分别为３．４５　、３．２５％、２．８Ｏ　。　３）加标回收率分析：高、中、低３种浓度样品的加标回收率分别　为９６．３％、９５．１　、９４．３　。４）对比试验：砷一铈催化分光光度　计法检测结果为（１１７．２±４．４１）　ｇ／Ｌ，变异系数为３．７６　；离　子色谱安培法检测结果为（１ｌ６．８±３．３１）ｕｇ／Ｌ，变异系数为２．　８３　。以ｔ检验比较２种方法检测结果的均值，差异没有统计　学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。　２．影响因素分析　１）标本放置时间对结果的影响：高、　中、低３种浓度样品的尿碘结果均基本稳定，高、中、低浓度样　品连续检测结果ｃ　分别为３．０９　、２．９ｏ　、３．３４　，均低于　５　。２）前处理方式的影响：以Ｃ１８柱进行前处理，检测结果　为（１７９．８±５．０４）　ｇ／Ｌ，ＣＶ为２．８Ｏ　；以ＲＰ柱进行前处理，　检测结果为（１８ｏ．６±５．１２）￣，ｇ／Ｌ，ＣＶ为２．８３　。不同前处理　方式检测结果均值用ｔ检验比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．　０５）。　．　３．１临床标本检测　不同孕期妊娠妇女及对照组尿碘水　

平的分布见表２。早、中、晚孕期的妊娠妇女尿碘的中位数分　别为１２６．４、１３０．１　７和１２４．８７￣ｇ／Ｌ，与对照组２２４．３２　ｕｇ／Ｌ比　较，差异具有统计学意义（Ｐｄ０．０５）。　表２不同孕期妊娠妇女及对照组尿碘的分布Ｉｎ（　）］