%’F$ 年 世 界 上 第 一 例 转 基 因 植 物 延 迟 成 熟 蕃 茄 的
问 世 E 至 %’’6 年 抗 虫 转 基 因 马 铃 薯 进 入 商 品 化 生 产E 次 年E 抗 虫 转 基 因 棉 花 和 玉 米 也 进 入 商 品 化 生 产E转 基 因 农 作 物 由 此 得 到 了 迅 猛 发 展 ) 全 球 转 基 因 作 物 的 种 植 面 积 从 %’’# 年 的 %(" 万 G* E 猛 增 至
生物技术通报
技术与方法 ! !
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!""# 年第 6 期
转基因水稻检测方法的研究进展
李伟丰 %E! 杨朗 &
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广 西 出 入 境 检 验 检 疫 局&南 宁
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6&""!F * ! 华 南 农 业 大 学 资 源 与 环 境 学 院 & 广 州 6%"#$! *
!%H & 其 次 & 是 棉 花 ’ 油 菜 等 I 就 转 基 因 的 性 状 而 言 E
抗 除 草 剂 作 物 种 植 面 积 最 大 E 占 (6HE 其 次 是 抗 虫 作 物 E 占 %(H ) 美 国 自 %’’6 年 批 准 转 基 因 J= 玉 米 的 商 品 化 生 产 后E至 今 已 有 玉 米’油 菜 ’棉 花 ’烟 草 ’马 铃 薯 ’ 蕃 茄 ’ 甜 瓜 ’ 南 瓜 等 F 种 作 物 共 计 &$ 个 品 种 实 现了商品化生产) 自第一批水稻转基因植株在
89:2:3;<=>?@A .8:@0 基 因 水 稻
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( 转雪花莲凝集素
.BC50 基 因 水 稻 %,(&"’ ! 抗 草 铵 膦 转 基 因 粳 稻 %&&’ ! 转
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DEF 基 因 水 稻 %&!’( 转 甜 菜 碱 醛 脱 氢 酶 .)5GH0 水 稻 ! 转 水 稻 碱 性 几 丁 质 酶 ’ IE!1 ( 基 因 & 芷 蓿 葡 ห้องสมุดไป่ตู้ 糖 酶 ’ ! " B9: ( 基 因 & 大 麦 核 糖 体 失 活 蛋 白 ’ ) " IJK ( 基 因
& 级 ! 即 最 安 全 等 级 " )* 基 因 对 二 化 螟 & 三 化 螟 & 大
螟 &稻 纵 卷 叶 螟 &稻 青 虫 等 - 种 水 稻 鳞 翅 目 害 虫 具 有较 高的抗性 !近几年宁 波市农科院 &杭州 市 农 科 所 先 后 与 浙 大 核 农 所 合 作 ! 利 用 )* 基 因 转 育 出 一 批 抗 虫 性 稳 定&基 因 型 纯 合 的 常 规 稻 或 杂 交 稻 恢 复 系 " 台 州 市 农 科 院 与 核 农 所 于 !""& 年 开 始 合 作 ! 目 前已初步筛选出基因型为纯合的部分抗虫株系" 其 它 转 基 因 水 稻 研 究 包 括 转 234&56 基 因 水 稻 %7’ ! 转 ! "
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性状的目的 基 因 !同 时 要 在 植 物 中 表 达 这 些 外 源 目 的基因!还需 一个完整的表达调控 系 统 !其 中 主 要 包括 启动子&终 止 子 以 及 在 构 建 和 鉴 定 表 达 系 统 时 所需的选择标记基因% 对转基因植物的检测主要通 过 检 测 调 控 序 列 启 动 子&终 止 子 和 选 择 标记基因进行初选!然 后再对具体的目的 基 因 检测% 总 的 来 分 !对 转 基 因 植 物 的 检 测 可 分 为 定 性 检 测法和定量检测法% 目前常用的转基因作物检测方 法 有 KEI 检 测 法 & 化 学 组 织 检 测 法 & 酶 联 免 疫 吸 附 法 & 外 源 基 因 整 合 鉴 定 法 & LA@*A3< 杂 交 法 & 生 物 测 定 检 测 法 和 基 因 芯 片 法 等 %&$(&#’ %
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%’FF 年 问 世 以 来 & 许 多 国 家 在 水 稻 转 基 因 研 究 领
域取得了一 系 列 成 果 &很 多 转 基 因 水 稻 品 种 已 进 入 田 间 实 验 &被 获 准 大 面 积 环 境 释 放 &并 不 断 向 实 用 化发展) 随着世界各国公众对转基因食品安全性的 关心& 转基因生物及其产品的检测任务越来越重&
18:+= +4G,:Q:*:0=9 9,04: =G: +;;:+8,01 5@ =G: @,89= =8+091:0,4 8,4: ,0 %’FF3 D= =G: 9+*: =,*:E =G: @55? 9+@:=/ +99:99*:0= +0? ?:=:4=,01 5@ =8+091:0,4 8,4: G+9 R::0 + T58-? T,?: 4504:80:? ,99U:3 V0 =G,9 ;+;:8E ?:=:4=,01 *:=G5?9 +R5U= =8+09" 1:0,4 8,4: T:8: ?,94U99:?E 9U4G +9 KLME 1:0: 4G,; *:=G5? +0? 95 503 7G: ?:948,R:? *:=G5? ;85Q,?:9 + U9:@U- =55- @58 8:WW9:+84G,01 ;8518+* 5@ =8+091:0,4 8,4: ?:=:4=,013 )*+ ,-%.#( 78+091:0: M,4: B:=:4=,01 *:=G5? KLM <:0: 4G,;
万方数据
!""# 年第 $ 期
李伟丰等 *转基因水稻检测方法的研究进展
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工作难度越来越大!速 度要求也越来越快 !检 测 方 法也不断改进与改善 " 近年来!通过转 基因技术生 产的食品以其独特的品质和特性深受人们的关注! 它 既 被 称 为 # 新 世 纪 的 食 粮 $! 但 其 安 全 性 也 令 人 关 注与担忧% 因 此 !对 转 基 因 作 物 进 行 检 测 和 标 识 已 势在必行 " 下面就转基因水稻的检测方法作简单
和潮霉素基因水稻 得了很大的进展%
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)* 毒 蛋 白 含 量 表 达 最 高 .&/0 & 最 具 生 产 与 育 种 应 用
价 值 的 转 基 因 水 稻 抗 虫 品 系 %1 !#’ ! 并 被 农 业 部 生 物 基因工程安全管理委员会确定其生物安全等级为
$%& 法 KEI 法 被 认 为 适 合 用 于 各 类 样 品 包 括 原 料 和 经 过 加 工 的 食 品 %&7(&-’ % KEI 法 定 性 检 测 包 括 常 规 KEI 及 改 进 的 KEI ! 常 规 KEI 有 简 单 的 KEI ! 也 包 括 多 重 KEI ’ M:9*=N9AO K;94PA3?@A EQ?=< IA?2*=;<( MKEI (% 简 单 的 KEI 通 常 只 针 对 某 种 转 基 因 . 通 常 是 目 的 基 因0或 其 产 物 !只 能 满 足 一 种 或 少 数 几 个
转 基 因 品 种 的 检 测 需 要 !检 测 方 法 繁 琐 !工 作 程 序 重复且耗费 大 量 时 间 !已 不 能 满 足 当 前 工 作 中 快 速 通 关 的 要 求 % 多 重 KEI.MKEI0 也 称 复 合 KEI ! 是 一 种 特 殊 的 KEI 技 术 ! 比 单 一 KEI 反 应 更 快 捷 ! 更 经 济 ( 只 需 & 次 KEI 反 应 ! 就 能 同 时 检 测 多 个 片 段 ’ 靶 标 基 因 ( ( 节 省 模 板 GC5 & 节 约 时 间 和 减 少 费 用 %&,’ % 目前这项技术在动物病毒性传染病和人类病检测 中 应 用 较 多 %!"(!&’ 在 植 物 转 基 因 研 究 方 面 也 有 较 多 的 研 究 %!!R!$’ % 常 规 KEI 结 合 电 泳 检 测 法 ! 强 调 需 应 用 酶 切 & 杂 交 或 测 序 等 方 法 对 KEI 产 物 做 进 一 步 确 证 ! 方 法 较 烦 锁 % 改 进 的 KEI( 如 地 高 辛 标 记 的 KEI "
<>A %& 是 通 过 对 基 因 的 改 良 & 达 到 提 高 产 量 ’ 增 加
营 养 ’抗 病 ’抗 旱 ’防 虫 等 目 的 &人 为 地 给 某 一 种 作 物植入另一种生物的遗传基因( 转基因技术是指用 人 工 方 法 将 外 源 基 因 或 BCD 导 入 受 体 生 物 细 胞 中E使之稳定地整合’表 达并 遗 传 的 综 合 技 术 ) 自
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