毕业论文（设计）题目雪莲多糖的提取及分离纯化工艺研究毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。
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毕业论文（设计）作者签名：签名日期：年月日摘要天山雪莲(Saussurea involucrata Kar. et Kir.)，又名新疆雪莲，起来源于凤毛菊属的水母兔子、绵头雪兔子及天山雪莲花等同属多中植物的干燥地上部分或全草，具有抗风湿、通络活血的功效，用于头部创伤、热性刺痛、妇科病、类风湿关节炎和脑中风。
雪莲花是我国藏族、蒙古族、维吾尔族、纳西族和普米族常用的珍稀民族药，在《本草纲目拾遗》和藏本草《晶珠本草》中都有记载，现在药理和化学研究表明，雪莲花类药材主要含黄酮、出体、倍半帖内酚、木脂素和多糖等成分，具有抗癌、抗生育、调节心血管系统、清除自由基和免役促进等作用。
雪莲还有抗菌、抗辐射、抗寒、耐高山缺氧、强心、解痉镇静、平喘等功效，具有巨大的可开发利用价值。
本文完善了雪莲多糖的测定方法，优化了雪莲多糖的提取，对雪莲多糖进行了进一步的分离纯化及红外光谱和高效液相测谱特性进行了初步研究。
本论文主要结论如下：1、比较超声法和恒温水浴加热法提取多糖的实验要求、操作时间及实验结果等因素，确定用超声法提取多糖。
2、利用苯酚硫酸法测雪莲多糖的含量，以葡萄糖为标准物，选择6%苯酚1.0 ml、用5.0 ml浓硫酸进行显色30 min，在490 nm处进行测量，可以得到较好结果。
3、利用考马斯亮蓝G-250法测蛋白的含量。
在相同条件下用三氯乙酸法、Seveage 法、树脂法进行脱蛋白，比较各方法的蛋白损失率和多糖损失率，确定最适脱蛋白方法。
4、在相同条件下利用双氧水脱色法、活性炭吸附脱色法、树脂法进行脱色，比较颜色的差异，同时测溶液的蛋白损失率和多糖损失率，确定最适脱蛋白方法。
5、利用多糖在乙醇溶液中的不溶性，用不同浓度的乙醇溶液进行醇析提取多糖，并确定各浓度的多糖含量及蛋白含量。
6、利用红外光谱和高效液相色谱的特性对雪莲多糖的单糖组成进行分析。
关键词：雪莲；多糖；超声提取；纯化AbstractSaussurea involucrata is a well-known Chinese traditional medicine for the treatment of inflammation, arthritis, menstrual problems and regulating menstrual cycles. Modern pharmacological studies have demonstrated that it possesses some activities such as free radical scavenging, anti-fatigue, anti-inflammation, anti-cancer, and immunomodulation. The extracts of S. involucrata are mainly composed of flavonoids, which are the active components, including apigenin, kaempferide, acacetin, luteolin, quercetin, and rutin etc. According to Chinese Pharmacopoeia, rutin and chlorogenic acid are two components in for quality identification of S. involucrata. This paper carried on the related research on the content analysis and ultrasound-assisted extraction of bioactive compounds (rutin, chlorogenic acid and syringin) in S. involucrata, and the chemicl compounds contents of different parts of S. involucrata were also investigated.A RP-HPLC method was used for the simultaneous detection of rutin, chlorogenic acid and syringin in S. involucrata, the HPLC flow rate, detection wavelength and column temperature chromatographic conditions were optimized for content detection. Ultrasound-assisted extraction method was studied by single factor experiments and response surface experimental design to optimize the extraction process, the establishment of a multi-model parameter extraction model was verified by experiment. In addition, the main chemical components in different parts of S. involucrata were measured, the results showed flowers, stems and leaves have different levels of each component.Key words:Saussurea involucrata; Chlorogenic acid; Syringin; Rutin; Ultrasound extraction; Response surface experiment目录第一章文献综述 (1)1.1概述 (1)1.2新疆雪莲化学成分 (3)1.2.1从新疆雪莲中提取分离的化合物 (3)1.2.2多糖的研究进展及意义 (3)1.2.3多糖的生物活性与构效关系 (5)1.3雪莲多糖的生物活性 (5)1.3.1免疫调节作用 (5)1.3.2抗肿瘤活性 (6)1.3.3降血糖活性 (6)1.3.4降血脂活性 (7)1.3.5抗病毒活性 (7)1.3.6抗衰老活性 (7)1.3.7抗菌活性 (8)1.3.8其它活性 (8)1.4雪莲的应用 (8)1.4.1滋补品 (8)1.4.2医药制品 (8)1.4.3其他 (9)1.5超声提取植物有效成分 (9)1.5.1超声波简介 (9)1.5.2超声波作用机理 (9)1.6立题目的及意义 (10)第二章雪莲多糖的提取方法确定 (11)2.1实验仪器与材料 (11)2.1.1 实验仪器 (11)2.1.2 实验材料及试剂 (11)2.2提取方法 (11)2.2.1恒温水浴加热法 (11)2.2.2 超声波法 (11)2.2多糖含量的测定 (12)2.2.1标准曲线的绘制 (12)2.2.2样品多糖浓度的测定 (13)2.3考马斯亮蓝G-250法绘制蛋白制标准曲线 (13)2.3.1标准曲线的绘制 (13)2.3.2样品蛋白质浓度的测定 (14)2.4实验及结果分析 (14)2.4.1多糖含量的测定数据 (14)2.4.2蛋白质含量的测定 (15)2.4.3 小结 (15)第三章雪莲超声提取工艺优化 (16)3.1实验仪器与材料 (16)3.1.1 实验仪器 (16)3.1.2 实验材料及溶剂 (16)3.2样品溶液的制备 (16)3.3雪莲多糖脱蛋白方法方法的比较 (16)3.3.1 三氯乙酸法除蛋白 (17)3.3.2 Seveage法除蛋白 (18)3.3.3 树脂法除蛋白 (19)3.3.4小结 (20)3.4雪莲多糖脱色方法方法的比较 (21)3.4.1 四种树脂脱色方法处理后样品溶液脱色效果及蛋白和多糖的损失率 (21)3.4.2 双氧水脱色方法处理后样品溶液脱色效果及蛋白和多糖的损失率 (22)3.4.3活性炭脱色方法处理后样品溶液脱色效果及蛋白和多糖的损失率 (23)3.4.3 小结 (23)3.5雪莲多糖提取工艺优化 (24)3.5.1D72树脂量的确定 (24)3.6利用无水乙醇提取多糖 (25)第四章雪莲不同部位成分分析 (26)4.1实验仪器与材料 (26)4.1.1 实验仪器 (26)4.1.2 实验材料及溶剂 (26)4.2实验方法 (26)4.2.1 原料准备 (26)4.2.2 样品制备方法 (26)4.2.3反相高效液相色谱条件 (27)4.3实验结果及分析 (27)4.3.1雪莲各部位HPLC色谱图 (27)4.3.2 实验结果 (29)4.3.3 结果分析 (29)4.4小结 (30)第五章总结及展望 (31)5.1总结 (31)5.2展望 (31)第一章文献综述1.1概述新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar. et Kir .)又称天山雪莲、雪莲花、雪荷花或大苞雪莲，是维吾尔医药中的常用民族药，维吾尔名塔裕依力斯，属被子植物门、双子叶植物纲、菊目、菊科、凤毛菊属雪莲亚属的多年生草本植物，是新疆的珍贵草药之一。