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沙门菌增菌培养基增菌效果的探讨与分析研究

国卫生检验杂志2004年4月第14鲞第2—J ̄ Chinese Journa

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Health Laboratory T 

[文章编号]lOO4-8685(2oo4)o2.159・03 沙门菌增菌培养基增菌效果的探讨与分析研究 

熊国强,应艳,余蔷,余希 (南昌市西湖区卫生防疫站检验科,江西330003) 

159 【研究报告】 

摘要[目的]选择好的商品增菌培养基,以提高沙门菌的检出率。[方法]用一定数量的大肠埃希菌与不同数量 种类的沙门菌混合培养,观察不同增菌液的增菌效果。[结果]目前市售的沙门增菌培养基的增菌效果差距很大,差的只 有在1:10状况下沙门菌呈优势生长,好的可达1:1×1 或以上状况下仍呈优势生长。[结论]自配的Sc和TrB增菌液 增菌效果最好。 关键词沙门菌;增菌效果;SC;MM;TrB 

E,lri ̄effect of enrichment mediuln for salmonellae Xiong( 0g ,Ying Yan,Yu ,et a1.Clinical Izzboratory ofXihu Sa,at, ̄andAnti—epidemic Station, , 330003,China Abstract[Objective]To choose a better commercial enrichment medium that call improve the detecting rate of salmonellae. [Methods]E coli and salmonellae were cultured together with diferent culturing media.Then the enriching efect of each enrichment me— dium was determined.[Results ̄The diference among the cotmnerciaIly available enrichment media Was very significant.The salmoneUae could grow well under the proportion varying from 1:10 to 1:1 .【Conclusions]The SC and 1邛pfe1)ared by oul' ̄lve¥is better than other media in enriching effect. Key words Salmonellae;Enriching effect;Selenite cystine broth;Rappaport’s broth;Tefrathionate broth 

[中图分类号]R378.2 2 [文献标识码]A 沙门菌是引起食物中毒、伤寒、副伤寒、肠炎等消化道传 染病的主要病原菌。其常规检验技术仍是国标方法 。一般 分为四个步骤(I)前增菌和增菌。(2)分离纯培养物。(3)生化 试验。(4)血清学分型鉴定,其中选择性增菌培养基亚硒酸盐 胱氨酸肉汤、四硫磺酸钠煌绿肉汤和氯化镁孔雀绿肉汤的增 菌效果的好与差对能否分离出沙门菌相当重要。我站在实际 工作中发现:市售商品的增菌培养基增菌效果相差很大 J。 为了解市售商品增菌培养基的增菌效果状况,选择质量好的 培养基,以提高沙门菌的检出率,我们对5个厂家生产的三种 沙门菌增菌培养基的增菌效果进行了研究,现报道如下: I材料与方法 I.I 实验菌株大肠埃希菌NICPBP44113购自广东环凯微生 物科技有限公司;鼠伤寒沙门菌431630购自杭州天和微生物 试剂有限公司;德尔卑沙门菌、阿贡纳沙门菌,为本实验室检 出的菌种。 1.2实验材料营养肉汤、伊红美兰琼脂购自杭州天和微生 物试剂有限公司。亚硝酸盐胱氨酸增菌液(sc)、四硫磺酸钠 煌绿增菌液(1邛)和氯化镁孔雀绿增菌液(MM)分别购自杭州 天和微生物试剂有限公司,批号分别为:2(XP.0307、20011024、 20020201,杭州微生物试剂有限公司,批号分别为20020814、 20010911、2( ̄20123,北京双旋微生物培养基制造厂,批号分别 为21XP_.O110、020125、020128,中国进出口商品检验技术研究所 北京陆桥技术有限公司,批号分别为020530、020724、020529广 东环凯微生物科技有限公司,批号分别为:2(X)203029、 2aXP.09143、200108101,共五个厂家的产品和本实验室自配的以 上三种菌液 J,总共18个待测增菌菌液。 1.3实验方.法【。] 1.3.1试验菌液的准备取鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、阿 贡纳沙门菌和大肠埃希菌分别接种肉汤管,在37℃培养l8— 24h。 1.3.2将培养好的上述4种肉汤管用肉汤作连续10倍稀释, 从10 到10一,分另取10~~10 三个稀释度各0.1ml滴加三 个营养琼脂平皿上,用L棒涂布均匀,37℃培养18—24h,计算 菌落数,算出各稀释度0.1ml中的所含细菌数 J。 1.3.3将待测增菌效果的18个增菌培养基按说明书或配制 要求配制?肖毒并分装成5ml/支,每种增菌液取8管一排,编号 记录,每管加人大肠埃希菌培养原液0.1ml和分别加入各稀释 度的鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌0.1ml, 37℃培养20h,挑取增菌培养液划线接种伊红美兰琼脂平板, 于37℃培养18—24h观察并记录结果。 ++++几乎为沙门菌纯培养,+++沙门菌菌落呈优 势(占80%),++沙门菌落有一半以上,+沙门菌落较少 (20%以上),±沙门菌落1—10个。 I.3.4增菌效果的判断参照菌落数测定的结果,算出稀释度沙 门菌与大肠埃希菌的比例,如在1:106的比例下或接种的沙门 菌为1个或接近1个的状况下,经过培养,沙门菌落在+++以 上者,则此增菌液效果很好。反之则增菌效果不理想。 1.3.5稀释菌液时必须用lml吸管准确稀释,每个稀释度须 换一支消毒吸管。用伊红美兰琼脂平板观察增菌效果的目的 是为了使大肠埃希菌也能正常生长,方可正确判断增菌效果, 复测增菌效果时,只做10 到10 四个稀释度即可。 2结果 2.1菌种的肉汤培养物原液经稀释测定茵落总数大肠埃希 菌为5.7 X 10_7个/ml,鼠伤寒沙门菌为3.7 X 107个/ml,德尔卑 沙门菌为5.1 X 1 0_7个/ml,阿贡纳沙门菌为2.6X 1 0_7个/ml。 2.2为了便于列表,将Sc、1邛、MM增菌液分别编为1—6号。 德尔卑沙门菌编为(1),阿贡纳沙门菌编为(2),鼠伤寒沙门菌 为编为(3)。 

维普资讯 http://www.cqvip.com 160 中国卫生检验杂志2004年4月第l4卷第2期Chinese Journal ofHealth LaboratoryTechnology 2004.April.14.No.2 表1 SC增茵液的增茵效果 

表3 TTB增茵液的增茵效果 续表3 从上列表可以看出:6个不同来源的Sc增菌液的增菌效 果差距悬殊,有三个厂家生产的SC增菌效果只能在10~~ 10 的稀释管中生长出部分沙门菌,且菌落并非优势菌。其它 二个厂家的SC增菌液对三种沙门菌的增菌效果各不相同,只 有本实验室自配的SC增菌液对三种沙门菌均达到非常好的 增菌效果。 

维普资讯 http://www.cqvip.com 卫生检验杂志2004年4月第l4鲞笙 塑 ! T [文章编号]1004-8685(2004)02—161—03 连续消毒中大肠杆菌0。57:H7对碘伏抵抗力的变化 

及其与质粒p0。57关系的研究 

l6l 【研究报告】 

张本 ,张晓莉 ,任静 ,刘衡川 ,殷强仲 ,叶梅君 ,黄磊 (1.成都市武侯区疾病预防控制中心,四川610041;2.四川大学华西公共卫生学院医检教研室) 摘要[目的]研究分析在连续消毒中大肠杆菌0 :H7对碘伏抵抗力变化及其与质粒p0 关系。[方法]用碘伏 连续消毒6株大肠杆菌0 :H7 10代,对比消毒前后试验菌对该消毒剂的抵抗力、质粒图谱以及质粒酶切图谱,用SDS一 高温法消除原始菌与连续消毒后试验菌的质粒。[结果]连续消毒10代后,试验菌对碘伏的抵抗力增加;试验菌的质粒 图谱以及质粒p0 的cal I酶切图谱均无明显变化;消除原始菌的小质粒后,细菌对消毒剂的抵抗力不变,消除原始菌 的大质粒和连续消毒后试验菌的质粒后,试验菌对碘伏的抵抗力增加。[结论]结果提示,连续消毒会使试验菌对碘伏的 抵抗力增加,抵抗力增加的原因可能与质粒p0 无直接关系。 关键词大肠杆菌;定量杀菌试验;质粒;抵抗力 

Study on changes of E c Ol57:H7 resistance to iodophor in continuous disinfection and relationship between re taIlce and plasmd pO157 Zl ̄ng Ben,Zlmng Xiaoli,Ren Jing,et a1.Wuhou Centerfor Disease Control&/)recent/on,C‰, 610041,Ch/na Abstract[Objective]To study the changes of E coli 0l57:H7 resistance to iodophor in continuous disinfection and relationship between resistance and the bacterial plasmid pOl57.【Methods]Iodophor was used to continuously disinfect 10 generations of 6 strains of E coli 0157:H7.The resistance Was compared before and after the disinfection.Meanwhile,the changes in the structure of oo157,the bac— terium’S plasmid,were ̄yzed after continuous disinfection of 10 generations.【ResultsJ After the continuous disinfection for 10 genera— tions.the bacterium’S resistance to iodophor Was enhanced.qlaere Was no change in plasmid map and the maps of Cal I cutting plasmid Ol57.The bacterium’S resistance to iedophor bad no change after elimination of small plasmid.However,the resistance Was enhanced after elimination of ool57.[Condusions]111e bacterium’S resistance to iedophor is enhanced after continuous disinfection for 10 generations. However,the enhancement might not be related to plasmid pOl57. 

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