环己烷
• 判断 max是否在326～329nm之间
max在326～329nm之间
是 否
• 求算 Ai / A328
改用第二法
并与规定值比较
Ai / A328
A 300 A 316 A 328 A 340 A 360 A 328 A 328 A 328 A 328 A 328
规定值
0.555 0.907
4、 紫外吸收特性 325~328nm的范围内有最大吸收
二、鉴别试验 （一）三氯化锑反应
原理：维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯 仿溶液中，即显蓝色，渐变成紫红色。
水中水解为氯化氧锑
VitA 蓝色 紫红 CHCl
SbCl 3 渐变
3
注意：鉴别在无水、无醇条件下进行。
+
A300 A316 A328 A340 A360
：0.354 ：0.561 ：0.628 ：0.523 ：0.216
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.555 ：0.907 ：1.000 ：0.811 ：0.299
求本品中维生素A的含量？

维生素发展史
公元前3500年-古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来 的维A。 1600年-医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。 1747年-苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维C。 1831年-胡萝卜素被发现。 1905年-甲状腺肿大被碘治愈。 1911年-波兰化学家丰克为维生素命名。 1915年-科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的 1916年-维生素B被分离出来。 1917年-英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后断定这种病是 缺乏维D引起的。
2、共轭多烯侧链 易被氧化
VitA VitA 醛 环氧化物 VitA 酸
[O ] 紫外线、O 2、氧化剂
△或有金属离子存在时氧化↑
环氧化物
VitA醛
VitA酸
3、与三氯化锑发生呈色反应
VitA 蓝色 紫红
CHCl3
SbCl 3
差值
1.000 0 0.811 0.299
• 判断差值是否超过规定值的 0.02 有一个以上 超过 0.02 无超过 0.02
• 计算 A328（校正）
• 用A328计算
A328校正 3.522 A328 A316 A340
f
A 328(校正) A 328 A 328
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
A325校正 6.815 A325 2.555 A310 4.260 A334
f
A 325(校正) A 325 A 325
100%
A325校正
－3%
A325
0
A325校正
3%
（二） 三氯化锑比色法
标准曲线法
VitA SbCl 3 蓝色
第十一章
维生素类药物的 分析
第一节 概述 维生素：
是维持人体正常代谢机能所 必需的 微量营养物质。
脂溶性
VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12)
VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM VitPP
人体需要的重要维生素有6种:维生素A、 维生素B1、维生素B2、烟酸、维生素C、 维生素D，其他维生素的需要量则较少。 除维生素D外，人体不能合成维生素。
返 回
维生素与人的关系

(1)维生素A 对人体的生长、视觉和生殖 功能都很重要，对神经系统和内分泌有 调节作用，同时对上皮组织的生长、增 生和分化有重要调节作用，可改善角化 过度。可用于治疗维生素 A缺乏病、毛 发红糠疹、毛发苔癣、鱼鳞病、小儿银 屑病、鳞状毛囊角化病、进行性对称性 红斑角化症、色素性扁平苔癣、聚合性 痤疮等。

(8)维生素B12 是体内多种代谢过程中必 需的辅酶，参与核蛋白的合成，甲基的转 换以及脂肪和糖的代谢，可用于治疗慢性 荨麻疹、接触性皮炎、早期银屑病、扁平 疣、水痘、带状疱疹、扁平苔癣、脂溢性 皮炎、光感性皮肤病等。
(9)维生素C 主要用于抗炎和抗衰老，可 用于治疗紫癜性皮肤病、湿疹、荨麻疹、 黄褐斑、黑变病、特发性斑状色素沉着、 早期银屑病、砷剂皮炎等。
A328校正 3.522 A328 A316 A340 0.605
3.522 0.628 0.561 0.523
f
A 328(校正) A 328 A 328
100%
3.7% ( 15% ~ 3%)
A 328校正 1900 平均丸重 标示量% 100% C(g / 100ml ) 标示量 0.605 1900 0.08262 100% 2 1 10000 0.2399 100 250 20 99.0%
CH 2
-
SbCl 5 RCOO
蓝色
+
CH 2
-
SbCl 5 RCOO
紫红
（二） UV法
VitA 去水VitA
△ 无水乙醇 HCl
λmax为326nm
λmax为350～390nm
一个吸收峰
三个吸收峰
↓
VitA
CH 2
去水VitA（VitA3）
（三） TLC法 BP 杂质对照品法 显色剂 三氯化锑
注意：
% % 1cm ( 样) 1cm ( 纯 ) C 为混合样品的浓度
第三步
求效价
% E 换算因数 效价（IU / g） (样) 1cm(样)
换算因数由纯品计算而得：
效价（IU / g） 换算因数＝ % E1cm(纯)
1IU 0.344g维生素A醋酸酯
1 10 g 效价（IU / g） 2907000 0.物神经系统、 内分泌及血管系统有密切关系，具有皮质类 固醇激素样作用。可用于治疗异位性皮炎、 红斑狼疮、斑秃、聚合性痤疮、泛发性脓疱 性银屑病等

(3)维生素E 可用于治疗冻疮、多形红斑、结 节性红斑、单纯性紫癜、色素性紫癜性皮肤 病、肢端紫绀症、痛经以及治疗抑郁症。
乙醚提取 挥干乙醚
溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、 310、 325、 334nm 处测Ai
• 判断max是否在323～327nm之间
是 否
• 计算
A300
A325
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
• 判断 A300 /A325 是否不超过0.73
是 否
• 计算A325(校正)
第二法
等吸收度法(皂化法)
6 A1 A2 A3 7
测定VA醇，规定： λ1=325 nm，λ2 =310 nm, λ3
=334 nm
3. 测定法
（1）基本步骤: 第一步 A选择
选择依据：
所选A值中杂质的干扰已基本消除
第二步
% 求 1cm ( 样 )
A % 1cm(样) C(%) l
效价（IU / g） 2907000 换算因数＝ % 1530 E1cm(纯)
6
1900
1IU 0.300g维生素A醇
1 10 g 效价（IU / g） 3330000 0.300g
效价（IU / g） 3330000 换算因数＝ % 1820 E1cm(纯)
6
1830
（3）第二法（等吸收度法）
[ 皂化法、6/7A法 ] 适用于维生素A醇
第一法无法消除杂质干扰时用此法
脂溶性 VitA 醋酸酯 VitA 醇 KOH / 乙醇 S 皂化液 植物油 甘油和脂肪酸盐 水溶性
除去植物油的干扰 异丙醇
第四步：求标示量％
IU / 丸 标示量％＝ 100％ 标示量
IU / g 平均丸重 ＝ 100％ 标示量
A 换算因数 平均丸重 C 100％ 标示量
（2） 第一法 • 方法：
维生素A醋酸酯
S 9～15IU / ml 溶液 分别于300、 316、 328、 340、 360nm 处测Ai
第二节 维生素A
R:
-H -COCH3
维生素A醇 维生素A醋酸酯
-COC15H31 维生素A棕榈酸酯
一、 结构与性质 VA 为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯 具有UV吸收 存在多种立体异构化合物
易发生脱氢、脱水、聚合反应
VitA2
VitA3
鲸醇
（二） 性质
1、 溶解性 不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
A300 /A328 A316/A328 A328/A328 A340/A328 A360/A328
：0.564 － ：0.893 － ：1.000 － ：0.833 － ：0.344 －
0.555 0.907 1.000 0.811 0.299
= + 0.01 = －0.01 = 0 = + 0.02 = + 0.04
USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
三、含量测定
（一） UV法
维生素A2
立体异构体 氧化降解产物 合成中间体 副产物
维生素A3 环氧化物 维生素A醛
维生素A酸
三点校正法
1. 条件：
（1）杂质的吸收在310~340nm波
长范围内呈一条直线，且随波
长的增大吸收度减小； （2）物质对光的吸收具有加和性。
2. 波长的选择：
（ 1） 1 VitA的max（328nm）
（ 2） 2 3
分别在1的两侧各选一点
第一法
等波长差法