薛建华ｌ１ｚ，吴胜权１．　，麻柱　，赵鹏　，宣柏华１，２，朱玉林１，２，李艳华　。，吕小青１，２　（１．北京奶牛中心１０２１００；２．国家奶牛胚胎工程技术研究中心１０２１００）　摘要：２００７年５月至２０１０年９月以来，在北京奶牛中心良种场及中国农机院小王庄牛场移植进　口奶牛胚胎。引进美、加系优质荷斯坦奶牛胚胎主要目的是选育优秀后备种公牛和种子母牛。截止　２０１０年９月，累计移植受体牛３４５头，使用胚胎３５１枚，妊娠２１９头，平均移植妊娠率为６３．４７％。移　植结果说明，本研究成功建立了一套进口胚胎移植技术方法。　关键词：进口奶牛胚胎；受体牛；胚胎移植；育种　中图分类号：￥８２３．３＋６　文献标识码：Ａ　文章编号：１００５—２７３９（２０１０）０６—００２７—０２　目前我国还没有完整的奶牛良种自主培育体　系，致使奶牛改良所需的种公牛完全依赖进口，奶牛　业发展难以摆脱对国外良种的依赖。美国、加拿大　２００３年发生疯牛病以后，直接进口活牛受到限制。　引进美、加系优质荷斯坦奶牛胚胎成了选育优秀后　备种公牛和种子母牛的首选。进口胚胎不仅节约了　引种费用，又可以规避带入疫病的风险。选择国外优　秀种公牛和种母牛，委托胚胎移植公司生产组合胚　胎，然后在国内进行移植。通过胚胎移植来建立一些　育种的核心群或者高产群，加强后备种公牛和种子　母牛的选择强度，自行培育拥有自主知识产权的奶　牛良种，建立完善的良种奶牛繁育体系和奶牛良种　产业化技术推广服务体系，对促进我国奶业的持续、　健康、快速发展具有重要意义。　１材料与方法　１．１胚胎　来源于美国的Ｓｕｎｓｈｉｎｅ、ＥｖｅｒＧｒｅｅｎ　Ｖｉｅｗ及加拿　大Ａｈａ等５个世界顶级奶牛育种公司。　胚胎均采用１．５　ｍｏｌ／Ｌ乙二醇作为抗冻保护剂，　解冻后直接进行移植。　１．２　受体牛　受体牛为北京奶牛中心良种场及中国农机院小　王庄牛场饲养的１４．５　ｌ５．５月龄的青年牛及ｌ～３　收稿日期：２０１０－０９—１９　基金项目：“十一五”国家科技支持计划项目“奶牛良种　扩繁技术产业地开发（编号２００６ＢＡＤ０４Ａ０２）；　北京市科委重大项目”奶牛良种产业化升级　技术研究与应用。　作者简介：薛建华（１９６５一），女，高级畜牧师。　胎成年母牛。青年受体牛多数是以自然发情为主，成　年母牛选择用ＣＩＤＲ＋ＰＧ方法进行同期化处理。在发　情后第６．５～７．５天，经过直肠检查有合格的黄体，清　洗、消毒外阴部后，采用非手术方法将胚胎移植到有　黄体侧子宫角大弯处。　１．３妊娠检查　在移植后３０　ｄ左右，部分受体牛先用Ｂ型超声　波进行妊娠的初检。全部受体牛在移植后６０～８０　ｄ　通过直肠检查确定妊娠状况。受体牛采用ＴＭＲ日粮　饲喂。　２　移植结果　累计移植受体牛３４５头，使用胚胎３５１枚，妊娠　２１９头，移植妊娠率为６３．４７％。详见表ｌ。　表１利用进１３胚胎移植情况　

３讨论　３．１从表ｌ中我们可以看出，在胚胎移植处理过程　中，共解冻胚胎３５１枚，移植３４５枚。有６个装有胚　胎的０．２５　ｍＬ塑料细管，从液氮罐中取出后，投入解　冻杯中时，细管棉塞端崩出，细管中的大半数液体丢　失，水进入细管中，导致胚胎不能使用。原因可能是　一

２７—　黑龙江动物繁殖第１８卷第６期２０１　０年　细管封口不严造成的。　３．２在准备好移植受体牛的情况下，分别解冻不同　公司的胚胎１Ｏ枚，在体式显微镜下进行胚胎形态学　质量评定，胚胎可用率达到９０％以上【】１。胚胎质量是　值得信赖的。　３＿３影响移植受胎率的因素是多方面的，比如移植　技术人员的经验、技术水平；受体牛的选择、判定卵　巢上黄体质量；季节等因素。但是对受体牛卵巢上　黄体质量的准确判定是提高移植受胎率的主要因　素【２，　。　３．４本次移植进口胚胎获得的平均受胎率为　６３．４７％，与美国、加拿大移植技术人员的移植结果　（６５．１％，２００２年）、加拿大（５９．７％，２００２年）相近嗍，移　植技术和经验值得推广和借鉴。　３．５通过胚胎移植出生后的公牛，按照种牛的选择　技术标准，合格者已经陆续进入种公牛站，用于种公　牛站牛群更新。这些种公牛对加速我国牛群改良和　促进我国奶业快速发展具有重要意义。　４参考文献　【１］Ｅｄｗｉｎ　Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ．Ｎｏｎ－Ｓｕｒｇｉｃａｌ　Ｅｍｂｒｙｏ　Ｔｒａｎｓｆｅｒ　７ＴＨ　Ｅｄｉｔｉｏｎ　２００１．．Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ＂Ｂｏｕｉｎｅ　Ｐｒａｃｔｉｏｉｎｅｌ￣Ｓｅｍｉｎａｒ．　［２］Ｗ￣ｉｓｈｔ　Ｊ　Ｍ．Ｎｏｎ．一Ｓｕｒｉａｌ　ｅｍｂｒｙ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｉｎ　ｃａｔｔｌｅ　ｅｍｂｒｙｏ＿ｒｅｃｐｉｅｎｔｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｉｏｇｅｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］，１９８１，１５：４３－５６．　［３］薛建华，周高举，赵鹏，等．转基因奶牛胚胎移植技术的试验　研究　中国奶牛，２０１０，９：２３—２６．　［４］ＲＪ　Ｍａｐｌｅｔｏｆｔ，Ｊｏｈｎ　Ｈａｓｌｅｒ．Ｅｍｂｒｙｏ　Ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＵＳＡ　２００２　牛胚胎移植过程中的几点注意事项　权东升，朱赫　中图分类号：￥８２３．３＋６　（黑龙江省家畜繁育指导站，哈尔滨１５００６９）　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００５—２７３９（２０１０　Ｊ０６—００２８—０２　胚胎移植技术是胚胎工程的重要组成部分，目　前已成为一项较成熟的生物技术。牛胚胎移植技术　被誉为继人工授精技术之后，繁殖技术发展的又一　次飞跃。通过胚胎移植可以在短期内借当地黄牛之　腹获得大量优质的后代，加速纯种的繁育，这对提高　当地黄牛的利用率、改良地方品种资源、增加农民收　入具有重要意义。　简单来讲，胚胎移植技术包括供体牛与受体牛　的选择、同步发情（又分为自然同步发情与应用药物　完成同步发情）、人工授精及胚胎的收集、胚胎移植、　对受体牛妊娠检查等几个部分。虽然胚胎移植已经　是一项成熟的技术，但在实际的胚胎移植工作过程　中，还存在很多值得我们注意的细节，这些都将对提　高胚胎移植受胎率起到关键作用。　１　选择和利用优质胚胎　胚胎质量的好坏直接影响着移植成功率。胚胎　分为４个等级。优级胚：形态正常，呈球形，裂球大小　和色泽一致的胚胎；良级胚：形态有轻微的缺点，如　收稿日期：２０１０—０８—１９　作者简介：权东升（１９８２一），男，本科，助理畜牧师。　一２８一　有少数退化的裂球、形状不太规范和极少量空泡；一　般胚：有被挤压突出的裂球，少量的空泡，但没有其他　严重的问题；低质胚：有许多退化、死亡的裂球，细胞　体积不均一，较多的空泡，但整体看胚胎仍然活着【ｌ】。　条件允许的情况下，应选择优质胚胎进行移植。另　外，有实验表明，利用鲜胚移植的受胎率高于冻胚移　植的受胎率翻。因此，在可以选择的情况下，尽量选择　高等级的鲜胚进行移植，可以有效地提高移植受胎　率。　就生产而言，体外受精（ＩＶＦ）胚移植成功率低于　体内胚，但因其生产成本较低，多年来一直是研究的　主要方向。从标准来看，生产方式不同，胚胎质量和　发育潜能不同，移植受胎率也不同，提高胚胎质量是　提高胚胎移植妊娠率的有效措施之一。　２选择适宜的受体牛　通过表型观测、查阅资料、了解繁殖史等可达到　初选的目的。但是进一步的选择，则需要娴熟的直肠　检查技术和丰富的实践经验，包括：繁殖障碍疾病诊　断，发情鉴定，卵泡发育、排卵、黄体发育、黄体形态　质地判断，妊娠诊断等。