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浙科版生物选修一生物技术实践模块

选修1:生物技术与实践
实验11
植物的组织培养
写一写:植物组织培养的形成新植株的流程图
离体植
物组织
脱分化?
愈伤组织
再分化?
根、芽
新植株
摇床震荡液体悬浮培养
单细胞(胚性细胞)
胚状体
说一说:组织培养的条件

无菌环境


一定的温度
一定的光照
防止外植体带菌、保 证培养基及接种器具 彻底灭菌、严格遵守 无菌操作规程
70%的酒精擦超净台,酒精灯旁,将外植体插入培养 基中,不要倒插,每瓶接种2-3段幼茎切断。
培养条件
温度:18-25度
光照:大于14.5h
生茎培养(丛状苗)
生根培养
总结:在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的? 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)
2、外植体的消毒(酒精、氯化汞)
3、接种的无菌操作(酒精、酒精 灯——灼烧)
4)逐渐减小 先增加后下降、不能;(5)降低

染色体畸变 细胞核变异 遗传物质的改变 非整倍体的产生 激素平衡被打破 对外源生长物质的敏感性发生改变 生长 其他原因 发育
条件 的改 变
(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技 术可以保持品种的 遗传性 ,繁殖种苗的速 度 快 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最 终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全 部 遗传信息 。 (2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台 上进行,其原因是避免 微生物 的污染。 (3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱 导试管苗 ,而与细胞分裂素 配比适宜时可促进芽 的增殖。若要抑制试管苗的生长,促使愈伤组织产生和生 长,需尊使用的生长调节剂是 (脱落酸、2, 4-D)。
4、超净台中操作
应用1:某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找 污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外共他均相同。下列 各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是什么?
污染主要不是培养基灭菌时间短造成的; 污染主要来源于组织培养所用的离体组织; 调节培养基pH不能解决污染问题; 调节培养温度不能解决污染问题。
4)将某植物试管苗培养在 含不同浓度蔗糖的培养基 上一段时间后,单株鲜重 和光合作用强度的变化如图。 据图分析,随着培养基中蔗 糖浓度的增加,光合作用强度 的变化趋势是 ,单株鲜重的变化趋势 是 。据图判断,培养基中不含蔗糖时,试管 苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满 足自身最佳生长的需要。 (5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中提高其 光合作用能力,应 (降低,增加)培养基中 蔗糖浓度,以便提高试管苗的自养能力。
①按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验 结果。
使用顺序 先使用生长素,后使 用细胞分裂素 实验结果
有利于细胞分裂, 但细胞不分化
细胞既分裂又分化
先使用细胞分裂素, 后使用生长素
同时使用Hale Waihona Puke 分化率提高使用比例
实验结果
生长素/细胞分裂素高
生长素/细胞分裂素低 生长素/细胞分裂素相当
有利于诱导根的形成 有利于诱导芽的形成 愈伤组织生长不分化
1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的 不同? 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不 同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物 包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?
组织的脱分化及愈伤组织的再分化。
植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素的配比。
含有全部营养成分的培养基
适合的PH 植物激素比例合适
MS培养基

适宜的外植体
细胞分裂素 和生长素
任务:阅读课文写出菊花组织培养操作流程
培养基的配制?
外植体的获取和消毒?
接种
场所与注意事项?
培养(丛状苗的培养和生根培养)生芽和生根培养皿移栽 移栽 (草炭土或蛭石中) 炼苗 定植

大量元素 微量元素 有机成分
萘乙酸NAA 苄基腺嘌呤BA
2.生芽培养基 3.生根培养基

配制母液 配制培养液 熔化琼脂 调pH 高压蒸汽灭菌

若从自然种群中获取的外植体该如何处置?
5%次氯酸钠5min 5%次氯酸钠5min
70%乙醇浸泡10min
超净台中无菌水清洗


课本实验用的是无菌菊花苗 因此不用外值体消毒 ★注意要无菌操作
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