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基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
❖ 空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑 点数大于20时视为试验有效
❖ T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形 成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs
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基于T淋巴细胞检 测结核感染的原理
包
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T-SPOT.TB
杨 中 平
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结核感染T细胞斑点检测
❖ T细胞斑点试验（T-SPOT），又叫作结核感染干扰 素释放试验（Interferon Gamma Release Assays， IGRAs
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结核的现状
结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO 统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约 200万人死于结核。
筛查 ❖ 4：儿童结核病的辅助诊断
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T-SPOT注意事项
❖ 1:肝素抗凝全血，常温保存,不得冷冻或冷藏。 ❖ 2:采血量：三岁以下2ML，3-9岁4ML，9岁以
上6ML，免疫力低下或白细胞低下采6ML （本公司一律两管） ❖ 3:样本必须4小时内送达。 ❖ 4：输血受试者或PET-CT受试者，两周后检 测。 ❖ 5：受试者需阅读知情同意书并填写申请单。
病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创
伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。
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基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
❖ 结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结 核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T 细胞
❖ 当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释 放r干扰素
❖ r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中 最重要的细胞因子
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T-SPOT.TB的临床意义
❖ T-SPOT.TB高灵敏度
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提问
❖ 出报告时间：一、三、五检测三个工作日出。 ❖ 标本类型：肝素抗凝全血两管 ❖ 需注意:4小时内送检，8小时内完成检测 ❖ 价格：660元 ❖ 方法学：酶联免疫斑点法 ❖ 英文：T-SPOT
我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核 感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2 倍以上。
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基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
❖ T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏 感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷 的今天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。
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基于T淋巴细胞检测 结核感染的原理
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结核的传统诊断手段
结核菌素皮试：
低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。 低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易 造成“假阳性”结果。
细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周；
阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。
❖ 基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的 特点， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血， 支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等 也可用于对肺内及肺外结核的诊断。
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T-SPOT的意义
❖ 1:菌阴，结核病患者的辅助诊断 ❖ 2：肺外结合的鉴别诊断 ❖ 3：免疫力低下/受抑制患者的结核诊断/感染
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基于T淋巴细胞检 测结核感染的原理
T-SPOT.TB技术： ❖ 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存
在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异 抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 ❖ 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素的T淋 巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原 特异性细胞的频率。