茶叶科学２００５，２５（３）：２１９－２２４ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｅａＳｃｉｅｎｃｅ

茶多糖和茶多酚的降血糖作用研究丁仁凤，何普明＋，揭国良（浙江大学茶学系，浙江杭州３１００２９）摘要：目的：研究茶多糖、茶多酚对四氧嘧啶致糖尿病ＳＤ大鼠的降血糖作用和机制。方法：饲喂ＳＤ大鼠茶多糖、茶多酚３周后，观察大鼠血糖、葡萄糖耐量、血胰岛素以及小肠糖降解酶（淀粉酶、蔗糖酶、麦芽糖酶）变化。结果：茶多糖、茶多酚都有显著抑制糖尿病大鼠血糖升高的作用；与对照组比较，茶多糖组大鼠血胰岛素水平有显著提高（Ｐ＜０．０５），蔗糖酶和麦芽糖酶活性显著降低（Ｐ＜０．０５）；茶多酚组的血胰岛素水平有升高趋势，小肠各降解酶活力也有下降趋势，但与对照组比较均未达到显著水平。结论：茶多糖对高血糖大鼠有显著的抑制血糖升高的作用，茶多糖的作用机制可能是抑制小肠糖降解酶活性。关键词：茶多糖；茶多酚；糖尿病；降血糖中图分类号：￥５７１．１；Ｒ９７７．１＋５文献标识码：Ａ文章编号：１０００－－－３６９Ｘ（２００５）０３—２１９—０６

ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＨｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃＭｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＴｅａＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓａｎｄＴｅａＰｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓＤＩＮＧＲｅｎ—ｆｅｎｇ，ＨＥＰｕ。ｒｕｉｎ９４，ＪＩＥＧｕｏ．１ｉａｎｇ

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＴｅａＳｃｉｅｎｃｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ。Ｈａｎｇｚｈｏｕ

３１００２９，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓａｎｄｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ

ｉｎｄｉａｂｅｔｉｃ

ＳＤｒａｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｌｌｏｘａｎｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｆｔｅｒｆｅｅｄｉｎｇｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｏｒｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｆｏｒ３ｗｅｅｋｓ，

ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅ，ｉｎｓｕｌｉｎａｎｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆａｍｙｌａｓｅ，ｓｕｃｒａｓｅａｎｄｍａｌｔａｓｅｉｎｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅ

ｗｅｒｅｉｎｓｐｅｃｔｅｄｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓａｂｏｕｔｔｈａｔｔｈｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｈｉｇｈｌｅｖｅｌｏｆｂｌｏｏｄｇｌｕｃｏｓｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙ

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ｐｅｒｉｏｄ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｂｌｏｏｄｉｎｓｕｌｉｎｉｎｔｈｅｇｒｏｕｐｆｅｅｄｅｄｗｉｔｈｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜Ｏ．０５），ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｕｃｒａｓｅａｎｄｍａｌｔａｓｅｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．Ａｌｍｏｓｔｔｈｅｓａｍｅｃｈａｎｇｅｗｉｔｈｏｕｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｔｈｅｇｒｏｕｐｆｅｅｄｅｄｗｉｔｈｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｗｈｉｌｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓａｎｄｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｈａｖｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉｃｅｆｆｅｃｔｏｎｄｉａｂｅｔｉｃｒａｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｌｌｏｘａｎ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｆｕｎｃｔｉｏｎａｒｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｔｈｅｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉｃｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｍａｙｂｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ

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我国和日本民间有泡饮粗老茶治疗糖尿病的历史ｍ２１。研究初步证实，茶多糖（ＴｅａＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ＴＰＳ）是粗老茶叶降血糖的有

效成分之一吲，对于茶叶中的主要成分一茶多

收稿日期：２００５一０４一１８修订日期：２００５一０６—２０作者简介：丁仁风（１９７９一），女，重庆人，在读硕士研究生，主要从事茶叶生化方面的研究。。通讯作者　万方数据２２０茶叶科学２５卷酚（ＴｅａＰｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ＴＰ）的降糖作用，研究者意见不同【４＇５】。有关茶叶与糖尿病的关系，笔者也曾作过综述【６Ｊ。目前研究茶多糖、茶多酚降血糖作用的报道很多，但其作用机制报道甚少。动物实验的研究发现［＿７１，同时给予正常大鼠葡萄糖和ＴＰ，能明显抑制大鼠血糖升高；给予四氧嘧啶诱导罱的ＤＭ大鼠适量的ＴＰ，也可以降低其血糖水平。对粗老茶的降血糖作用研究表明【８】，茶多糖就是粗老茶治疗糖尿病的主要药理成分。ＩｓｉｇａｋｉＫｔ９１也报道了茶叶水溶性多糖有明显的降血糖效果，但具体的作用机制仍不清楚。本研究旨在探讨茶多酚和茶多糖的降糖机制。１材料与方法１．１动物及饲喂条件ＳＤ大鼠，清洁级，体重１００ｇ左右，雄性，由浙江省实验动物中心提供。动物饲养于定时交换空气（每小时６次）、恒温（２３±２。Ｃ）、定时适当亮度的照明（６：３０～１８：３０）、相对湿度５０％一６０％的动物实验室。大鼠自由摄食、饮水，单笼饲养。基础饲料为省实验动物中心提供的用于鼠类生长发育期的粉末饲料。１．２粗茶多糖自制粗茶多糖。方法：将茶粉（购自浙江省龙游茗皇天然食品有限公司，为绿茶的水提液喷雾干燥物）溶解于水，然后加入３倍体积９５％的乙醇充分搅拌，离心，收集沉淀物用７５％的乙醇洗涤２次，所得沉淀物再用蒸馏水溶解，真空冷冻干燥，得灰白色粗茶多糖，其中不含茶多酚。测定多糖含量为１５％（蒽酮硫酸法，葡萄糖做为标准曲线）。１．３茶多酚购自浙江大学茶业科技开发公司。图１是茶多酚的ＨＰＬＣ图谱，各儿茶素单体的含量分别是：ＧＣ＿０．９６％，ＥＧＣ一１１．７５％，Ｃ一３．０５％．ＥＧＣＧ一５５．７２％。ＧＣ（、－一９．４５％，ＥＣＧ—１４．１６％，ｃＧ一０．５５％。儿茶素总量大于

９０％。ＥＧＣＧ

ＥＣＧＩ

ＧＣＧＩ

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图１茶多酚的ＨＰＬＣ图谱

Ｆｉｇ．１ＨＰＬＣＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｆｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ

１．４试剂四氧嘧啶、Ｆｏｌｉｎ。酚试剂均为Ｓｉｇｍａ公司生产；血糖试剂盒由宁波慈溪生化试剂厂生产；胰岛素试剂盒：北京北方生物技术研究所生产；牛血清白蛋白（ＢＳＡ）：西宝生物公司生产（上海）；肝素钠：中国医药（集团）上海化学试剂公司生产，其它试剂为分析纯。

１．５方法１．５．１模型建立及分组情况ＳＤ大鼠进入实验室先适应性喂养卜２ｄ，

然后早上７：００禁食，下午２：００腹腔注射四氧嘧啶生理盐水液，按１５０ｍｇ／ｋｇ・ＢＷ剂量腹腔

注射，第二天按同样的方法注射１４０ｍｇ／ｋｇ

ＢＷ。７２ｈ后测定空腹血糖，取血糖值在１１．１

ｍｍｏｌ／Ｌ以上的大鼠进入本实验。正常组的大鼠只注射生理食盐水。按血糖值、体重随机分成４组，设正常组（Ａ组），糖尿病组（对照组，Ｂ组），糖尿病茶多糖组（Ｃ组）、糖尿病茶多酚组（Ｄ组）。茶多糖、茶多酚分别按２．５％浓度拌人基础饲料，正常和对照组给予基础饲料。实验期３周。

１．５．２测定指标及方法（１）每天记录各组大鼠的体重变化及摄

　万方数据３期丁仁凤，等：茶多糖和茶多酚的降血糖作用研究２２１

食量。（２）空腹血糖及葡萄糖耐量测定：血糖测定：禁食７ｈ后，从大鼠尾部采血约１００ｐｌ至肝素钠预先处理的毛细玻璃管，

及时封口后离心取血浆，用ＧＯＤ．ＰＯＰ法（血糖试剂盒）测定。糖耐量测定：实验末期空腹腹腔注射葡萄糖，按Ｉｇ／ｋｇ・ＢＷ注射，体积控制在Ｉ－２ｍｌ，

在注射葡萄糖的０、０．５、１、２ｈ采血测定血糖浓度。（３）空腹血胰岛素测定和小肠内各糖降解酶活性的测定：血胰岛素测定：按照血胰岛素试剂盒方法进行测定，测定的原理为酶联免疫夹心法。待测酶液制备：用刀片刮下小肠内囊，并用浓度为ｏ。０５ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ７．４的磷酸缓冲液溶解至一定浓度，匀浆机搅匀，分装于小离心管中（每管约１．５ｍ１），冷冻备用。待测液酶活性的测定：淀粉酶活性的测定参照曹建明等人的碘显色法【１０１，蔗糖酶盒麦芽糖酶活性测定参照许梓荣等人的葡萄糖生成量测定法［１１１。酶活力单位定义：淀粉酶在４０。Ｃ下和底物淀粉作用３０ｍｉｎ，水解１０ｍｇ

淀粉为１个淀粉酶活性。双糖酶每分钟分解

１．０ｐｍｏＶＬ底物为一个双糖酶活力单位。另外，由于小肠内囊所配制的酶待测液是随机溶解的，为了更好的比较各个酶的活性，本实验采取单位蛋白质的酶活力进行比较，其中蛋白质的测定用Ｌｏｗｒｙ法【１２】（Ｆｏｌｉｎ．酚法）。１．５．３实验处理采用ＳＡＳＳｙｓｔｅｍｆｏｒＷｉｎｄｏｗｓＶ８进行数据统计，表示方法为平均值±标准误差。

２实验结果２．１一般观察造模后，大鼠多饮、多食、多尿、体重减轻即“三多一少”症状明显。随着实验的进行，添加茶多酚或茶多糖的实验组症状有所缓解，尤其是饮水量明显减少。

２．２各组大鼠体重变化比较大鼠分组时与实验末期时的体重见表１，从表１中可以看出，正常组老鼠在实验阶段体重增加迅速，与患有糖尿病的老鼠比较，体重增加量达到极显著差异（Ｐ＜０．０１）。饲料中添加茶多糖或茶多酚的实验组，体重增量略比对照组高，但没有达到显著水平。

２．３对糖尿病大鼠血糖以及糖耐量的影响实验期间，正常组大鼠空腹血糖基本保持不变。对照组大鼠空腹血糖值一直维持较高水平，在实验末期已升至较高水平，增量值达１．８±Ｏ．５２ｍｍｏｌ／Ｌ。茶多糖和茶多酚组的大鼠在实验期间血糖值基本保持不变，实验末期的空腹血糖与对照组比较存在显著差异（Ｐ＜０．０５ｏ

从表２中血糖增加值的差异也可以明显看出，

茶多糖和茶多酚有显著抑制高血糖大鼠血糖升高的作用。从图２中可以看出，饲喂含茶多糖或茶多酚饲料的糖尿病大鼠在注射葡萄糖后，其血糖值在０．５ｈ达到峰值，之后开始下降，糖耐量曲线变化与正常组相似；而对照组在注射葡萄糖０．５ｈ后血糖浓度仍然继续升高，１ｈ达到峰值，说明对照组大鼠对葡萄糖的忍耐程度明显

表１实验期间体重变化Ｔａｂｌｅ１Ｃｈａｎｇｅｓｏｆｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ（ＢＷ）ｏｆｅａｃｈｔｅｓｔｅｄｇｒｏｕｐｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｐｅｒｉｏｄ