北方药学２０１３年第ｌ０卷第４期　３．２抗氧化作用：对ＤＰＰＨ自由基的清除作用。桦褐孔菌甲醇　提物能剂量依赖性地对ＤＰＰＨ自由基有明显的清除作用，尤　其是高浓度５００ｍｇ／ｋｇ，其清除ＤＰＰＨ自由基的能力为　９２．８３％，具有良好的抗氧化前景，见表３。　表３桦褐孔菌甲醇提物对ＤＰＰＨ自由基的清除作用　４讨论　本研究表明，桦褐孑Ｌ菌甲醇提物对角叉菜胶所致大鼠足　肿、大鼠棉球肉芽组织增生有一定的效果，表明其具有良好的　抗炎作用，通过ＤＰＰＨ自由基清除实验发现，桦褐孔菌具有良　好的抗氧化作用。目前，药用真菌广泛被认可，桦褐孔菌作为　民间治疗疾病的真菌已被认为是纯中药，并是２１世纪的保健　食品ｌ】０１。为了有效合理地开发它的药用价值，仍需对它抗氧化、　抗炎的机制做进一步深入的探讨。　参考文献　［１ｌＪｏｏ　ＪＩ，Ｋｉｍ　ＤＨ，ｅｔ．Ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｃｈａｇａ　ｍｕｓｈｒｏｏｍ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ　ｏｂｌｉｑｕｕｓ）ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ　３Ｔ３一Ｌ　Ｉ　ａｄｉｐｏｃｙｔｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ【Ｊ］．Ｐ｝１ｙ—　ｔｏｔｈｅｒ　Ｒｅｓ，２０１０，２４（１１）：１５９２—１５９９．　『２］Ｙｏｕｎ　ＭＪ，Ｋｉｍ　ＪＫ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｇａ　ｍｕｓｈｒｏｏｍ（Ｉｎｏｎｏｔｕｓ　ｏｂｌｉｑｕ—　ＵＳ）ｉｎｄｕｃｅｓ　Ｇ０／Ｇ１　ａｒｒｅｓｔ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｈｅｐａｔｏｍａ　ＨｅｐＧ２　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００８，１４（４）：５１１—５１７．　『３］Ｌｕ　Ｘ，Ｃｈｅｎ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｈｖｐｏ—　ｇｌｙｃａｅｍｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔ￣ｒａｅｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｍｕｓｈｒｏｏｍ　ｌｎｏｎｏｔｕｓ　ｏｂｌｉｑｕｕｓ　『Ｊ１．Ｊ　Ｓｃｉ　Ｆｏｏｄ　Ａｇｒｉｃ，２０１０，９０（２）：２７６—２８０．　［４】高雪丽，高愿军，吴光辉．桦褐孔菌功能特性的研究进展ＩＪＩ．　食品与机械，２００６，２２（５）：１２６一ｌ３１．　【５１李仪奎．中药药理研究方法学【Ｍ］．北京：人民卫生出版社，　２００６：７５３，７６５．　『６１５桂宁，刘智生，周军，等．炎见宁片抗菌、抗炎及镇痛作用的　实验研究ＩＪ１．广西医学，２００９，１８７３—１８７５．　『７］－ｔ长智，黄蓓，庾志斌．四数九里香醇提物抗炎及镇痛作用研　究ｆＪ］．中国民族民间医药，２０１１，４３—４４．　『８１Ｆｕ　Ｌ，Ｃｈｅｎ　Ｈ，ｅｔ．Ｅｆｔｅｃｔｓ　ｏｆ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｈｙｓｉｃ—　ｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｐｏｌｖｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｍｕｓｈｒｏｏｍ　Ｉｎｏｎｏｔｕｓ　ｏｂｌｉｑｕｕｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ，　２０１０，７５（４）．　［９］张志国，陈锦屏，邵秀芝．红枣核类黄酮清除ＤＰＰＨ自由基　活性研究『Ｊ１．食品科学，２００７，２８（２）：６７—７０．　［１０］金光，杨思月，等．桦褐孔菌多糖的抗肿瘤作用实验研究…．　延边大学医学学报，２００４，２７（４）：２５７—２５９．　通讯作者　大补元煎加昧对小鼠抗疲劳和耐缺氧的实验研究　陈　靖　吴成举（辽宁中医药大学沈阳１１０８４７）　摘要：目的：研究大补元煎加味对小鼠抗疲劳和耐缺氧的影响。方法：采用小鼠负重水迷宫游泳和常温耐氧法。结果：大补元煎加　味大剂量组对照空白对照组，抗疲劳指标有显著差异，Ｐ＜Ｏ，Ｏｌ，小剂量组Ｐ＜Ｏ．０５；大补元煎加味大小剂量组对照空白对照组，耐　缺氧指标有显著差异，Ｐ＜０．０１。结论：大补元煎加味有较好的抗疲劳和耐缺氧作用，市场前景广阔。　关键词：大补元煎小鼠抗疲劳耐缺氧　中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ａ　文章编号：１　６７２—８３５１（２０１　３）０４—００６０—０２　大补元煎出自《景岳全书・新方八阵》之补阵，主治气血大　虚，肾虚精亏，精神失守之症。景岳日其为回天赞化，救本培元　第一要方。此方在后世治疗“疲劳综合症”、精力不足、气血虚　弱方面有很好的疗效。本文从实验角度观察了大补元煎对小　鼠抗疲劳和耐缺氧的实验研究，为进一步开发利用大补元煎　提供实验基础，也为中药治疗预防亚健康的临床应用提供新　的思路。　ｌ材料和方法　１．１实验动物：昆明种小鼠，普通级，雌性，１８—２４ｇ。由辽宁中医　药大学实验动物中心提供。　１．２药物与仪器：大补元煎加味：人参（党参代）、淮山药各１８ｇ，　熟地２４ｇ，当归、山茱萸、枸杞子各１２ｇ，杜仲９ｇ，炙甘草６ｇ处　方组成，用水提法提得提取物，配成浓度为２ｇ／ｍｌ；盐酸维拉帕　米注射液，上海禾丰制药有限公司提供，批号：二甲苯，中国医　药（集团）上海化学电子天平，余姚市金诺天平仪器有限公司；　Ｍｏｒｒｉｓ（包括电脑自动摄像装备系统）水迷宫系统。　１．３分组及给药方法：小鼠５０只随机分组，每组１０只。分为空　白对照组，给予生理盐水，０．５ｍｌ／ｌＯｇ］次，大补元煎组小剂量组，　０．１ｍｌ／ｌＯｇ／次，大补元煎组大剂量组，给予大补元煎加味浓缩　液，０．５ｍｌ／１０ｇ／次，日ｊ次；连续灌胃３０ｄ。耐缺氧实验阳性对照　组（维拉帕米），剂量为８ｍｇ／ｋｇ。　１．４统计学处理：实验数据均以（ｘ￣ｓ）表示，应用ＳＰＳＳ　１０．０统　计软件进行方差分析。　２检测项目及结果　２．１大补元煎加味对小鼠抗疲劳的影响：每组１０只小鼠，末次　灌胃ｌｈ后，在小鼠尾巴近端约１，３处夹一重４ｇ的铁夹子，分别　在温度３４℃、深４０ｃｍ的游泳池中游泳，分别观察和记录各组小　鼠从放入水中游泳开始至小鼠溺水死亡时间，以头部不能露　水面１０Ｃｌｎ为标准，结果见表１。可以看出，与生理盐水组比较，　大补元煎加味小剂量组和大剂量组均能明显延长负重小鼠游　泳存活时间，提示大补元煎加味具有一定的抗疲劳作用。　表１大补元煎加味对小鼠抗疲劳的影响（ｘ±ｓ）　组别　存活时间（ｒａｉｎ）　卒白对照组　大补元煎加味组（小剂墙组）　大补元煎加味组（大剂量组）　３．１６＋２３６　５．０３－＋ｌ　２５　６．３４￣３．Ｏ２　与空白组对照，　Ｐ＜Ｏ．０５，　Ｐ＜０．Ｏ１，ｕ＝ｌＯ。　２．２大补元煎加味对小鼠耐缺氧的影响：耐缺氧实验每组１０只　小鼠，末次灌胃ｌｈ后，将小鼠逐只放进盛有钠石灰１０ｇ的　２５０ｍｌ密闭的广口瓶巾，记录每组小鼠存活时问，结果见表２。　表２大补元煎加昧对小鼠耐缺氧的影响（Ｘ－＋Ｓ）　组别　存活时问（ｍｉｎ）　空白对照组　维拉帕米组　大补元煎加味组（小剂量组）　大补元煎加味组（大剂量组）　３３．２４＊－１．５１　４８．２ｌ±２　ｌ４　４０．３３￣３－２５　４３．５７－＋６　２６　与空白组对照，　０．０５，　Ｐ＜０．Ｏ１，ｒｌ＝１０。　３讨

论　北方药学２０１３年第１０卷第４期　６１　研究表明，运动时氧自由基增多最明显，氧自由基积累及　脂质过氧化加强，膜化反应造成细胞结构、功能破坏，三磷酸　腺苷生成减少，导致疲劳。因此，提高抗氧化酶的活性，降低自　由基代谢产物的生成是抵抗机体疲劳的重要途径。方中党参　补元气，熟地、当归滋阴补血，党参与熟地相配即是景岳之两　仪膏，善治精气大号之证，枸杞、萸肉补肝肾，杜仲温肾阳，甘　草助补益而和诸药。诸药配合，功能大补真元，益气养血，故景　岳曾称此方为“救本培元第一要方”。此方能显著对游泳小鼠　有抗疲劳作用，说明可能能较好地降低小鼠体内自由基的代　谢水平。　耐缺氧能力是间接反映抗疲劳能力的一组指标，因为疲　劳的过程中，往往伴随着组织缺氧，如果机体携氧利用氧的能　力强，就能产生更多的能量，同时，减少无氧酵解产生的乳酸　可延缓疲劳的出现。在本研究中，结果显示，大补元煎加味可　以延长小鼠在缺氧状态下的存活时间，说明该方可以增强小　鼠机体携氧和利用氧的能力。大补元煎加味在抗疲劳和耐缺　氧的方面作用显著，为其在职业易疲劳人群和老年人的保健　和临床治疗市场上将会有一定的开发潜力。　应用酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的影响因素探讨　Ｉ跞　冰（浙江省乐清市第二人民医院乐清３２５６０８）　摘要：目的：探讨酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的影响因素。方法：血清标本分为抗凝组、不抗凝组，所有标本同步进行检　测，以胶体金标法检测比较，分析各组ＨｂｓＡｇ的阳性率。结果：采用ＥＬＩＳＡ法检测不同血清状态ＨｂｓＡｇ的阳性率，不抗凝组的　阳性率明显低于抗凝组，抗凝组的假阳性率较高；ＥＬＩＳＡ法的灵敏度较金标法高。结论：酶联免疫吸附法检测ＨｂｓＡｇ可能会引　起结果有误，有外源性和内源性，影响因素多样，最主要的是标本溶血，为了确保检测结果的准确性，建议对血清标本进行必要　的处理。　关键词：酶联免疫吸附法乙肝表面抗原　中图分类号：Ｒ５１　２．６＋２　文献标识码：Ａ　文章编号：１　６７２—８３５１（２０１　３）０４—００６１—０１　乙肝表面抗原ＨｂｓＡｇ是肝细胞内表达的乙肝病毒的产　物，是感染乙肝病毒的血清标志物，是主要的感染指标之一。　在我国，坚持乙肝ＨｂｓＡｇ的主要方法之一就是酶联免疫吸附　法（ＥＬＩＳＡ），其用于检测血清或者血浆的标本，快速简便、高灵　敏度、特异性较强、可重复，因此，广泛应用于各类型医院的检　验科。但是有出现同一人在不同医院ＨｂｓＡｇ的检测结果不一　致，更甚的是，同一标本在同一检验室得出的结果都有不同的　情况发生Ｉ”。酶联免疫吸附法检测ＨｂｓＡｇ存在一定误差，会出　现假阳性、假阴性等现象。本文所作研究在于探讨酶联免疫吸　附法检测ＨｂｓＡｇ时的可能影响因素，以了解误差所在并做相　应预防措施，具体报道如下。　１资料和方法　１．１研究资料：采用我院２０１０年６月　２０１２年６月检测的血标　本３００例，按血清标本不同状态抗凝组和不抗凝组各１５０例，　男性１８０例，女性１２０例，年龄在１２～５６岁之间，既往无相关　肝炎病史。　１．２研究方法及评价标准：ＥＬＩＳＡ步骤严格按照试剂说明书：当　样品Ａ值≥２．１×阴性对照平均值时，结果定为阳性，否则为阴　性；金标准方法亦严格按照试剂说明书，出现红色质控线和反　应线为阳性，仅出现红色质控线为阴性。其中，ＥＬＩＳＡ法和金　标法检测均为阳性结果的，给予报告阳性；两者检测均为阴性　的报告阴性。　１．３统计学处理：采用ＳＰＳＳ　ｌ１．０统计学软件进行分析，采用卡　方检验，Ｐ＜０．０５表明差异有统计学意义。　２结果　２．１　ＥＬＩＳＡ法检测不同血清状态ＨｂｓＡｇ的阳性率情况：采用　ＥＬＩＳＡ法检测不同血清状态ＨｂｓＡｇ的阳性率，不抗凝组的阳　性率明显低于抗凝组，差异有统计学意义，Ｐ＜０．０５，见表１。　表１　ＥＬＩＳＡ法检测不同血清状态ＨｂｓＡｇ的阳性率比较（ｎ）　注：与不抗凝组对比，Ｐ＜０．０５。　２．２采用ＥＬＩＳＡ法检测的乙肝表面抗原阳性率敏感性为８８％　（３０／３４），明显高于采用胶体金标法检测的乙肝表面抗原阳性　率，敏感性为７０％（３０／４３），特异性为９５％（２５３／２６６），略低于采　用胶体金标法检测的特异性９８％（２５３／２５７　ｏ　表２两种检测方法的灵敏度和特异性比较（ｎ）　３讨论　乙肝病毒表面抗原是乙肝病原的主要标志物，ＥＬＩＳＡ法是　诊断乙型肝炎病毒的主要手段。通常体检时，要求ＨｂｓＡｇ阴性　即可，其报告结果的准确性尤为重要。ＥＬＩＳＡ操作涉及到血液　标本的留取及处理，标本及试剂的加样、孵育、洗板、显色终止　以及判读结果，其中任何一个环节都能影响最终的结果导致　假阳性或者假阴性　。　本文选择不同状态的血清状态作为对照研究，结果提示，　不抗凝组的阳性率明显低于抗凝组，提示抗凝组的假阳性率　较高。ＨｂｓＡｇ出现假阳性率的原因是标本中含有纤维蛋白，主　要有标本溶血或者分离不彻底，造成操作过程中洗涤较难，显　色出现行等最终导致结果误差。与金标法比较，ＥＬＩＳＡ法灵敏　度较高，特异性略低。　为尽可能避免ＥＬＩＳＡ的误差，得到较为准确的结果，需注　意以下几点：第一，血清标本给予抗凝血，便于标本离心彻底；第　二，标本确保其血块浓缩，使其中的其余活性物质失活，降低异　物导致的假阳性结果；第三，离心分离血清时加大转速，延长离　心时间，充分离心标本，避免红细胞以及纤维蛋白的影响；最后　加样操作时注意手法精确，避免吸到红细胞或者纤维蛋白＿引。　综上所述，选择好标本，严格操作步骤，设立阴阳对照以　及临界值，注意操作手法，避免人为误差，严谨对待每一份标　本，杜绝假阳性、假阴性结果的发生，确保结果的真实性，从而　为临床服务。　参考文献　［１］臧勇．酶联免疫吸附法检测乙肝五项结果常见影响因素分析　［Ｊ］．中国实用医药，２０１０，２４：１２４—１２５．　【２】王一丁．酶联免疫吸附法检测ＨＢｓＡｇ结果的影响因素探讨　Ⅲ．海南医学，２０１２，２４：１０３—１０５．　Ｉ３】邵维杰，肖艳群，陈慧英，等．酶联免疫吸附试验定性检测乙　肝表面抗原测量不确定度评定的探讨［Ｊ］．检验医学，２００９，２４　（７）：５４５—５４７．