表1 多酚氧化酶的催化作用 试管号 酶液 邻苯二酚 水 混匀后37℃保温5~10min,观察颜色变化 1 15滴 15滴 - 棕色→深褐色 2 15滴 - 15滴 乳白色→乳白色(颜色不变) 3 - 15滴 15滴 浅黄色→浅黄色(颜色不变) 现象:1号试管由棕色变成深褐色,2、3号试管颜色无明显变化。 结论:有底物和酶同时存在的情况下才发生反应。 表2 多酚氧化酶的底物专一性 试管号 酶液 邻苯二酚 间苯二酚 对苯二酚 混匀后37℃保温5~10min,观察颜色变化 1 15滴 15滴 - - 棕色→深褐色 2 15滴 - 15滴 - 浅黄色→浅黄色(颜色变化不明显) 3 15滴 - - 15滴 浅红色→粉红色(颜色变化不明显) 现象:1号试管由棕色变成深褐色,2、3号试管颜色变化不明显。 结论:多酚氧化酶对邻二苯酚有专一性。 表3 底物浓度的影响 试管号 酶液 邻苯二酚 水 混匀后37℃保温1min,观察颜色变化 1 5滴 1滴 39滴 浅棕色→浅红褐色 2 5滴 10滴 30滴 褐色→深褐色(颜色稍有加深) 3 5滴 40滴 - 褐色→深褐色(颜色加深) 现象:三个试管颜色颜色发生不同程度加深。1号试管颜色最浅,其次是2号,3号试管颜色最深。 结论:底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,底物浓度越高,催化速率越快。 表4 酶浓度的影响 试管号 酶液 邻苯二酚 水 混匀后37℃保温2min,观察颜色变化 1 15滴 15滴 - 棕色→深褐色 2 1滴 15滴 14滴 浅黄色→亮黄色 现象:1号试管褐色比2号试管深 结论:酶底物浓度的大小影响多酚氧化酶的催化速率,在一定范围内,酶浓度越大,催化速率越大