*症状出现后时间
最早被 检测时间*
1.5-2小时 1.5-2小时 2-3小时 3-4小时 4-6小时 6-10小时 6-10小时
持续可检 测时间
8-12小时 8-12小时 1-2天 7-14天 2-3天 3-5天 5-7天
灵敏度 ＋＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋
特异性 ＋＋ ＋ ＋＋＋ ＋＋＋＋ ＋＋ ＋ +
世界公认的 最先进 的临床免疫检测技术
高敏肌钙蛋白T：更先进的检测技术
• 生物素捕获抗体保持不变。检测抗体的基因经过重新设计，用人IgG C1区域 取代鼠单克隆抗体FAB片段的连续C1区域，形成人鼠嵌合型检测抗体 获益：进一步减少易受嗜异性抗体（HAMAs）的干扰 ，提高了检测的准确度 • 样本量由15μ L增加到50μ L，增加检测抗体的钌浓度，和通过缓冲区优化降 低背景信号来实现
诊断
治疗
再灌注
介入治疗
非介入治疗
Europeon Heart Journal (2007)28,1598-1660
Contents
为何要使用肌钙蛋白 为何要使用高敏肌钙蛋白
为何要使用高敏肌钙蛋白T
如何解读高敏肌钙蛋白T检测结果
MI早期诊断所遇到的挑战
肌红蛋白/CKMB 敏感性↑特异性↓
肌钙蛋白 敏感性↓ 特异性↑
肌钙蛋白是最佳诊断心肌损伤标志物
2007年ESC 指南
• 心脏肌钙蛋白是最佳的诊断心肌损伤的标志物 • 比传统心脏酶谱（如CK和CKMB）有更好的灵敏度和特异性 • 肌红蛋白对于心肌细胞损伤的灵敏度和特异性不佳，ESC不推荐用于常规 诊断和危险分层 • 肌钙蛋白诊断心肌梗死的参考值应使用健康人群99百分位参考值 • 99百分位参考值的检测偏异度应小于10％ • 肌钙蛋白检测的血样应正确采集 • 应在60分钟内得到检测结果 • 如果初次检测阴性，应在6－12小时内复查 • 结合其他心肌缺血症状（胸痛，ST段改变），肌钙蛋白阳性可诊断心梗
cTnT-hs比第四代肌钙蛋白T有更好的检测灵敏度
TnT gen 4th (10% CV) &TnT-hs (99th percentile)
Sensitivity %
93 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 0 - 3h 3 - 6h 6 - 9h 9 - 12h >12h 98 100 98 94 100
初步结果 (445 人) 第99百分位数 = 0.014 ng/ml
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 25 30 40 Troponin T [pg/mL]
Confidential: For Internal Use Only
TnT-hs检测10% CV为0.013 ng/ml
60 50
Total CV [%]
40 30 20 10 0 1 10 100 hs Troponin T [pg/mL] 1000 10000
10% CV at 0.013ng/ml
TnT-hs 在第99百分位数的URL值时能小于10% CV (< 14 pg/ml)
French J and White H
Heart 2004; 90(1): 99–106.
心脏标志物检测的历史
AST, angiotensin sensitivity test; CK, creatine kinase; INH, immunoassay; LD, lactate dehydrogenase
I
A
cTn (mCKMB)
I
C
cTn (mCKMB)
I
C
不稳定心绞痛和非ST段抬高心肌梗死患者的管理
2007年ACC/AHA 指南
早期危险分层推荐 Class I • 对于所有表现为胸部不适的怀疑ACS患者均应进行心脏标志物检测 • 心脏特异性肌钙蛋白是最佳的标志物 • 症状出现6小时内心脏标志物检测阴性的患者，应在8－12小时内复测心脏标志物 Class IIa • 心脏标志物至少应连续检测2－3次，间隔6－8小时，以评估梗死范围和坏死程度 Class IIb • 患者症状出现6小时内，肌钙蛋白可以与早期心脏损伤指标 （如肌红蛋白）联合 检测 • 患者症状出现6小时内，应综合判断肌钙蛋白2小时变化情况和肌红蛋白2小时变 化情况 • 患者症状出现6小时内，可同时检测肌红蛋白与肌钙蛋白基线水平和90分钟变化 趋势
• 每个检测第99百分位数变异系数CV应 ≤ 10%
NACB： National Academy of Clinical Biochemistry美国临床生化科学院 IFCC：international federation of clincal chemistry and laboratory medicine 国际临床 化学学会
高敏肌钙蛋白T 敏感性↑特异性↑
为何要使用高敏肌钙蛋白
• 高敏肌钙蛋白带来检验的进步 • 更高的敏感性 • 更佳的准确度
• 高敏肌钙蛋白带来临床的获益 • 提前诊断心梗时间 • 发现更多心梗患者
为何要使用高敏肌钙蛋白
• 高敏肌钙蛋白带来检验的进步 • 更高的敏感性 • 更佳的准确度
• 高敏肌钙蛋白带来临床的获益 • 提前诊断心梗时间 • 发现更多心梗患者
French J and White H
Heart 2004; 90(1): 99–
肌钙蛋白是诊断心梗的最佳生物标志物
2007年NACB指南推荐
检测 Myocardial necrosis cTn (mCKMB) cTn (mCKMB) 推荐等级 I 证据强度 B 推荐 推荐用于所有具有ACS症状的患者 进行心梗诊断时，生物标志物检测应结合 临床病史、体检和心电图检测 心脏肌钙蛋白是诊断心梗的最佳生物标志 物 当心脏肌钙蛋白不可用时，可用CKMB替代 应在就诊入院时即采集血样检测，并根据 临床情况进行连续检测 对于绝大多数患者，至少应在入院时和6 －9小时内检测两次 对于有ACS病史的患者，24小时内检测出 一次肌钙蛋白（或CKMB）高于99百分位参 考值，即应怀疑心肌梗死可能
Clin Chem 43;3:458-466; 1997
心肌损伤后，肌钙蛋白T浓度升高时间早，持续时间长
是理想的心肌损伤标志物
分子量 (KD）
12 16 83 38 96 103 135
蛋白 脂肪酸结合蛋白（Fatty acid binding protein） 肌红蛋白（Myoglobin） 心肌型肌酸激酶同功酶(CKMB) 肌钙蛋白T（Troponin T） 肌酸激酶(CK) 天冬氨酸转氨酶(Aspartate transaminase) 乳酸脱氢酶（LDH）
肌钙蛋白是特异性最好的心脏标志物
骨骼肌损伤(Marathon Runners马拉松选手) n = 41
100
相对升高
10 1
0.1
Mgb
[60µg/L] 18/21
CKMB
[7.5µg/L] 3/21
cTnI
[2.5µg/L] 0/21
cTnT
[0.1µg/L] 0/21
43名马拉松选手奔跑3天后，血液中肌钙蛋白浓度未有升高 肌红蛋白和CKMB则有升高
Apple F
et al. NACB Practice Guidelines in ACS ; Circulation 2007, 352-355
cTnT-hs正常人群中第99百分位数:0.014 ng/ml
Reference Study Kiel Elecsys® TnThs DR, n = 445
肌 纤 维
•肌纤维由平行的粗丝和细丝组成网状结构。粗丝是肌球蛋白复合体；细 丝由肌动蛋白，原肌球蛋白和肌钙蛋白组成 •肌钙蛋白在骨骼肌和心肌中广泛存在: •肌钙蛋白C结合Ca离子 – 存在于骨骼肌和心肌 •肌钙蛋白I是肌动蛋白抑制亚基 – 仅存在于心肌中 •肌钙蛋白T是原肌球蛋白结合亚基, 推动肌肉收缩–仅存在于心肌中
制作工艺不断进步，肌钙蛋白检测水平不断提高
第一代 第二代
1989年 1993年
ELISA Troponin T Enzymun Troponin Elecsys Troponin T
第一代心脏特异性单克隆抗体 第二代心脏特异性单克隆抗体 （定标液：牛肌钙蛋白） 第二代心脏特异性单克隆抗体 （定标液,人基因重组肌钙蛋白） 不受肝素干扰 最低检测浓度: 0.003 ng/ml第99 百分位数: < 0.014 ng/ml 10% CV: 0.013 ng/ml
获益：提高了分析检测的灵敏度，最低检测阈值由0.01ng/ml降低到0.003ng/ml
高敏肌钙蛋白检测过程
• 生物素捕获抗体（2.5μ g/mL），钌标记检测抗体（2.5μ g/mL），样本在均 相中培养4.5分（Elecsys 2010/cobas e 411；STAT应用）或9分钟（Modular E170/cobas e 611；正常应用）。 • 添加链霉亲和素包裹的珠，在第二个4.5或9分钟的培养期内所形成的免疫复 合物结合成微粒物。 • 在第二次培养期后，反应混合物被转送入测量单元，其中珠被磁极捕获至电 极表面。清洗测量单元去除未绑定的标记并注满包含三丙胺的检测缓冲液。 • 给电极施以电压后，释放出的化学发光可以由光电倍增器检测到。 • 结果通过2点校准曲线确定且具有仪器特异性。
来自TnThs 546位健康志愿者 DR01all
120 100
TnT hs DR01 f
TnThs DR01 m
Frequency
80 60 40 20 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8
99th perc. 13.0 pg/mL (all) 10.0 pg/mL (female) 13.2 pg/mL (male)
第三代