收稿日期:20060410作者简介:高永超(1977),男,硕士,主要从事植物病害防治方面的工作。Email:gaoyongchao2002@163.com文章编号:10024026(2006)04003604
2,4二乙酰基间苯三酚对
两种常见田间病害的防治效果
高永超1,迟建国2,邱维忠2,王加宁2
(1.山东省科学院中日友好生物技术研究中心,山东济南250014;2.山东省科学院生物研究所,山东济南250014)
摘要:2,4二乙酰基间苯三酚能够防治多种土传病原菌引起的根部病害和苗期病害,是一种新型广谱抗生素。
通过田间小区试验发现,2,4二乙酰基间苯三酚对两种常见田间病害具有很好的防治效果,1%可湿性粉剂拌
种处理对棉花立枯病的防效达到61.74%,200ug/mL浓度下对小麦白粉病的防治效果达到47.5%。
关键词:2,4二乙酰基间苯三酚;小麦白粉病;棉花立枯病
中图分类号:S432文献标识码:A
2,4二乙酰基间苯三酚(2,4diacetylPhloroglucinol,简称Phl)为聚酮类化合物,是微生物代谢过程中莽草
酸途径的一个次生代谢产物,主要由荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)产生。Phl具有抗真菌、抗细菌、
抗病毒、抗蠕虫和除草等作用,能够防治多种土传病原菌引起的根部病害和苗期病害,是一种新型广谱抗生
素[1~7]。前期,我们使用10%的2,4二乙酰基间苯三酚乳油对小麦纹枯病和全蚀病进行了温室防病测定,
结果表明,10%Ph1乳油80g/mL时浸种处理对小麦纹枯病的防效达55.90%,对小麦全蚀病的防效达
68.17%,防治效果与对照药剂多菌灵和三唑酮防效相当[8]。本文报道了使用10%Ph1可湿性粉剂对棉花立
枯病和小麦白粉病进行的田间试验的结果。
1材料与方法
1.1供试药剂
10%2,4二乙酰基间苯三酚可湿性粉剂,本中心研制,对照药剂采用50%多菌灵粉剂和20%三唑酮乳
油。
1.2供试病原菌
供试病原菌1:立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani),本实验室保存。病原菌先在PDA平板上纯化,然后接种
无菌小米培养基,拌匀后置25恒温箱培养,中间不断振摇,至病原菌菌丝布满小米粒即可。
供试病原菌2:小麦白粉病菌(ErysiphegraminisD.c.f.sp.triticiE.Marchal)。
1.3作物品种
棉花品种为鲁棉18;冬小麦品种为京9428。
1.4试验地点
棉花立枯病试验田设在山东省科学院中试基地,土壤墒情良好,未发生过棉花立枯病害,采用布满立枯
菌菌丝的小米粒人工接种到田间土壤中。第19卷第4期2006年8月山东科学SHANDONGSCIENCEVol.19No.4Aug.2006小麦白粉病试验田设在河北省保定市定兴县东引村麦田,墒情良好,麦田为多年连作麦田,历年发病。
试验地栽培管理条件一致,符合试验要求。
1.5试验方法
1.5.1棉花立枯病田间试验方法
实验小区按照随机区组排列,将2,4二乙酰基间苯三酚按照种子重量的0.5%、1%、2%三个不同的浓
度拌种,每个处理50粒种子,4次重复,同时用1%多菌灵(50%的可湿性粉剂)作对照。
播种前,先将土地整平,病原菌先在小米培养基上长满菌丝,将病原菌倒出,用干土将布满病原菌的小米
拌匀,撒到将要种植棉花的试验田中,用耙子将小米粒翻入土中。播种时,先开沟,浇水,待水耗尽,将种子播
种,上面覆干土。待出苗后每周调查一次病情。
1.5.2小麦白粉病田间试验方法2,4二乙酰基间苯三酚共设4个浓度,0,100,200,500ug/mL,所设浓度均为有效成分浓度,每个浓度4个
重复。同时以200ug/mL三唑酮作对照,上述的每个重复都应选择在不连续的区域进行。施药7d后调查病
情,调查的株数为40株。
1.6病害调查标准与防治效果计算1.6.1棉花立枯病病情调查[9]
0无病;1茎基部有小病斑,占茎围的14以下;2茎基部病斑较大,约占茎围的14~12;3茎基部病斑占
茎围的12以上,但尚未破坏整个茎围;4茎基部病斑占据全部茎围,植株死亡。
病株率%=每个处理的病株数100/每个处理的总株数
病情指数%=(各病级各级株数)100/(最高病级总调查株数)
防效%=(对照病情指数-处理病情指数)100/对照病情指数
1.6.2小麦白粉病病情调查方法[9,10]
调查每株的旗叶及旗叶下第一片叶。白粉病的分级标准(以叶片为单位):
0级:无病;1级:病斑面积占整片叶面积的5%以下;3级:病斑面积占整片叶面积的6%~15%;5
级:病斑面积占整片叶面积的16%~25%;7级:病斑面积占整片叶面积的26%~50%。防治效果计算方
法同上。
数据采用SPSS10.0统计软件进行LSR差异显著性分析,小写字母表示在0.05水平上有差异显著性,大
写字母表示在0.01水平上差异极显著。
2结果与分析
2,4二乙酰基间苯三酚可湿性粉剂对棉花立枯病的防治效果见表1,各处理浓度对棉花立枯病均有防治
作用,0.5%、1%和2%的处理组对棉花立枯病的防治效果相当,不同浓度之间无差异显著性。1%多菌灵拌
种处理的防效比较稳定,4周之后其防治效果与同等浓度的2,4二乙酰基间苯三酚可湿性粉剂相当,二者之
间无差异显著性。但从使用剂量上看,0.5%的2,4二乙酰基间苯三酚的防治效果即可达到1%的多菌灵的
防治效果,在实际应用中将具有更大的优势。
小麦白粉病试验结果表明,2,4二乙酰基间苯三酚各浓度(100,200,500ug/mL)处理后,小麦白粉病的病
情指数极显著低于空白对照,说明供试药剂的100,200,500ug/mL使用浓度对小麦白粉病防治效果极显著
(表2)。
2,4二乙酰基间苯三酚各浓度(100,200,500ug/mL)处理后的小麦白粉病的病情指数与对照药剂处理(三
唑酮,使用浓度200ug/mL)差异不显著,说明其防病效果与对照药剂的相当。2,4二乙酰基间苯三酚100ug/mL的防治效果即可达到50%,与200ug/mL的三唑酮防效相当。从本试验中的空白对照病情指数10.37第4期高永超,等:2,4二乙酰基间苯三酚对两种常见田间病害的防治效果9来看,本年度本试验地块病害中度发生。试验药剂以上处理在整个试验期间对作物和其他有益生物没有
不利影响,使用安全。
表12,4二乙酰基间苯三酚田间防治棉花立枯病试验结果
处理剂量1周2周3周4周病指防效%病指防效%病指防效%病指防效%
CK13.47a14.83a19.8a22.76a
粉剂拌种0.50%3.01a77.64a6.23a58.018.52a56.997.95b65.09
粉剂拌种1.00%3.92a70.89a9.73a34.397.74b60.898.71b61.74
粉剂拌种2.00%2.08b84.53b8.75a40.9813.96a29.527.19b68.4
多菌灵拌种1%5.46a59.43a10.34a30.269.66a51.217.22b66.09
表22,4二乙酰基间苯三酚田间防治小麦白粉病药效试验结果
药剂/处理使用浓度(ug/mL)病情指数防病效果(%
)差异显著性*
0.01
对照药剂(三唑酮)2005.648.7B
2,4二乙酰基间苯三酚1005.550.0B
2005.747.5B
5005.351.2B
空白对照清水10.9A
*病情指数差异显著性分析
同时,我们还对6种作物和蔬菜进行了种子发芽敏感性试验,观察其是否对农作物有毒性。结果表明,
高浓度条件下(1000ug/mL)对供试的部分作物和蔬菜的发芽有显著影响,对照药剂多菌灵在1000ug/mL浓度
下对绝大多数作物也具有显著影响。在有效抑菌浓度200ug/mL的条件下,对绝大多数作物发芽无显著性影
响。
我们还委托山东省劳动职业病防治研究所对2,4二乙酰基间苯三酚进行了第一阶段的毒理学试验和
Ames试验,结果表明2,4二乙酰基间苯三酚按照我国农药急性毒性分级标准,其属于低毒类农药,对家兔皮
肤、眼睛呈无刺激性或轻微刺激性。Ames试验结果表明,2,4二乙酰基间苯三酚在活化实验(加S9)及非活
化试验中各菌株回变菌落数均未超过自发回变菌落数的两倍,亦未呈剂量反应关系;按Ames试验判定标
准,在本试验剂量范围内为阴性结果。我们还对施用2,4二乙酰基间苯三酚的土壤进行了残留量的检测,结
果发现,使用一段时间后,用高压液相色谱已经检测不到该化合物的存在。
3讨论
2,4二乙酰基间苯三酚是经过室内活性测定筛选得到的高活性化合物之一,经过田间小区试验结果发
现,在所设的浓度范围内其防治效果与市售农药三唑酮和多菌灵相当。从现有的数据看,在浓度降低1倍后
效果仍然和多菌灵、三唑酮相当,因时间限制,未做进一步降低浓度的实验,但从现有的数据推断其有效作用
浓度仍具有很大降低空间。
目前使用的杀菌剂主要是三唑类杀菌剂,但是在山东、四川等地使用过程中已有产生抗性的报道。寻找
比目前使用药剂更稳定、更安全的替代产品是十分必要的。2,4二乙酰基间苯三酚在有效作用浓度下对农
作物、环境是十分安全的,对人的安全性试验我们已经做完了第一阶段的毒理学试验和Ames试验,下一步将
继续进行更为深入的实验以验证其安全性。38山东科学2006年参考文献:
[1]王烨.产抗生素2,4diacetylPhloroglucinol(Ph1)荧光假单胞菌的分离鉴定及Ph1合成基因的克隆[D].北京:中国农业大
学植物病理系,2001.
[2]KEELC,WELLERDM,MSTSCHA,etal.Conservationofthe2,4DiacetylpholroglucinolBiosynthesisLocusamongFluorescentPseu
domonasStrainsfromDiverseGeographicLocations[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,1996,62(2):552-563.
[3]BRIONKD,GENEVIEVED.EnvironmentalFactorsModulatingAntibioticandSiderophoreBiosynthesisbyPseudomonasFluorescens
BiocontrolStrains[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,1999,65(6):2429-2438.
[4]RAAIJMAKERSJM,WELLERDM,TOMASHOWLS.FrequencyofAntibioticproducingPseudomonassppinNaturalEnvironments[J].
AppliedandEnvironmentalMicrobiology,1997,63(3):881-887.
[5]GIRLANDAM,PEROTTOS,MOENNELoccozY,etal.ImpactofBiocontrolPseudomonasFluorescensCHAOandaGeneticallyModified
DerivativeontheDiversityofCulturableFungiintheCucumberRhizosphere[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,2001,67(4):
1851-1864.
[6]BONSALLRF,WELLERDM,TNOMASHOWLS.Quanfiticationof2,4DiacetylPhloroglucinolProducedbyFluorescentPseudomonas
spp.inVitroandintheRhizosphereofWheat[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,1997,63(3):951-955.
[7]MAZZOLAM,FUJIMOTODK,THOMASHOLS,etal.VariationinSensitivityofGaeumannomycesGraministoAntibioticsProducedby
FluorescentPseudomonasspp.andEffectonBiologicalControlofTakeallofWheat[J].ApplideandEnvironmentalMicrobiology,1995,
61(7):2554-2559.
[8]王加宁,陈凯,李纪顺,等.10%Phl乳油对两种小麦病害的防治效果[J].山东科学,2004,17(3):29-31.
[9]GB/T17980.36-2000,棉花这枯病情调查[S].
[10]GB/T17980.22-2000,小麦白粉病病情调查方法[S].
Effectsof2,4diacetylPhloroglucinolontwoplantdiseases
GAOYongchao1,CHIJianguo2,QIUWeizhong2,WANGJianing2
(1.SinoJapaneseFriendshipBiotechnologyResearchCenter,ShandongAcademyofSciences,Jinan250014,China;
2.InstituteofBiology,ShandongAcademyofSciences,Jinan250014,China)
Abstract:Asabroadspectrumantibiotic,2,4diacetylPhloroglucinolhasgoodeffectsontherootandseedlingdiseases
causedbysoilbomepathogen.Theresultoffieldplottestshowedthat2,4diacetylPhloroglucinolhasgoodeffectson
RhizoctoniasolaniandErysiphegraminisD.c.f.sp.triticiE.Marchal.Thecontrolefficiencyof2,4diacetyl
Phloroglucinolondampingoffis61.74%atthedosageof1%theweightofcottonseed,andthecontrollingefficiencyon
wheatpowderymildewatthedosageof200ug/mLis47.5%.
Keywords:2,4diacetylPhloroglucinol;ErysiphegraminisD.C.f.sp.triticiE.Marchal;Rhizoctoniasolani39第4期高永超,等:2,4二乙酰基间苯三酚对两种常见田间病害的防治效果