3、AFLP（ Amplified
Fragment Length
Polymorphism，扩增片段 长度多态性）
▲以PCR技术为基础，
为共显性遗传。
▲具有RFLP、 RAPD的优 点，多态性（分辨率）高，
稳定性强。
▲但费用较高，操作人员素 质要求高。尽管如此， AFLP高效可靠的特点在基 因组研究中仍具广阔应用前 景。
4
北京农科院林果所
北京
桃、草莓
5
山东农科院果树所
泰安
板栗、核桃
6
山西农科院果树所
山西太古Biblioteka 枣、葡萄7陕西农科院果树所
陕西眉县
柿
8
新疆农科院园艺所
新疆轮台
新疆名特果树
9
中国农科院郑州果树所 河南郑州
葡萄、桃
10
江苏农科院园艺所
江苏南京
桃、草莓
11
湖北农科院果茶所
湖北武昌
沙梨
12
中国农科院柑桔所
四川重庆
柑桔
随机扩增的多态性DNA）
以PCR技术为基 础（ PCR技术的 出现极大地推进 了分子生物学的 发展，其发明人 Mullis博士因此 获得1993年诺贝 尔化学奖），大 多为显性遗传， 操作简便，自动 化程度高，但稳 定性较差。
2002年建立了红丰及新世纪等15 个杏品种的DNA 指纹图谱，为鉴定品种真伪提供了科学方法。
3、一般而论，生理研究是对园艺植物生 长发育及物质代谢等一般规律（共性） 的认识过程，所用的试验材料较少，一 般在3~4个品种或类型；
而资源评价是对资源个性或种质特异 性的认识过程，所用的试材应尽可能的 多而全，且具有足够的代表性。
三、 种质资源评价体系
植物学 农业生物学
田
形态
间
化学组分
遗传学 同工酶学 孢粉学 细胞学 分子生物学
柿
鼠李科 枣属（Zizyphus）
枣
柿科
柿属（Diospyros）
类
叶生长期 落叶果树（deciduous fruit tree） 常绿果树（evergreen fruit tree）
枝干生长 乔木果树（arbor fruit tree ） 灌木果树（bush fruit tree ） 藤本果树（liana fruit tree ） 草本果树（herbaceous fruit tree ）
4、核型图
6、核型公式
5、模式图
（四）染色体显带
普通小麦 2N=2X=42
N带
Ag——NOR染色
芍药 2N=2X=42
C—带
牡丹 2N=3X=15
（五）染色体制片技术
压片法 固定（卡诺液 ）
取材
预处理
去壁低渗法
前低渗（0.075mol/L KCI）
酸解离(5N盐酸16~20min)
固定（卡诺液 ）
染色 （铁矾-苏木精） 压片
酶解离（1~3%）
后低渗（蒸馏水10~15分钟）
再固定（甲醇：冰乙酸 3：1， 10分钟~数小时）
涂片、火焰干燥
Giemsa染色
七、分子生物学
遗传标记： 是鉴别基因组中基 因位点的手段，是 易于识别可遗传的
形态标记 细胞标记 生化标记 分子标记
以基因表达的 产物为基础， 多态性不高， 信息量小，易 受环境干扰。
3、茄果类
10、多年生蔬菜
4、瓜类
11、食用菌类
5、豆类
12、芽菜类
6、葱蒜类
13、野生蔬菜
7、绿叶菜类
第四节 种质资源的收集与保存
一、目的意义 1、防止流失 2、研究利用
就地保护－建立自然保护区
二 、
－系统工程
方 式
－政府重视
与 方
利用保存
法 异地保存 建库保存
建园保存
建库保存 （bank）
栽培品种（或类型） 细胞融合材料
人工创造的种质材料 转基因材料
基因克隆
二、种质资源的意义
1、种质资源是人类生存和国民经济可持续发展 的物质基础，是一个国家安全的重要组成部分。
目前的发展趋势越来越明确地显示出：
国家安全 不仅意味着——军事与经济的强大 还意味着 有一个健康、受过良好教育高素质的大众
有一个富饶、保护良好的自然环境（生物
3、前苏联的茹考夫斯基，他瓦维洛夫研究工 作的基础上，于1970年发表了“栽培植物的新 发源地”等论文，补充了四个，成为十二个起 源中心。
中国、日本起源中心
Ⅴ Ⅳ
Ⅰ Ⅱ
Ⅲ
起源于我国的园艺植物主要有：
果－－桃、李、杏、梨、栗、 梅、柿、栆、柑、桔、橙、柚等
菜－－姜、蒜、萝卜、白菜等
花－－牡丹、菊花、芍药、月 季、水仙、杜鹃、百合等
分子标记
辅助育种 Marker Assisted Selection
MAS
第六节 种质创新及技术体系
一、种质创新的目标 1、遗传研究工具材料 2、育种亲本材料 3、新品种
二、种质创新的途径 1、自然突变与选择 2、常规杂交与远缘杂交 3、生物技术
三、 现代高新技术与果树种质创新
13
云南农科院园艺所
云南昆明
云南特有果树
14
福建农科院果树所
福建福州
龙眼、枇杷
15
广东农科院果树所
广州
荔枝、香蕉
第五节 种质资源的评价（研究）
一、研究的目的意义 研究的主要目的是为了利用 种质资源工作的20字方针是：
有效利用 积极创新 深入研究 科学保存 全面收集
二、资源评价的原则及特点
1、资源评价是对资源的种质特异性（或种 性，遗传性）的研究和认识过程，而种质特异性就 是一种资源区别另一种资源的遗传特异性。因此， 要获得正确的研究结论，果树种质资源的评价必须 坚持“唯一差异”的原则：
（二）分子标记在果树资源研究中的应用
1、果树种质资源鉴定与管理 ①遗传多样性与亲缘关系 ②亲子鉴定 ③指纹图谱的绘制和品种鉴定 ④突变体鉴定
2、构建遗传图谱
3、基因标记 连锁图法(linkage map) 近等位基因系法 (near isogenic lines) 集群分离分析法(BSA)
(bulked segregent analysis) 4、分子标记辅助育种 （Marker Assisted selection,MAS） 5、基因的定位与克隆 6、基因组比较
包括初生中心和次生中心
对世界作物起源中心的研究，有影响的研究者 有三人：
1、瑞典的De candle,他于1904年发表《栽培植物的起 源》，将世界果树分为东部原生种群区和西部原生种群 区。
2、前苏联的瓦维洛夫，他于1923～1933年， 带领考察队到亚洲、欧洲等68个国家进行了 为期8年的全球性考察，采集植物标本25余万 份，先后发表了“育种的植物地理基础”等研 究论文，首次提出了栽培植物起源中心学 说，创立了八大起源中心。瓦维洛夫被誉为 20世纪的“达尔文”。
实体。
（一）常用的分子标记及其特点
目前已有10余种分子标记技术，但常用的主要有：
1、RFLP（Restriction Fragment Length Polymorphism，限制性片段长度多态性），以 Southern杂交为基础，为共显性遗传，可靠性高，但操 作烦琐，放射性大。
2、RAPD（Randomly Amplified Polymorphic DNA，
文献查证相结合的办法，主要依据及方法有： 1、古文献资料的分析与查证 2、考古资料（化石等）的分析 3、现有野生果树资源的分布及多样性调查
（三）世界作物起源中心
这里所讲的起源中心（Original centre）有两 层含义： 一是指物种多样性中心
二是指一个物种种内的遗传变异中心
或多样性中心或基因中心
品 种 的 突 破——主要取决于 种 质 （基因）
三、作物起源中心
（一）意义
果树品种生物学习性的形成，一方面与遗传有关，同 时受环境条件的影响。因此，研究果树的起源与演化，不 仅有助于丰富和发展生物进化理论，而且对果树引种、区 域化栽培及新品种选育都有重大意义。
（二）研究方法 果树起源、演化的研究要采取野外调查、室内实验及
多样性）
遗传多样性
生物多样性
物种多样性
（Biological diversity） 生态系统多样性
2、种质资源是植物育种的物质基础
“巧妇难做无米之炊”
世 界 的 粮 食 安 全——主要取决于 粮 食 总 产 量
粮食总产 量 的 提 高——主要取决于 单位面积产量
单位面积产量的提高——主要取决于
品种
种质是客观存在的实体，其表现形式可能是： 种、品种、植株、种子、枝条、细胞、DNA片断
2、种质资源（Germplasm resources） 遗传资源（genetic resources ） 基因库（genebank）
在遗传、育种及生产上有利用价值 的一切植物材料。
野生种（或变种）
诱变材料
半野生种（或变种） 杂交材料
第三节 园艺植物的分类
观赏
园 果树作物 食用
艺 植
兼用
物 蔬菜作物 观赏
食用
兼用
观赏植物
一、果树分类
蔷薇科 苹果亚科 苹果属（Malus）
梨属（Pyrus） 木瓜属（Chaenomeles）
仁 果 类
山楂属（Crataegus）
核
李亚科
李属（Prunus） 桃属（Amygdalus） 杏属（Armeniaca）
（一）细胞 核及核仁的 大小
（二）染色体数目
植物染色体的数目变异较大， 从单冠毛菊2N=4，到瓶尔小草 的2N=1260
果树上，
2N=2X=16 X=8