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三种中药和桦褐孔菌提取物体外抗弓形虫试验
摘 要 : 了进 一 步研 究甘草 、 为 黄芩 、 齿苋 和桦褐 孔 茵体外 抗 弓形 虫作 用 , 试验 将提 取 的 3种 中药和 马 本 桦褐 孔 茵提取 物及 其组 合分 别进行 了体 外抗 弓形 虫试 验 。结 果表 明 , 甘草 和 黄芩 提 取 物具 有 较好 的抗 虫效
果, 且黄 芩优 于甘 草 , 马齿苋 和桦褐 孔 茵提取 物抗 虫效 果较 弱 ; 草与黄 芩 组合 、 甘 4种提 取 物 组合 的 效 果优 于 其他 组合 和 蒿 甲醚组 。说 明 4种提 取 物组 成的 复方在 体 外具有 良好 的抗 弓形 虫作 用。
动物 医学进 展 。02 3 ()4—1 2 1 ,3 2 :65
Pr g e s i t rn r e ii o r s n Ve e i a y M d cne
三 种 中药 和 桦 褐 孑 菌 提 取 物 体 外 抗 弓形 虫试 验 L
王韵 篪 , 玉琳 , 鞠 姚 琳
( 边 大 学农 学 院 , 林 延 吉 1 3 0 ) 延 吉 30 2
二 倍倍 比进行 稀 释 , 加入 药 物 , 设 5个 重 复孔 。孵 各 育2 、 8h 4h 4 。试 验 组 每 孔 加 入 2 L MTT 溶 液 O ( / ) 培养 4h 吸 去孔 内培 养 液 。每 孔 加入 5mg mL , ,
1 材 料 与 方 法
1 1 材 料 .
2 、 8h增殖 率均 在 9 以上 的药物 浓 度 定 为 安 4h 4 0 全浓度 , 于体 外抗 弓形 虫试验 。增殖 率计 算 方 法 : 用 增殖 率 ( ) ( 一 OD 值 试 验 组 一 O 空 白对 照 组 ) D /
津 灏 阳生物 有 限公 司) MT Sg ) 二 甲基 亚 砜 ; T( ima ; ( DMS ( O) Amrso公 司进 口分 装 ) 其 他 试 剂 为 国 ee ; 产 分析 纯 。 1 1 2 仪 器 二 氧 化 碳 培 养 箱 ( .. NUAI NU一 R, 5 0 E型 ) 倒 置显 微镜 ( k n J 2 0 50 ; Nio ,E 0 0型 ) 旋 转蒸 ;
1 2 方 法 .
病之一 _ ] 目前 , 病 的治 疗 主 要 以西 药 为 主 , 1。 该 但
传统 的磺胺 嘧 啶和 乙胺 嘧啶联合 应 用 表现 出了 明显
的毒 副作 用 , 其 应 用 受 到 限制_ ] 使 3 。因此 , 索 高 探
效安 全 的防治药 物甚 为迫 切 。现 已证 明 , 甘草 、 芩 黄 水煎 剂在 体外具 有 一定 的抗 弓形 虫 作用 ; 马齿 苋 和桦 褐孔 菌水 煎剂对 小 鼠急性 弓形 虫 感染 有 较好 的
1 11 试 剂 . .
D ME 干粉 ( B O) 胎 牛 血清 ( M GI C . ; 天
1 0 ̄ D O, 摇 床 上 振 荡 1 n 在 酶 标 仪 5 L MS 置 0 mi , O /。 处 双 波 长 测 量 各 孔 吸 光 值 , 5孔 平 均 D 6 3 以 值 , 算各浓 度 下 Veo细 胞增殖 率 。根据 美 国药典 计 r 中关 于 细 胞 相 对 增 殖 率 与 细 胞 毒 性 分 级 评 价 , 将
胎牛 血清 的 D M 培养 液 按 照 有 效成 分 含 量 倍 比 ME 稀 释 , 0 2 m 微 孑 滤膜 过 滤除菌 , 用 。 用 .2 L 备
l 1 4 细胞及 虫株 非 洲 绿 猴 肾细胞 ( r ) _ . Veo 由哈 尔滨 兽 医研究 所 提供 ; 弓形 虫 RH 株 由 日本 带 广 原 虫病 研究 所 惠赠 , 液氮 中保存 。 在
1 2 1 4种 提 取 物 对 Veo细 胞毒 性 试 验 采 用 . . r MT T法 , 种药 物设 试 验 组 、 验 对 照组 和空 白对 每 试
照组 ( 加 细胞 ) 不 。取 细 胞悬 液 , 数 1 mL, 孔 计 0/ 每 1 0 L接种 于 9 0 6孔 培 养 板 内 , 3 在 7℃ 、 积 分 数 体
1 1 3 试 验 药材 . .
黄芩 黄酮 ( 乙醇 提 取 物 , 黄 酮 总
含 量 1 7 ) 甘 草 黄 酮 ( .8 ; 乙醇 提 取 物 , 黄 酮 含 量 总
琦 等 报道 的 MTT方 法 , 每种 药 物 设 试验 组 、 虫 加 体对 照组 、 加虫 体 对 照 组 和 空 白对 照 组 。在 底 部 不 形成 单个 细胞 层 的 9 6孔 板 内接 种 经 5 m 滤膜 纯化
关键 词 : 药提取 物 ; 中 弓形 虫 ; MTT 法
中 图分 类 号 : 8 9 7 ¥ 5 . 3 ¥ 5 . ;8 2 7 1 文献标识码 : A 文 章 编 号 : 0 7 5 3 ( 0 2 0 — 0 60 1 0 — 0 8 2 1 ) 20 4 — 6
弓 形 虫 病 ( x ps s )是 由 刚 地 弓 形 虫 To o lmai s (T x pa mag n i 引起 的全身 性感 染 的人 兽共 o o ls o d i) 患寄生 虫病 , 全 球 感染 最 普 遍 的人 兽 共 患 寄 生 虫 是
发 仪 ( 海 亚 荣 生 化 仪 器 厂 , 一2 上 RE 5 AA 型 ) 酶 标 仪 ;
( 上海科 华 实验 系统有 限公 司 , T3 0型 ) 。 S 6 等
( OD值 试验 对 照组 一O D值 空 白对照组 ) 0 。 ×1 0
1 2 2 4种 提取 物体 外 抗 弓形 虫试 验 参 考 王 海 . .
治疗 作用 , 桦褐 孔 菌 多 糖 为体 内抗 弓形 虫 作 用 主 要 成分 【 ] 5 。本试验 将 4种 提 取 物及 其 组 合 进 行 抗 弓
形 虫 的体 外试 验 , 以探讨 其体 外抗 弓形 虫作用 效果 。
为 5 C 孵育 1 。设 5个 浓 度 梯 度 ( 1 , Oz 8h 表 ) 以