ABO血型鉴定正反定型试验方法
一、试剂和材料：
（一）单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）

（二）显微镜、载玻片
（三）A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）
（四）EDTA抗凝的待测红细胞全血
（五）竹签
二、方法（玻片法）：
（一）正定型：

1. 在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；
2. 在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；
3. 用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；
4. 轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5. 判读、解释并记录反应结果。
（二）反定型：
1. 在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型
红细胞悬液各一滴；
2. 在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
3. 混匀（同正定型）；
4. 轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
5. 判读、解释并记录反应结果。
6. 结合正反定型反应结果、判定血型，见表1
表1ABO血型正反定型试验结果判定
正定型 反定型 血型
抗体试剂+红细胞标本 红细胞试剂+血清标本
抗A 抗B A细胞 B细胞
+ O O + A
O + + O B
O O + + O
+ + O O AB
三、附注：
（一）表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；

（二）2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；
（三）若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；
（四）由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自
母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；
（五）做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做
反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。