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百合组培方案

百合组织培养方案

植物介绍:百合是百合科属多年生草本鳞茎植物,是世界著名的观赏花卉。全世界的本属植物约有94种,主要分布在北半球的温带和寒带地区,少数种类分布在热带高海拔地区。中国是百合属植物分布最多的国家,也是世界百合起源的中心,据调查约有47种18个变种,占世界百合总数的一半以上,其中有36种15个变种为中国特有种。

1. 供试材料来源:在花店购得新鲜百合,取百合的鳞片为外植体。

2. 技术路线:在无菌条件下,将离体的植物器官,组织,细胞以及原生质体,在人工控制的环境里培养成完整的植株。

3. 方法步骤:

(1) 外植体的剪取与消毒程序: 取材及灭菌优选生长健壮、开花性状好的种球作为外植体。在取材前,将准备接种的鳞茎在4~5℃的低温下处理6~8周,然后经饱和漂白粉上清液清洗后,用无菌水冲洗一次。剥去鳞茎外皮及外部2~3层鳞片,切去少许顶部及基部,先用75%的酒精浸泡30~60S,然后在0.125%HgCl2溶液中处理5~10分钟,无菌水洗3~4次,即可进行无菌操作切块(段)接种。

(2) 初代培养基的筛选:M S+6-BA 1.0m g/L+NAA 0.1m g/L

(3) 增殖培养基额筛选:M S+6-BA 0.5m g/L+NAA 0.5m g/L

(4) 生根培养基的筛选:1/2MS+NAA0.1mg/L。

(5)试管苗移栽实验:当试管苗的根原基突起或形成几毫米长的短根时,将其取出,洗去琼脂,移入有少量营养的人工基质中。移栽后,保持高湿度,避免阳光直射和过大的温度波动,经过7d的逐步锻炼过程,再定植到土壤中。

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