PesticideScienceandAdministration2013，34（3）
吡虫啉（imidacloprid）又称咪蚜胺、蚜虱净，是国内近年发展较快的一种新型硝基亚甲基类杀虫剂，主要通过选择性地抑制昆虫烟酸乙酰胆碱酯酶受体，阻断神经系统传导，造成死亡，具有内吸、触杀和胃毒作用。主要用于防治水稻、小麦、棉花等作物上的刺吸式口器害虫，
吡虫啉在节瓜和土壤中的残留分析方法研究占绣萍1*，谢金招2（1.上海市农业技术推广服务中心，上海201103；2.江西省赣州市果树植保站，江西赣州341000）
StudyonImidaclopridResidueinHairyGourdandSoilbyHPLCZhanXiuping（ShanghaiAgricultureTechnicalExtensionServiceCenter，Shanghai201103，
China）
XieJinzhao（GanzhouCityofJiangxiProvinceFruitTreesPlantProtectionStation，Jiangxi341000，China）
Abstract：Ahigh-performanceliquidchromatography（HPLC）methodwasdevelopedforthedeterminationofimidaclopridinhairygourdandsoil.Theresiduesofhairygourdsampleandsoilwereextractedwithacetonitrile，andthehairygourdsamplewerecleanedupwithSolid-phaseextraction，（andthesoilsamplewerenotcleanedup），andcondensedtodry.DeterminationsofanalyteswerecompletedusingHPLCwithDADdetection.UnderHPLCconditions，thede-tectablelimitofimidaclopridwasestimatedtobe0.2ng，andtheminimumdeterminationconcentrationwas0.02mg/kginhairygourd，and0.01mg/kginsoilrespectively，Thefortifiedrecoveriesofimidaclopridinhairygourdandsoilwereinrangeof94.9%～119.7%and84.8%～107.1%，
withrelativestandarddeviationsof1.46%～9.14%.Keywords：imidacloprid；HPLC；residue；hairygourd
摘要：建立了一种用高效液相色谱仪分析节瓜及土壤中的吡虫啉残留量方法。样品用乙腈溶剂提取，节瓜样品过SPE小柱净化，土壤样品直接浓缩、定容，最后用液相色谱DAD检测器测定。该方法条件下，吡虫啉的最小检出量为：0.2ng，在节瓜和土壤中最低检测浓度分别为0.02、0.01mg/kg，吡虫啉在节瓜和土壤样品中的回收率分别为94.9%～119.7%和84.8%～107.1%，变异系数为1.46%～9.14%，满足农药残留分析要求。
关键词：吡虫啉；液相色谱；残留；节瓜中图分类号：S481+.8；S482.3文献标识码：A文章编号：1002-5480（2013）03-17-04
收稿日期：2012-11-30作者简介：占绣萍（1983-），女，汉，江西乐平人，农药学硕士，农艺师，从事农药残留分析研究。联系电话：64053928；E-mail：zxp19830124@yahoo.cn。
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如蚜虫、叶蝉、蓟马、白粉虱及马铃薯甲虫和麦秆蝇等。其化学结构式为。作为市场上发展较快、应用广泛的农药之一，先后已经有不同文献报道其在番茄、萝卜、枸杞、烟草等作物及环境中的残留[1-6]，但前处理方法较繁杂，未见报道在节瓜中的残留分析方法。本文参照文献方法对吡虫啉在节瓜及土壤中的残留前处理方法及色谱条件都进行了优化，筛选出简便、快速、准确、节省溶剂的残留分析方法。1材料与分析方法1.1仪器HP1260液相色谱仪（美国安捷伦公司）、C18反相色谱柱、制样机、国际型振荡器、高速匀浆机、高速离心机、漩涡混合器、电子天平、氮吹仪以及其它实验室常用仪器设备。1.2试验材料与试剂试验材料：采自上海市宝山郊区节瓜、土壤；吡虫啉标准样品（1000mg/L，由天津环保所提供）；NH2固相萃取小柱。试剂：无水硫酸钠、氯化钠（分析纯）；乙腈、甲醇（色谱级）；娃哈哈矿泉水等。1.3色谱条件C18反相色谱柱：YWG-C18色谱柱（250mm×4.6mm，10um）；柱温：40℃；流速：1.0mL/min；进样量：20uL；吸收波长：268nm；梯度洗脱条件如下：起始时间0min，甲醇/水（0∶100，V/V）；8.0min，甲醇/水（95∶5，V/V），10.0甲醇/水（95∶5，V/V），停止时间：12min，延迟时间：3min。1.4样品制备节瓜：节瓜样品送回实验室后，将样品混匀，采用四分法缩分样品，取出其中的1/4在制样机中打碎，装到带盖的塑料瓶中，贮存在-20℃的冰柜中冷冻保存。土壤：样品送回实验室后，用电风扇迅速将样品吹干后，将样品混匀，采用四分法缩分样品，取出其中的1/4在粉碎机中将土壤打细，装到带盖的塑料瓶中，贮存在-20℃的冰柜中冷冻保存。1.5提取方法节瓜样品：称取25g样品加入
到250mL三角瓶中，加50mL乙腈高速匀浆1min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5～7g无水氯化钠的具塞量筒里，收集滤液40～50mL，盖上盖子，剧烈振荡1min，在室温下静置1h，使乙腈相和水相分层，从具塞量筒中吸取10mL乙腈溶液至烧杯中，然后氮吹至近干，待测。土壤样品：称取25g样品加入到250mL三角瓶中，加乙腈溶剂50mL振荡提取60min，将提取液转移至离心试管中，以3000r/min的速度离心5min，静置待测。
1.6净化方法节瓜：用二氯甲烷∶甲醇（95∶5，V/V）混合淋洗液4mL预淋NH2固相萃取柱，
再用二氯甲烷∶甲醇（95∶5，V/V）混合淋洗液10mL分3次冲洗烧杯过NH2柱洗脱并收集，经
0.25um微膜过滤，5mL甲醇定容，上机待测。
土壤：吸取上清液5mL，经0.25um微膜过滤，上机待测。2结果与讨论
2.1土壤样品中提取溶剂和振荡时间的选择
添加吡虫啉标样到土壤样品中，加入乙腈溶剂50mL分别振荡30、60、90min进行比较，结果
（表1）表明，90min的回收率偏高，可能提出更多的杂质干扰标样；30min的回收率偏低，时间太短，不能完全提取出吡虫啉的残留；振荡60min的回收率较稳定，提取效果较好。所以最
后选择振荡60min进行提取。
表1土壤样品不同振荡时间的回收率比较振荡时间（min）回收率（%）R1R2R3平均R3080.583.675.579.960102.298.7101.3100.790120.8115.0109.7115.2
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2.2节瓜样品净化方法比较由于节瓜色素不
是很深，故在常用的固相萃取柱中选择了NH2小柱，用二氯甲烷∶甲醇（95∶5，V/V）混合淋洗液和二氯甲烷∶甲醇（90∶10，V/V）混合淋洗液洗脱比较，发现后者洗出来的杂质较多，容易干扰标样，故选择用体积比为95∶5的二氯甲烷/甲醇混合溶剂较好。2.3标准曲线、最小检出量与最低检出浓度
取一定量的1000mg/L吡虫啉母液，分别稀释成0.02、0.05、0.1、0.5、1、2mg/L6个不同浓度的
标准溶液，摇匀，按照4.2仪器检测条件，以峰面积对进样绝对量做标准曲线，检测线性范围为0.4ng～40ng，得到线性回归方程为Y=97.252X+0.6245，相关系数为r=0.9999（标准曲线图1）。
在上述条件下，吡虫啉的最低检出量为0.2ng。根据添加回收率试验，吡虫啉在节瓜、土壤中的最低检出浓度分别为0.02、0.01mg/kg。2.4回收率实验分别在空白节瓜和土壤样品
中加入4档浓度的吡虫啉标样，按上述方法对样品进行提取、净化、色谱测定后，计算添加回收率，结果（表2、3），吡虫啉在节瓜样品回收率为94.9%～119.7%；在土壤样中的添加回收率为84.8%～107.1%。变异系数（CV）为1.46%～9.14%。
2.5色谱条件吡虫啉标样出峰时间约为
7.3min。标样、样品空白、样品添加回收色谱图
（图2～6）。
表2节瓜中吡虫啉的添加回收率添加浓度（mg/kg）回收率（%）平均值变异系数CV（%）12345
0.25106.1112.1101.8106.9105.5106.53.480.5102.298.7101.3100.499.1100.31.460.1119.7111.5121.2116.9110.8116.04.070.0494.995.1105.4110.8116.5104.59.14
表3土壤中吡虫啉的添加回收率添加浓度（mg/kg）回收率（%）平均值变异系数CV（%）12345
0.0294.0100.093.383.890.592.36.380.1101.4100.4107.199.4105.2102.73.230.493.691.991.790.390.591.61.470.886.684.985.384.889.886.32.40
3小结研究并建立了一种采用高效液相色谱仪测定节瓜及土壤中残留量的分析方法。该方法具有操作简便，快速，节约溶剂，对环境污染小。本方法在节瓜和土壤中的添加回收率为84.8%～119.7%，均满足残留测定要求。目前，尚未有
文献报道吡虫啉在节瓜中的残留分析方法，本研究将为吡虫啉在节瓜上的安全性评价提供检测依据，为该农药在其他农作物中残留检测方法提供一定的参考价值。
图1吡虫啉标准曲线图农药残留19--