基金项目:国家自然科学基金课题
微型化学实验专辑
广西师范大学学报JOURNALOFGUANGXINORMALUNIVERSITY
2000年6
月

黄姜中皂素的提取及含量分析
马敬中　陈长水　江　洪　李雪刚
(华中农业大学理学系,湖北武汉430070)

摘　要:黄姜干片经酸水解后的残渣用CHCl3提取皂素.提取液用分光光度法对皂素进行含量分析
.

关键词:黄姜;皂素提取;分光光度法

0
　前言
皂素又称皂甙元,是制备甾体激素药物的重要原料
[1]
.由于甾体化合物难以由化学方法合成,
所以

该原料主要来源只能从富含皂素的植物如黄姜、黄山药等的地下茎中提取.其提取方法与含量分析方法
各异
[2—6]
.我们采用微型化的操作技术,建立了提取微量皂素和含量分析的新方法.
新方法不仅缩短了

分析时间,提高了准确度,而且适用于少量样品的提取分析.本实验内容可供大学有关专业高年级学生
作为天然有机提取和分析的综合实验内容
.

1
　实验部分
111
　仪器与药品
10mL,20mL圆底烧瓶,微型回流水冷凝管,索氏提取器,微型布氏漏斗、抽滤瓶,110mL移液管;
10mL,25mL容量瓶各数只,分液漏斗,蒸馏头,直型水冷凝管,恒温水浴,电子天平,722
型分光光度
计,酒精灯等加热装置
.

黄姜干片,浓H2SO4,2mol󰃗L稀H2SO4,CHCl3,乙酸酐,活性炭,1‰皂素的CHCl3标准溶液,饱和
NaHCO3溶液,饱和NaCl
溶液,无水硫酸镁
.

112
　实验步骤
11211
　黄姜中皂素的提取
称取黄姜干片110g,用研钵捣碎,加入10mL圆底烧瓶中,加入6mL2mol󰃗L稀H2SO4,酒精灯
加热回流约4h,放冷,用布氏漏斗减压过滤,用清水洗3～5次,抽干,盖上干滤纸用小烧杯底压干,滤渣
转移至一干净滤纸上,包成比微型索氏提取器内径略小的圆柱状包,置于索氏提取器内.在20mL干净
圆底烧瓶中加入011～012g活性炭和10mLCHCl3,安装好装置,回流30～40min,放冷,减压过滤,滤
液转入25mL容量瓶用3～4mLCHCl3洗活性炭及抽滤瓶,并入25mL容量瓶中,CHCl3稀释至刻度
备用
.

11212
　标准吸光度测定
显色剂配制,取冰箱中预冷的乙酸酐与浓H2SO4,按体积比10∶1混合均匀,再置冰箱中冷至0°左
右备用
.

用移液管移取0102,0105,0110,0120,0150,110mL的皂素标准溶液,分别加入6个10mL容量
瓶,并标号,每瓶中加入4mL左右
CHCl

3
.

每个容量瓶中加入4mL左右显色剂,摇均匀,用CHCl3稀释至刻度,塞上塞子,置50°C恒温水浴

111
显色40min,取出放冷,试剂空白对照,1cm比色皿在460nm波长进行比色测定,平行作三次
.

11213　提取液吸光度测定;移取提取液110mL,稀释至25mL,再取稀释液110mL至10mL容量瓶,
照11212操作进行
.

11214　皂素样品制取:剩下的24mL未稀释提取液,用饱和NaHCO3溶液洗至碱性,
NaCl

水溶液洗至

中性,无水MgSO4干燥,然后蒸去CHCl3可得皂素样品
.

2
　结果与讨论
211
　数据处理
将三次平行实验结果取平均值,各数据如表1所示
.

表1　标准溶液的体积、浓度及吸光度
标准液体积󰃗mL0102010501101201511
0

显色液浓度
10

-5

g󰃗mL
0120151102105101010

吸光度A010130010315010625011180129901
613

以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标作图,所得图形是一条直线.提取液显色后的吸光度为01
0132,

从直线上查出其横坐标为2109×
10

-6

g󰃗mL
,由下式计算可得黄姜干片中皂素含量为:

2109×10
-6
×10×25×
25

110
×
100%=1.31%.

212
　提取条件
经反复实验证明,黄姜干片在2mol󰃗L的硫酸中回流4hr可以达到所含皂素全部水解的目的
.

酸水解后的残渣洗至中性要用清水漂洗10多个小时.因提取液加浓H2SO4显色,酸对显色无妨
碍,也不必干燥水解残渣,因显色剂中乙酸酐可以和提取液中少量水反应
:

(CH3CO)
2O+H2O2CH3CO2
H

生成乙酸对显色无影响.但残渣含水过多会影响提取率.而提取液用NaHCO3去酸和用无水
MgSO
4

去水很方便.提取时也可不用索氏提取器,直接将残渣和活性炭一起加入烧瓶回流,但时间稍

长,溶剂适量增加以达到完全提取目的.活性炭同时加入使脱色和提取同时进行,可缩短实验时间.皂素
可以用烃类溶剂提,但提取时残渣必须烘干.用CHCl3可以省去烘干步骤且烃类溶剂显色时不和显色
剂混溶,故用CHCl3提取可以直接用提取液显色
.

213
　显色条件
显色溶剂:烃类溶剂不与显色剂混溶达不到均一目的,用强极性CHCl3则可以收到满意效果
.

显色剂用量:显色剂用量多,显色效果好,但过多会使提取液中非甾体有机物产生颜色而干扰测定
,

适合比例是显色剂占总体积2󰃗5左右
.

显色温度与时间:温度高则显色快,温度低则显色慢,室温不显色.但温度过高会造成非甾体有机物
产生颜色干扰测定.选用CHCl3沸点(61°
C
)

以下50°

C左右温度显色为宜,在此温度下40min
可以充分

显色
.

测试浓度范围:显色剂与皂素来CHCl3中显色有较好灵敏度但浓度低于7176×
10

-7

g󰃗mL
时吸光

值波动较大;浓度高于9131×
10

-5

g󰃗mL
时会出现负误差
.

3
　结论
黄姜干片经稀酸酸水解后,滤渣直接用CHCl3提取,活性炭脱色后用CHCl3稀释,乙酸酐—浓硫酸
作显色剂,显色温度为50°C左右,显色时间40min,用460nm波长进行比色测定;浓度与吸光度之间
有很好的线性关系.测试范围在7176×
10

-7g󰃗mL～9131×10-5

g󰃗mL
,
此方法可以达到提取少量黄姜

211
中皂素样品和测定其含量的目的.本实验可以作为大学有关专业的高年级学生的综合实验内容
.

致谢:本教研室盛平安同志参与了实验工作,特此致谢
.

参　考　文　献
1　北京医学院药学系.预发酵提高薯蓣皂素产率的研究.中草药通讯,1977,4:17—20
2　王慕邹.薯蓣属植物中著蓣皂甙元的含量测定.药物学学报,1964,11(4):235
3　唐世蓉,吴余芬,庞自洁.盾叶薯蓣皂甙成分的分离和应用研究.南京中山植物园研究论文集,1981,136—138
4　唐世蓉,张涵庆,李鸿英等.薯蓣科植物甾本皂甙元的含量和鉴定.植物学报,1979,6:171—175
5　陈战国,耿方正,刘谦克等.薯蓣皂甙元分光光度法测定.分析化学,1996,24(2):227—229
6　马敬中,张友德.甾体化合物的分光光度法.分析化学,2000,3:390

THEEXTRACTIONANDQUANTITATIVEANALYSISOF
SAPOGENINSINDIOSCOREAZINGIBERENSIS

MAJing-zhong　CHENChang-shui　JIANGHong　LIXue-gang
(DepartmentofScientific,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070China)
Abstract:ThesapogeninswereextractedwithCHCl3fromtheresidue,whichwasleftafterhydrolyzing
thepiecesofdioscoreazingiberensisrootbyacid.Thequantitativeanalysisofthesapogeninswasmade
intheextractwithspectrophotometry
.
Keywords:Dioscoreazingiberensis;sapogeninextraction;spectrophotometry

(责任编辑　李小玲)

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